类固醇受体辅活化子SRC-1和SRC-3在烧伤小鼠应激调控中的作用与机制研究

论文摘要

文献报道,严重创伤（含烧伤）早期并发全身性损害的重要标志是发生全身炎症反应综合症（SIRS）,进一步发展可能导致多器官功能不全（MODS）,因此如何调控炎症反应,防止其有害效应是目前国内外关注的热点。我所前期研究发现,严重烧伤后应激功能紊乱,主要特点是糖皮质激素受体（GR）功能抑制,NF-κB功能增强,炎性细胞因子大量产生,三者相互影响,互为因果,形成级联式放大效应,引发SIRS。如我们所知,核转录因子GR、NF-κB、AP-1的功能状况对炎性细胞因子的产生至关重要,而GR、NF-κB、AP-1的功能又受辅调节蛋白（辅活化子或辅阻遏子）的调控,但具体的调控机制尚未阐明。类固醇受体辅活化子（Steroid Receptor Coactivator,SRC）家族成员有SRC-1、SRC-2和SRC-3,目前关于SRC的各亚型对类固醇受体如雌激素受体、孕激素受体以及在相关肿瘤的发生中的调控作用已有较深入的研究,SRC家族对生理状况下GR、NF-κB的调控作用近期亦有少量报道。但是SRC家族在创伤情况下对GR、NF-κB、AP-1的调控作用如何,尤其是对发生SIRS的影响尚未涉及。本课题对SRC-1-/-和SRC-3-/-小鼠和同种野生型小鼠致以15-20%TBSAⅢ0烧伤,采用ELISA、Western blot、免疫组化及常规病理等方法,动态检测炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和抗炎细胞因子IL-10的浓度,比较分析与产生细胞因子密切相关的核转录因子GR、NF-κBp50、c-jun的表达及核转位情况,应激相关因子IκB-α、JAB1表达情况以及部分脏器组织病变和整体伤情观察,旨在分别阐明SRC-1和SRC-3对整体伤情的影响,并从核转录因子辅调控环节揭示严重烧伤后SIRS发生的分子机制。主要结果:1.从美国贝勒医学院徐建明教授实验室引进的SRC-1+/+、SRC-1-/-和SRC-3+/-小鼠,成功繁殖逐渐扩大种群,经基因型鉴定,获得基因敲除纯合子、杂合子和野生型。观察到SRC-1-/-小鼠表型与野生型无明显差别,但SRC-3-/-小鼠的体型略小于同龄野生型,且雌鼠生殖能力较弱,其繁殖较为困难,与国外实验室报道的结果一致,表明本实验引进

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• 论文正文 类固醇受体辅活化子SRC-1 和SRC-3 在烧伤小鼠应激调控中的作用与机制研究
• 前言
• 第一部分 SRC-1 和SRC-3 基因敲除小鼠的繁殖、筛选及一般表型观察
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 第二部分 SRC-1 和SRC-3 基因敲除小鼠烧伤后几种细胞因子反应特点与整体效应研究
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 第三部分 严重烧伤早期SRC-1 和SRC-3 对GR、NF-κB 及AP-1 的转录调控机制研究
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 全文结论
• 致谢
• 参考文献
• 文献综述一 GR、NF-κB 以及AP-1 在应激反应中的作用及意义
• 文献综述二 核受体辅调节蛋白家族研究进展
• 攻读博士学位期间发表的文章