论文摘要
脑血管病是威胁人类生命和健康的三大疾病之一,是中老年人的常见病和多发病,具有发病率高、死亡率高、致残率高和复发率高的特点。在缺血性脑卒中急性期的治疗中,目前文献报道尚无特效的疗法,其治疗关键是尽早恢复血流,但是再灌注本身亦可引起再灌注损伤。许多研究证实高压氧联合药物等的综合疗法是提高缺血性脑卒中疗效,减轻药物副作用的实用而有效的方法。 在再灌注损伤的过程中,血小板膜糖蛋白及白细胞粘附分子在这一过程中发挥着重要作用,目前,多种中药及高压氧治疗缺血性脑血管病已取得许多实验证据和临床经验。但是对于其机理的了解尚不充分,为进一步阐明其治疗机制,我们设计了如下课题:应用流式细胞术,观察脑缺血再灌注小鼠血小板 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/CD18、CD11b/CD18、CD62L表达的变化及中药丹葛冲剂及高压氧对其表达的影响。 本文研究的中药丹葛冲剂具有活血化瘀、行血通络的作用,文献报道亦证实,丹参、葛根对缺血性脑血管病有非常好的疗效,本实验从细胞、分子水平探讨中医药对脑缺血再灌注损伤的治疗作用及机理,旨在对中医临床的治疗提供实验依据。 本文分为文献篇和实验篇两部分,在文献综述部分,首先就高压氧、丹参及葛根在缺血性脑卒中方面的应用及治疗机制作了全面概述;其次,从中、西医两个方面对 10 年来缺血性脑卒中病因病机的认识及治疗作了一个全面回顾;最后,就本实验所采用的急性不完全性脑缺血再灌注模型的制作特点及评价作了一个简单的综述。 在实验研究部分,首先,本实验研究了中药丹葛冲剂与高压氧联合应用对脑缺血再灌注作用的影响,采用小鼠实验性脑缺血再灌注模型,从缺血再灌注损伤发生的两条主要途径:血栓形成和炎症反应两方面,观察联合治疗对血小板膜糖蛋白、白细胞粘附分子的影响;其次又采用相同模型,观察单纯丹葛冲剂治疗对脑缺血再灌注后的血小板膜糖蛋白、白细胞粘附分子的影响;最后,采用 HE 染色法,观察丹葛冲剂对脑缺血再灌注后脑组织形态学的影响。 中药丹葛冲剂与高压氧联合应用作用于脑缺血再灌注的实验分为六组:正常对照组（假手术组 sham）,模型组（缺血再灌注组 IR）,高压氧组（HBO）,高 压 氧 与 丹 葛 冲 剂 高 剂 量 组 （HBO&DG-H）, 高 压 氧 与 丹 葛 冲 剂 中 剂 量 组（HBO&DG-M）, 高压氧与丹葛冲剂低剂量组（HBO&DG-L）。实验各组分别在造模后 1、3、5 天（d）取材,用流式细胞术检测动物血小板膜糖蛋白 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/cd18、 CD11b/cd18、 CD62L 的表达的变化。中文摘要 3中药丹葛冲剂作用于脑缺血再灌注损伤实验分为正常对照组（假手术组sham）,模型组（脑缺血再灌注组 IR）,丹葛冲剂中剂量（DG-M）组。实验各组分别于造模后 1、3、5 天（d）取材,用流式细胞术检测动物血小板膜糖蛋白 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/cd18、CD11b/cd18、CD62L的表达的变化及观察 HE 染色显示脑组织形态学的变化。主要实验结果如下:1.中药丹葛冲剂联合高压氧可有效抑制脑缺血再灌注后血小板膜糖蛋白 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/cd18、CD11b/cd18、CD62L 的异常表达,其作用效果与单纯应用高压氧相比,有的相似,少部分效果优于高压氧,从三种用药剂量对检测指标的作用效果来看,以丹葛冲剂中剂量组与高压氧联合应用效果更好一些。2.单纯中药丹葛冲剂中剂量组亦可明显抑制脑缺血再灌注后血小板膜糖蛋白 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/cd18、CD11b/cd18、CD62L 的异常表达,与同期高压氧组相比,在抑制血小板膜糖蛋白 CD31C、D61C、D62P 及白细胞粘附分子 CD11a/CD18方面,其总体效果有的相似,少部分效果优于高压氧,其中尤以 5 天组效果最显著。脑组织病理形态学观察可见:（1）模型组:CA1 区、CA3 区细胞数目减少,神经元变性或核固缩,深染,部分细胞轮廓消失,尤以 5 天组明显。（2）中药组:CA1 区、CA3 区细胞数目有所减少,但多于模型组,也出现神经元变性和核固缩,但存在的正常神经元远远多于模型组。结论:实验采用的实验性不完全脑缺血再灌注模型,结果稳定可靠。研究表明丹葛冲剂对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。其作用机制表现在可有效抑制脑缺血再灌注后血小板膜糖蛋白 CD31、CD61、CD62P 及白细胞粘附分子 CD11a/cd18、CD11b/cd18、CD62L 的异常表达,丹葛冲剂与高压氧联合治疗可起到更好的作用,以中剂量用药药效作用最为理想,与高压氧相比,作用效果相仿或少部分优于高压氧。关键词: 丹葛冲剂; 高压氧; 脑缺血再灌注; 血小板膜糖蛋白; 白细胞粘附分子; 小鼠
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