论文摘要
目的:探讨SH2-B在结肠癌变过程中的演变规律以及在结肠癌中异常表达,明确在肿瘤细胞中SH2-B的过表达促进细胞异常增殖从而参与细胞癌变的作用机制。方法:用免疫组织化学方法检测29例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织、38例鼻咽癌组织中的SH2-B的表达,获得SH2-B在结肠癌变过程中的表达规律。用LipofecTAMINE 2000将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HEK293细胞,用Western-blotting分析转染SH2-B基因后SH2-B的表达,MTI法分析SH2-B对细胞增殖的影响,明确SH2-B通过增强细胞增殖而促进肿瘤发生、发展。结果:（1）免疫组织化学检测结果显示,在显微镜下SH2-B在结肠息肉组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织、鼻咽癌组织中的表达呈浆—核型,以胞浆为主。结果显示:结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌患者SH2-B阳性率为分别为31%（9/29）、52%（14/27）、93%（27/29）,鼻咽癌患者SH2-B阳性率为87%（33/38）。结肠癌组织中SH2-B的阳性细胞表达率（0.64±0.26）明显高于结肠腺瘤组织（0.26±0.27）和结肠息肉组织（0.12±0.21）（P＜0.001）,结肠腺瘤组织中SH2-B阳性细胞表达率明显高于结肠息肉组织（P＜0.05）,结肠癌组织中SH2-B阳性细胞表达率（0.64±0.26）略高于鼻咽癌组织（0.49±0.28,p＜0.05）。SH2-B表达强度计分,结肠癌细胞（2.76±1.18）明显高于腺瘤细胞（0.77±0.85）和结肠息肉细胞（0.72±1.16,p＜0.0001）,腺瘤细胞与息肉细胞间无明显差异（P＞0.05）;结肠癌细胞（2.76±1.18）与鼻咽癌细胞（3.03±1.30）之间无显著性差异（P＞0.05）,提示SH2-B在结肠癌变中可能具有重要作用。（2）细胞增殖实验中,将pcDNA3.1-SH2-B质粒DNA转染HEK293细胞,Western-blotting检测SH2-B表达,结果表明:pcDNA3.1-SH2-B在HEK293中表达明显增高。MTT法分析细胞增殖结果,转染pcDNA3.1-SH2-B后细胞增殖显著强（P＜0.05）。结果提示,SH2-B在结肠癌变过程中的高表达可能促进结肠上皮细胞异常增殖。结论:（1）结肠癌变是一个多因素作用、多基因参与、多阶段发展的复杂过程。SH2-B在结肠息肉、结肠腺瘤和结肠癌组织中表达逐步增强,推断SH2-B异常活化可能是结肠癌变的早期事件,可能在结肠癌变早期发挥重要作用。（2）SH2-B促进细胞异常增殖可能是其参与结肠癌变的重要机制之一。