UPLC-MS/MS测定动物源性食品中大环内酯抗生素的研究

论文摘要

大环内酯类抗生素（Macrolide antibiotics）作为抗生素的一个重要类别被广泛应用于医学与兽医学上对细菌感染的治疗或预防。然而也衍生出一些消极的后果,其中最为受人关注的是动物源病原菌抗药性的获得给动物、人类健康和环境带来了风险。在对大环内酯类抗生素作为饲料添加剂的风险防范上,欧盟走在了最前列。1997年欧盟曾对食品和动物饲料中的螺旋霉素和泰乐菌素颁布了禁令,到2006年1月,欧盟已彻底禁用所有抗生素类的生长促进剂。因此,对于畜产品中大环内酯类抗生素的残留分析成为备受关注的一个环节。本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱测定动物源性食品中的大环内酯类抗生素残留的研究方法；考察了流动相的组成、配比等对分离和灵敏度的影响；确定了最佳色谱条件为：色谱柱：Waters ACQUITY UPLCTMEH C18（100mm×2.1 mm,1.7μm）;流动相：甲醇和含0.1%甲酸的水溶液；流速：0.3 mL/min;洗脱方式：梯度洗脱；柱温：40℃；进样量：10.0μL。同时考察了样品前处理部分提取液、固相萃取柱的种类、上柱液的pH值以及固相萃取柱淋洗条件对灵敏度的影响。确立了最佳的前处理条件：固相萃取柱：HLB柱；上柱液pH=6.0；淋洗条件：20%甲醇：80%水10.0 mL。在最佳实验条件下,绘制了8种组分在不同基体中的工作曲线,线性相关系数R2大于0.9709,工作曲线的范围为0.2～100.0μg/kg,各组分的最小检出浓度为0.07～0.1μg/kg,最小定量浓度为0.2～0.4μg/kg,添加水平为0.5μg/kg、1.0μg/kg、5.0μg/kg时加标回收率为74.0～125.5%,相对标准偏差为2.4～24%。研究结果表明,UPLC-MS/MS同时测定动物源性食品中大环内酯类抗生素的分析方法准确可靠,灵敏度高。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第1章 概述
• 1.1 引言
• 1.2 大环内酯类抗生素的结构
• 1.3 大环内酯类抗生素的理化性质和分类
• 1.4 大环内酯类抗生素残留的主要途径
• 1.5 大环内酯类抗生素对人的副作用
• 1.6 大环内酯类抗生素最高残留量的规定
• 1.7 大环内酯类抗生素研究现状
• 1.7.1 样品的提取
• 1.7.2 样品的净化
• 1.7.3 分析与检测方法
• 1.8 本论文研究的目的、意义
• 第2章 方法原理
• 2.1 引言
• 2.2 分离原理
• 2.3 超高效液相色谱（UPLC）的特点
• 2.4 质谱分析原理
• 2.5 质谱检测器的优点
• 第3章 实验部分
• 3.1 仪器和试剂
• 3.1.1 仪器与设备
• 3.1.2 试剂与标准品
• 3.2 色谱条件
• 3.3 质谱条件
• 3.4 实验方法
• 3.4.1 样品提取
• 3.4.2 样品富集与净化
• 3.5 仪器操作
• 第4章 结果与讨论
• 4.1 色谱柱的确定
• 4.2 流动相体系的选择
• 4.2.1 有机相的选择
• 4.2.2 水相中添加剂的选择
• 4.2.3 甲酸浓度的选择
• 4.3 流量的选择
• 4.4 离子源的确定
• 4.5 离子模式的选择
• 4.6 特征离子的选择
• 4.7 碰撞能量的选择
• 4.8 监测模式的确定
• 4.9 样品前处理方法的优化
• 4.9.1 提取液的选择
• 4.9.2 固相萃取柱的选择
• 4.9.3 上柱液PH的选择
• 4.9.4 淋洗比例的选择
• 4.9.5 淋洗体积的确定
• 4.10 最终溶解配比的选择
• 4.11 样品测定流程
• 4.12 工作曲线和检出限、定量限、线性范围
• 4.13 方法的回收率和精密度
• 4.14 样品的测定
• 4.15 标准溶液的稳定性
• 第5章 结论
• 参考文献
• 致谢