春石斛（Dendrobium nobile）组织培养快繁体系的构建

论文摘要

春石斛（Dendrobium nobile）是兰科重要的观赏花卉之一。春石斛盆花新奇,符合人们求新求异的消费特点,在产业化盆花品种中具有显著优势,是技术含量高,利润空间大的产业。本研究通过对春石斛组织培养研究,构建其组培快繁体系,为春石斛优良种苗规模化生产提供理论依据。研究结果如下:（1）基于茎尖培养的类原球茎诱导、增殖及分化:解剖镜下剥取茎尖,进行春石斛类原球茎的诱导和增殖。类原球茎的诱导最适宜的基本培养基为MS,生长调节物质以浓度为0.2mg/L的2,4-D诱导类原球茎最适宜。在不同浓度生长调节物质NAA处理中,以1.0mg/L的增殖效果最好,类原球茎生长较好,增殖系数分别为3.55倍。而类原球茎的分化培养以0.5mg/L NAA分化效果最好。因此春石斛类原球茎诱导、增殖和分化培养条件分别为: MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+2 , 4-D0.2mg/L ,1/2MS+KT0.05mg/L+NAA1.0mg/L,1/2MS+BA0.5mg/L+ NAA0.5mg/L。（2）不同培养基组分对春石斛茎段培养的影响:茎段培养以MS基本培养基为好;在碳源的选择上,以3%蔗糖效果最好,而以葡萄糖和果糖作碳源,无论是生物量增加还是出芽率都较低。有机添加物椰乳相比于香蕉汁和苹果汁的效果最好;植物生长调节物质以0.05mg/L的TDZ增殖最好。（3）茎段的基部组织（茎基）诱导丛生芽增殖:利用茎基诱导丛生芽,结果表明1/2MS+Cw150ml/L+KT0.5mg/L+ NAA2.0mg/L的诱导效果最好,诱导率为81.4%;MS+KT0.5mg/L+NAA0.5mg/L丛生芽增殖效果最好。（4）壮苗生根: MS +0.5mg/L IBA培养基中以添加5%椰乳、1 g/L活性碳为宜。植物生长调节物质NAA浓度为1.0 mg/L时植株健壮整齐,根的数目、长度、粗细均匀生长良好。（5）移栽驯化:试管苗在移栽前拧松瓶盖,在组织培养室外炼苗5d,然后去掉瓶盖1 d后取出试管苗进行移植,其平均成活率最好达84%;组培驯化苗培养在光照强度为1500Lx的光照培养箱内,春石斛无菌苗生长最佳,其成活率为85.9%;培养温度在25℃的条件下,春石斛的组培苗的成活率为86%,其苗的新根更加容易长出,生长态势也更健壮;空气相对湿度为85%时,其成活率达83.6%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 石斛兰简介
• 1.1.1 资源分布及生物学特性
• 1.1.2 石斛兰的观赏特性和药用价值
• 1.2 春石斛离体快繁的研究进展
• 1.2.1 原球茎（类原球茎）的培养
• 1.2.2 丛生芽的培养
• 1.2.3 石斛属植物组织培养基本培养基的研究
• 1.2.4 石斛属植物组织培养植物生长调节剂的研究
• 1.2.5 石斛属植物组织培养培养环境的研究
• 1.2.6 春石斛在其它方面的研究
• 1.3 立题依据和研究目的
• 1.3.1 立题依据
• 1.3.2 研究目的和意义
• 1.4 研究内容
• 第二章 材料与方法
• 2.1 供试材料
• 2.2 技术路线
• 2.3 茎尖诱导类原球茎增殖培养方案设计
• 2.3.1 类原球茎诱导培养
• 2.3.2 类原球茎增殖培养
• 2.3.3 类原球茎分化培养
• 2.4 春石斛茎段培养的培养基组分筛选
• 2.4.1 不同基本培养基对春石斛茎段培养的影响
• 2.4.2 不同生长调节剂及其浓度对春石斛茎段培养的影响
• 2.4.3 不同添加物对春石斛茎段培养的影响
• 2.4.4 不同碳源对春石斛茎段培养的影响
• 2.5 春石斛丛生芽诱导增殖培养方案设计
• 2.5.1 春石斛丛生芽诱导培养方案
• 2.5.2 春石斛丛生芽增殖培养方案
• 2.6 春石斛生根培养方案设计
• 2.6.1 不同有机添加物对试管苗生根壮苗的培养
• 2.6.2 不同浓度活性炭对试管苗生根壮苗的培养
• 2.6.3 不同浓度的NAA 对试管苗生根壮苗的培养
• 2.7 春石斛的移栽驯化
• 2.7.1 不同炼苗时间对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 2.7.2 不同光照强度对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 2.7.3 不同温度对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 2.7.4 不同湿度对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 2.8 数据计算方法与分析工具
• 第三章 结果与分析
• 3.1 春石斛类原球茎的诱导和增殖
• 3.1.1 基本培养基对类原球茎诱导的影响
• 3.1.2 2,4-D 对类原球茎诱导的影响
• 3.1.3 NAA 对类原球茎增殖分化的影响
• 3.2 春石斛茎段培养
• 3.2.1 基本培养基对春石斛茎段培养的影响
• 3.2.2 生长调节剂及其浓度对春石斛茎段培养的影响
• 3.2.3 添加物对春石斛茎段培养的影响
• 3.2.4 碳源对春石斛茎段培养的影响
• 3.3 春石斛丛生芽诱导和增殖
• 3.3.1 春石斛丛生芽诱导
• 3.3.2 春石斛丛生芽增殖
• 3.4 春石斛生根壮苗培养
• 3.4.1 不同有机添加物对春石斛试管苗生根壮苗的影响
• 3.4.2 不同浓度活性炭对春石斛试管苗生根壮苗的影响
• 3.4.3 不同浓度的NAA 对试管苗生根壮苗的影响
• 3.5 春石斛的移栽驯化
• 3.5.1 炼苗时间对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 3.5.2 不同光照强度对春石斛组培苗驯化生长的影响
• 3.5.3 不同温度对春石斛组培苗生长驯化的影响
• 3.5.4 不同空气相对湿度对春石斛组培苗生长驯化的影响
• 第四章 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 4.2.1 春石斛类原球茎诱导、增殖和分化培养条件
• 4.2.2 春石斛茎段培养条件
• 4.2.3 春石斛丛生芽的诱导和增殖培养条件
• 4.2.4 春石斛生根壮苗最佳培养条件
• 4.2.5 春石斛移栽驯化环境条件
• 参考文献
• 附录1
• 试验相关仪器
• 缩略词表
• 附录2（附图）
• 图一：茎尖诱导类原球茎增殖
• 图二：茎段诱导培养增殖
• 图三：丛生芽的诱导和增殖
• 图四：生根壮苗
• 个人简介
• 在校期间发表论文情况
• 致谢