论文摘要
目的:用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人脐静脉内皮细胞,在体外模拟内皮细胞的炎症状态,观察阿托伐他汀、LXR激动剂T0901317及两者合用对LPS刺激的人脐静内皮细胞中胆固醇调节受体LXRα及其靶基因ABCA1 SREBP-lc,炎症因子IL-6、粘附因子PEC AM-1 ICAM-1的mRNA表达的影响,并探讨其相关机制。方法:将人脐静脉内皮细胞用含有10%胎牛血清、1%双抗(链霉素/青霉素)的Gibco1640培养基进行培养,并按细胞计数后培养至6孔板中,进行以下干预实验。①对照组(加入2μl的PBS溶液)与脂多糖干预组(用终浓度为100ng/ml的LPS干预细胞24小时);②阿托伐他汀干预组(用不同浓度的阿托伐他汀0.1μmol/L、1μmol/L 10μmol/L及DMSO)干预细胞2小时,然后加入脂多糖共同干预22小时;③LXR激动剂T0901317干预组(先用T0901317 1μmol/L或DMSO干预细胞2小时,然后加入脂多糖共同干预22小时);④阿托伐他汀+T0901317组(先用DMSO.阿托伐他汀、T0901317以及阿托伐他汀和T0901317共同干预2小时,然后加入脂多糖100ng/ml共同干预22小时)。以上所有实验后收获细胞,用Trizol提取细胞总RNA,然后进行逆转录,并行real-time PCR进行半定量测定。比较各组中LXRα及其靶基因、炎症因子及粘附因子的表达变化。结果:与对照组相比,LPS可以抑制人脐静脉内皮细胞中LXRα及其靶基因ABCA1、SREBP-1 mRNA的表达,促进炎症因子IL-6及粘附因子ICAM-1、PECAM-1 mRNA的表达;阿托伐他汀可以呈浓度依赖性地上调细胞中LXRα及其相应靶基因的表达,抑制相应炎症因子及粘附因子表达,而T0901317可以明显上调细胞中LXRα、ABCA1及SREBP-1的表达,抑制IL-6、ICAM-1及PECAM-1的表达;T0901317和阿托伐他汀合用可明显增强以上基因的表达变化。结论:1、LPS可以抑制人脐静脉内皮细胞中LXRα及其靶基因的表达;2、阿托伐他汀可能部分通过LXRα信号通路抑制内皮细胞的炎症状态;3、LXR激动剂T0901317具有改善内皮细胞功能的作用;4、阿托伐他汀与LXR激动剂合用对抑制内皮细胞的炎症反应有协同效应。
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