论文摘要
研究背景输卵管因素和盆腔因素分别占了女性不孕因素的22%和12%,而其中约1/3合并输卵管积水。体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）的发展为输卵管因素不孕患者带来了福音,但临床观察结果表明,输卵管积水严重影响了IVF-ET的成功率。目前输卵管积水如何影响IVF-ET结局的确切机制尚未完全明确,多数学者认为与机械冲刷、胚胎毒性、影响子宫内膜容受性、影响子宫内膜下血流、子宫内膜炎性反应等机制有关,其中子宫内膜容受性作为IVF成功的两个关键因素之一而备受关注。子宫内膜在一段很短又极敏感的时期允许胚胎植入,即种植窗期,此期子宫内膜接受胚胎植入的能力的强弱就是子宫内膜容受性。种植窗期子宫内膜在激素的调控下经历特殊的变化,涉及一系列细胞、分子的信号传递过程,子宫内膜部分局部因子的表达与种植窗期启闭同步,称为子宫内膜容受性相关标志物。输卵管积水是否通过改变了子宫内膜容受性相关标志物的表达而改变了子宫内膜容受性是当前研究的热点之一。研究目的通过研究输卵管积水患者子宫内膜容受性相关局部因子的变化,探讨输卵管积水对子宫内膜容受性的影响,进而探讨输卵管积水影响IVF-ET结局的相关机制,同时结合IVF-ET结局评估子宫内膜容受性相关因子的表达与输卵管积水患者妊娠结局的相关性,为寻找可用于评估临床结局的子宫内膜容受性标志物打下研究基础。（一）输卵管积水对IVF-ET结局的影响资料与方法回顾性分析2005年1月2009年12月在广州医学院第三附属医院生殖中心因输卵管因素不孕症行IVF-ET治疗的患者954例（1102个周期）,分为输卵管积水组（A组）49例（60个周期）与双侧输卵管阻塞组（B组）905例（1042个周期）,比较两组患者Gn总量、控制性超排卵天数、HCG日直径>12mm的卵泡数、获卵数、移植胚胎数、冷冻胚胎数、受精率、胚胎种植率、移植取消率、生化妊娠率、临床妊娠率、多胎妊娠率、早期流产率、中晚期流产率、异位妊娠率。结果两组患者Gn总量、超排天数、移植胚胎数、冷冻胚胎数、受精率、胚胎种植率、移植取消率、多胎妊娠率、早期流产率、中晚期流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义（P>0.05）。A组HCG日直径>12mm的卵泡数、获卵数均少于B组,生化妊娠率高于B组,临床妊娠率低于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论输卵管积水对IVF-ET结局有明显负面影响,降低了IVF-ET的治疗效果。（二）输卵管积水患者子宫内膜HOXA10、LIFmRNA及蛋白表达的变化材料与方法1、研究对象2009年6月至2010年12月我院生殖中心就诊女性患者42例,分为输卵管积水组（A组）30例与男性因素不孕组（B组）12例。于黄体中期（规律月经周期第1921天）,获取子宫内膜标本。2、实验方法（1）利用HE染色对子宫内膜标本进行分期,判断为分泌中期者纳入本实验,同时判断有无炎性细胞浸润。（2）利用实时定量RT-PCR检测两组患者子宫内膜HOXA10、LIF mRNA的表达情况,比较两组的差异。（2）利用免疫组化法和蛋白印迹法检测两组患者子宫内膜HOXA10、LIF蛋白的表达情况,比较两组的差异。结果1、两组患者子宫内膜标本均未见炎性细胞浸润。2、实时定量RT-PCR:A组患者子宫内膜种植窗HOXA10、LIF mRNA相对表达量低于B组患者,差异有统计学意义（P<0.05）。3、免疫组化结果显示:HOXA10主要表达于间质细胞核,腺上皮细胞未见表达;LIF主要表达于腺上皮细胞浆,间质细胞浆见少量表达;HOXA10、LIF蛋白在A组患者子宫内膜的表达低于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。3、蛋白印迹结果显示:A组患者种植窗期子宫内膜HOXA10、LIF蛋白的相对表达量低于B组患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结论输卵管积水患者子宫内膜HOXA10、LIF mRNA和蛋白的相对表达量均低于对照组,说明输卵管积水降低了子宫内膜容受性,可能是输卵管积水患者临床妊娠率低的部分原因。（三）输卵管积水患者妊娠组与未妊娠组子宫内膜HOXA10、LIF mRNA及蛋白表达的比较资料与方法1、研究对象第二部分输卵管积水组的30名患者,均于内膜标本采集后12个月行IVF-ET治疗,采集标本后第一次治疗周期共30个周期,根据妊娠结局分为妊娠组（6个周期）和未妊娠组（24个周期）。2、方法比较两组患者HOXA10、LIF mRNA的相对表达量,免疫组化光密度值和蛋白印迹灰度扫描值的差异。结果1、妊娠组患者子宫内膜HOXA10 mRNA的相对表达量高于未妊娠组,但差异无统计学意义（P>0.05）;免疫组化及蛋白印迹均显示蛋白相对表达量高于未妊娠组,差异有统计学意义（P<0.05）。2、妊娠组患者子宫内膜LIF mRNA的相对表达量、免疫组化结果示蛋白相对表达量高于未妊娠组,差异有统计学意义（P<0.05）;蛋白印迹示蛋白相对表达量高于未妊娠组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论HOXA10、LIF与输卵管积水患者IVF-ET妊娠结局密切相关,有望成为能够预测临床结局的子宫内膜容受性标志物之一。
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