晏红兰玉梅(江油市第二人民医院检验科四川江油621701)
【摘要】目的：研究两种方法同型交叉配血的结果及其对于临床安全输血的意义。方法：分别用两种方法对360份临床受血者标本进行交叉配血，仔细观察并记录交叉配血结果。结果：360份临床受血者标本用微柱凝胶法有349份标本配血结果相合（主侧或次则无凝集无溶血为相合），有11份标本结果为±～+的凝集，为配血不相合（主侧或次侧有凝集或溶血为不相合）；凝聚胺法有357份标本为配血结果相合，有3份标本为配血结果不相合，而这3份标本用微柱凝胶法配血其结果亦为不相合，两种方法交叉配血的结果差异有统计学意义（X2=4.16，P<0.05）。结论：用微柱凝胶卡进行交叉配血灵敏度更高、结果更容易观察，更能减少临床输血不良反应的发生。
【关键词】凝聚胺法微柱凝胶卡同型交叉配血
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）12-0117-02
Condensationaminelawandthemicrocolumngelatincardsametypematchesthebloodalternatelytheresultanalysis
JiangYoushisecondpeoplehospitalinspectiondepartmentYanHong,lanyumei621701
【Abstract】Objective:Studiestwomethodstomatchthebloodalternatelytheresultandregardingtheclinicalsecuritybloodtransfusionsignificance.Method:Usestwomethodsclinicallytocarryonseparatelyto360thebloodspecimenmatchesalternatelytheblood,observescarefullyandrecordsmatchesthebloodresultalternately.Result:360clinicalarehadthebloodspecimenwiththemicrocolumngelatinlaw349specimenstomatchthebloodresulttocoincide(hostsideortimedoesnothavewithoutagglutinationhematolysisfortocoincide),some11signownersideorinferiorsideresultfor±～+theagglutination,formatchesthebloodnottocoincide(hostsideeitherinferiorsidehasagglutinationorhematolysisfordoesnotcoincide);Thecondensationaminelawhas357specimensfortomatchthebloodresulttocoincide,some3specimensformatchthebloodresultnottocoincide,butthese3specimensmatchthebloodresultwithmicrocolumngelatinFrenchpenicillinblooditalsofornottocoincide,twomethodsmatchthebloodtheresultdifferencetohavestatisticssignificancealternately(X2=4.16,P<0.05).Conclusion:Carriesonwiththemicrocolumngelatincardmatchesthebloodsensitivitytobehigheralternately,theresultiseasiertoobserve,canreducetheoccurrencewhichtheclinicalbloodtransfusionrespondednotgood.
【Keyword】CondensationaminelawThemicrocolumngelatincardThesametypematchesthebloodalternately
凝聚胺法交叉配血具有操作简单、快速、检测成本低且能检测受血者和供血者之间存在的IgM、IgG抗体[1]的优点，现在还在很多基层单位尤其是急诊抢救用血时广泛使用；微柱凝胶卡可检测出标本血清中的IgM和IgG型红细胞血型完全及不完全抗体[2]，具有标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简便，结果可长期保存等优点[3]，但由于其比凝聚胺法配血时间长，因此在急诊抢救用血进行交叉配血时存在一定的不足；在操作的方便程度上，因凝聚胺法除了加受血者及供血者血浆或红细胞悬液外，中途还要加3种检测试剂，并且每加一种试剂都要轻轻震荡混匀；凝聚胺法的操作不易标准化，受人为影响因素较大，如试管的震荡力度和对弱凝集的判定易受操作者的经验和视力等影响[4]；而微柱凝胶法只加受血者及供血者血浆或红细胞，不用加其他反应试剂，操作过程简单易标准化；因此微柱凝胶法为临床安全输血提供了更为广阔的空间。
1.材料与方法
1.1标本来源及处理2010年11月至2012年12月我院需要输血治疗的受血者标本，用EDTA-K2抗凝静脉血3ml，以3000r/min离心2分钟，以确保血浆中无纤维蛋白凝块的干扰。
1.2仪器与试剂TD-3A型血型血清学专用离心机、FYQ型免疫微柱孵育器均由长春博研科学仪器有限责任公司提供；抗人球蛋白交叉配血卡、不规则抗体筛查卡、均采用长春博迅生物技术有限责任公司产品；凝聚胺介质试剂由（台资）珠海贝索生物技术有限公司提供。微柱凝胶配血卡、不规则抗体筛查卡在使用前均用TD-3A型血型血清学用离心机离心5分钟，900rpm2分钟，1500rpm3分钟，以防在运输过程中的抖动引起微柱凝胶的松散及界面不整齐而影响反应结果。所有仪器均在规定时间内进行校准，所有试剂均在有效期内。
1.3检测方法及结果判断
1.3.1微柱凝胶卡交叉配血：在抗人球蛋白交叉配血卡上注明受血者的名字，然后在主侧中加入受血者血浆及献血者0.5%-0.8%红细胞悬液各50ul,在次侧管中加入受血者0.5%-0.8%红细胞悬液及献血者血浆各50ul,加样后的试剂卡置37℃中孵育15分钟后用专用离心机离心5分钟取出观察结果[5]。其结果及判断标准如下表：
表1微柱凝胶法不同凝集强度判断标准[6]
结果判断4+3+2+1++/_—
判断标准RBC凝块清楚地集中在凝胶载体的顶部RBC凝块绝大部分集中在凝胶载体的顶部，少部分位于凝胶中上部RBC凝块大部分位于凝胶载体中部，少部分位于凝胶载体中下部RBC凝块大部分位于凝胶载体底部，在凝胶载体下1/3中有少部分散在凝块存在RBC凝块绝大部分位于凝胶载体底部，在凝胶载体下1/3中有极少部分散在凝块存在RBC完全沉积在凝胶载体的底部
1.3.2凝聚胺交叉配血：在主侧管中加入受血者血浆2滴及献血者5%红细胞悬液1滴,在次侧管中加入受血者5%红细胞悬液1滴及献血者血清2滴，各管加LIM液0.65ml，混合均匀后，再各加凝聚胺液2滴，并均匀混合；3400转/离心10秒，弃去上清液，管底残留约0.1ml液体；轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做；如有凝集，则加入悬浮液2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果[7]。其结果判断标准如下：凝集在1min内散开，表示凝集为凝聚胺引起的非特异性凝集，交叉配血结果为阴性，受血者和供血者血液相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，交叉配血结果为不相合。
1.4统计分析方法：均采用计数资料的卡方（X2）检验[8].
2.结果
2.1360份受血者标本用上述两种方法交叉配血结果见表2，X2=4.16，X20.05（1）=3.84，,P<0.05两种方法间差异有统计学意义。
表2360份受血者标本两种方法交叉配血结果
方法结果
相合不相合
凝聚胺法3573
微柱凝胶法34911
2.2两种方法配血结果不相合的11份标本（凝聚胺法配血不相合的3份标本用微柱凝胶法配血结果亦不相合）,其配血结果如表3：
表311份受血者标本两种方法交叉配血结果
方法结果
相合不相合
凝聚胺法83
微柱凝胶法011
3.讨论
我院通过对2010年11月至2012年12月共360份受血者标本分别用凝聚胺法及微柱凝胶卡法进行同型交叉配血，结果凝聚胺法有3份标本交叉配血结果为不相合；微柱凝胶法除了这三份标本亦不相合外，还有8份标本交叉配血结果不相合，并且两种方法的结果差异有统计学意义，与一些参考文献上报道的两种方法的配血结果无统计学差异不符，主要原因在于：①凝聚胺法加样步骤较多（除加入受血者及献血者样本外，还有三种试剂，中间需要两次轻摇反应管混匀），其操作受人为影响因素较大，如试管的震荡力度和对弱凝集的判定，并且对于一些弱凝集的判定受操作者的经验和视力等的影响因素较大，而微柱凝胶法只需加入受血者及献血者样本，然后专用孵育箱孵育，专用离心机离心，其比凝聚胺法加样步骤少，操作更简单更易标准化，其敏感性更高，产生的系统误差更小②凝聚胺法对于弱凝集的判断没有统一的标准，受操作者经验的影响较大，不同的操作者会得出不同的结果；而微柱凝胶法对于弱凝集的判断有统一的标准且受操作者经验的影响很小；③.造成两种方法交叉配血的结果有统计学差异的原因与血型不规则抗体和抗人球蛋白是否有关系？这将是我下一步要研究的问题，希望能够找到一种安全、简单、快速的配血方法以满足临床的需要。
参考文献
[1]吴国光.实用临床输血技术.第1版.人民卫生出版社，2012：108
[2]吴国光.实用临床输血技术.第1版.人民卫生出版社，2012：110
[3]舒象武.应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血[J].中国现代医学杂志，2003，13（I）:116-118
[4]LiuF，HuLHSerumproteinmediaareimportanttdctorsinthemanualhexadimethrinebromide(polybrene)test，experienceinChina[J],TransfusClinBiol,2005,12(1):34-37
[5]吴国光.实用临床输血技术.第1版.人民卫生出版社，2012：110-111
[6]吴国光.实用临床输血技术.第1版.人民卫生出版社，2012：115
[7]吴国光.实用临床输血技术.第1版.人民卫生出版社，2012：109
[8]马斌荣.医学统计学.第4版，人民卫生出版社，2005：77