论文摘要
目的探讨肌肌醇加氧酶（MIOX）对糖尿病转移生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法（1）在体内,应用链脲佐菌素（STZ）诱导SD大鼠建立糖尿病（DM）大鼠模型,随机分为DM组和糖尿病肾病（DN）组,并设正常组作为对照,分别观察4周（DM组）和12周（DN组）,测定血糖和24小时尿微量白蛋白、尿肌酐。取大鼠的肾皮质,病理切片染色观察肾小管间质的变化。提取肾皮质组织总RNA和蛋白,分别用RT-PCR和Western Blot检测MIOX、TGF-β1mRNA和蛋白表达的改变;（2）在体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,用不同浓度的高糖刺激NRK-52E细胞,并设正常细胞组作为对照,提取细胞总RNA和蛋白,RT-PCR检测MIOX、TGF-β1 mRNA表达的变化;Western Blot检测MIOX、TGF-β1蛋白表达的改变;（3）检测TGF-β1刺激大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E后不同浓度下MIOXmRNA和蛋白表达的变化;（4）应用ASODN干涉MIOX基因表达后观测高糖刺激的TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化。结果（1）与正常对照相比,DM大鼠尿微量白蛋白、血肌酐开始升高,而DN大鼠升高更明显;肾脏病理切片Masson染色发现DN大鼠已出现肾小管间质纤维化的改变;与正常对照相比,DM大鼠、DN大鼠肾皮质中MIOX、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达增加,差异均具有显著性（P值均＜0.01）。（2）与正常NRK-52E细胞组相比,高糖呈浓度依赖性增加NRK-52E细胞MIOX、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达（P值均＜0.05）。（3）应用TGF-β1刺激肾小管上皮细胞后,各组MIOX mRNA和蛋白表达的无明显变化（P值＞0.05）;（4）转染ASODN能明显抑制正常NRK-52E细胞高糖刺激后MIOX蛋白的表达;与转染SODN细胞和高糖刺激的正常细胞相比,转染ASODN的NRK-52E细胞高糖刺激后TGF-β1 mRNA和蛋白表达减少,差异均具有显著性（P值均＜0.05）。结论本研究结果提示,在糖尿病肾脏病变过程中存在MIOX、TGF-β1基因表达的同步增高,MIOX基因表达异常可能是通过细胞因子TGF-β1在糖尿病肾病中起作用。