泛素连接酶E3 PDZRN3对前列腺癌生长及转移作用

论文摘要

目的：观察PDZRN3基因在良性前列腺增生组织、局限性前列腺癌以及转移性前列腺癌组织中以及不同分化程度的前列腺肿瘤中mRNA和蛋白含量的变化,研究PDZRN3的表达在前列腺癌发生、发展及转移中的意义。方法：分别按照前列腺癌患者的临床分期及前列腺癌组织的Gleason评分进行分组,运用RT-PCR、实时荧光定量PCR以及Western blot等方法检测标本中PDZRN3mRNA及蛋白的表达情况。再采用SPSS15.0对数据进行统计学分析。结果：局限性前列腺癌及转移性前列腺癌组织中的PDZRN3mRNA及蛋白的表达与良性前列腺增生组织中的相比明显下调（P<0.05）。转移性前列腺癌组织中的PDZRN3mRNA及蛋白的表达相比局限性前列腺癌中明显下调（P<0.05）。在Realtime-PCR实验中可以看出,局限性前列腺癌中PDZRN3mRNA表达量约为转移性前列腺癌中的2倍。PDZRN3mRNA及蛋白的表达值随Gleason评分值升高而表达下降（P<0.05）,Gleason评分越高,PDZRN3mRNA及蛋白的表达量越低。在Realtime-PCR实验中可以看出,前列腺癌低危组中PDZRN3mRNA表达量约为前列腺癌中危组的1.2倍。前列腺癌中危组PDZRN3mRNA表达量约为前列腺癌高危组的2倍。结论：局限性前列腺癌及转移性前列腺癌组织中的PDZRN3基因mRNA及蛋白与良性前列腺增生组织相比表达下降,提示PDZRN3在前列腺癌的发生和发展过程中具有重要作用。PDZRN3基因表达值在不同的Gleason评分中有差异,随Gleason评分值升高而表达下降；提示PDZRN3与肿瘤的恶性程度相关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 缩略词
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 主要试验仪器
• 2.2 研究对象
• 2.2.1 实验对象
• 2.2.2 实验分组
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 标本收集和保存
• 2.4 PDZRN3的蛋白质免疫印迹（Western b1ot）检测
• 3.4.1 总蛋白提取
• 2.4.2 样品总蛋白浓度的测定（BCA法）
• 2.4.3 电泳
• 2.4.4 转膜
• 2.4.5 封闭
• 2.4.6 一抗孵育
• 2.4.7 二抗孵育
• 2.4.8 曝光
• 2.5 PDZRN3的RT-PCR和Real-time PCR检测
• 2.5.1 样品RNA的抽提
• 2.5.2 RNA浓度检测
• 2.5.3 c-DNA合成
• 2.5.4 样品PDZRN3基因普通PCR检测
• 2.5.5 样品PDZRN3基因实时定量PCR
• 2.6 数据处理与统计学分析
• 2.6.1 蛋白免疫印迹Western blot数据处理
• 2.6.2 RT-PCR数据处理
• 2.6.3 荧光定量PCR数据处理
• 2.6.4 统计学分析
• 第三章 结果
• 3.1 各种方法测得PDZRN3的统计学描述
• 3.2 按照临床分期进行分组后的检测结果
• 3.2.1 Western blot法检测PDZRN3蛋白表达
• 3.2.2 RT-PCR法检测各组PDZRN3 mRNA表达
• 3.2.3 Real-Time PCR法检测PDZRN3 mRNA表达
• 3.3 按照Gleason评分法进行分组后的检测结果
• 3.3.1 Western blot法检测PDZRN3蛋白表达
• 3.3.2 RT-PCR法检测各组PDZRN3 mRNA表达
• 3.3.3 Real-Time PCR法检测PDZRN3 mRNA表达
• 3.3.4 qPCR溶解曲线
• 第四章 讨论
• 4.1 前列腺癌概述
• 4.2 泛素蛋白酶途径
• 4.3 PDZRN3概述
• 4.4 PDZRN3在不同前列腺癌临床分期中及前列腺癌不同Gleason评分中的表达变化
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果