缺血后处理对兔心肌再灌注损伤的影响

论文摘要

背景与目的近年来，随着临床冠状动脉内溶栓、冠状动脉内介入治疗及冠状动脉搭桥术等治疗手段的广泛应用，心肌再灌注损伤愈来愈引起人们的广泛重视，寻求可行和有效的治疗措施以减轻再灌注损伤有着重要的临床应用价值。最近Vinten-Johansen实验室报道一种新的心肌保护现象—缺血后处理，即在心肌较长时间缺血后，开始再灌注时，对心脏进行短暂再灌、停灌处理可以减少中性粒细胞聚集、改善内皮功能、缩小心肌梗死范围，与缺血预适应的心肌保护作用相似。随后又有研究发现在再灌注时应用吸入性麻醉剂，能通过激活磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B（Akt）（phosphatidylinositol-3-kinase-Akt，PI3K-Akt）信号传导途径缩小心肌梗死范围。现已有一些实验在大鼠、狗、猪等实验动物的心肌缺血再灌注模型上证实缺血后处理涉及ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive potassium channel，KATP C)的开放、PI3K-Akt信号传导途径的激活和线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore，mPTP）的开放等机制。再灌注过程中伴随大量的心肌细胞凋亡，而凋亡与PI3K-Akt信号传导途径和mPTP密切相关，故推测后处理可能通过抑制凋亡来减轻再灌注损伤。另外有研究报道线粒体特异性ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪预适应能缩小梗死范围、抑制凋亡，但在再灌注时应用二氮嗪是否对心肌有保护作用还不明确。本研究采取兔在体心肌缺血再灌注模型，以血浆MDA及SOD、心肌梗死范围、心肌细胞凋亡指数、凋亡相关蛋白表达情况为研究指标，观察缺血后处理和二氮嗪后处理对再灌注心肌的影响。材料与方法建立兔心肌缺血再灌注模型并随机分成6组：缺血再灌注组（IR），缺血预适应组（IP），缺血后处理4个循环组（IPO1），缺血后处理6个循环组（IPO2），二氮嗪后处理组（DZO），缺血后处理4个循环+二氮嗪后处理组（IPO1+DZO）。①IR组（n=6）：结扎左冠状动脉前降支（LAD）30min，松开再灌注120min；②IP组（n=6）：结扎LAD 5min，松开再灌注5min，反复3次诱导缺血预适应，之后再按IR组操作；③IPO1组（n=6）：结扎LAD 30min后，再灌注10s、缺血10s，反复4次，再灌注120min；④IPO2组（n=6）：结扎LAD 30min后，再灌注10s、缺血10s，反复6次，再灌注120min；⑤DZO组（n=6）：结扎LAD 30min后松开再灌注，再灌注前3min按7mg／kg剂量经静脉注射二氮嗪；⑥IPO1+DZO组（n=6）：结扎LAD 30min后，再灌注10s、缺血10s，反复4次，同时再灌注前3min按7mg／kg剂量经静脉注射二氮嗪。再灌注末抽取动脉血进行血浆丙二醛（MDA）含量和超氧化物酶（SOD）活性检测；伊文氏蓝和氯化三苯基四氮唑双染色法判定心肌梗死范围；TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡指数；免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax变化。结果1．血浆MDA含量、SOD活性与IR组相比，IP组、IPO1组、IPO2组、IPO1+DZO组血浆MDA含量下降、SOD活性升高，差异性显著，IP组、IPO2组、IPO1+DZO组三组之间比较无显著性差异，IPO1组与IPO2组相比差异性显著。IR组与DZO组相比无显著性差异。2．心肌梗死范围缺血预适应、缺血后处理6个循环和缺血后处理4个循环与二氮嗪联用均缩小再灌注心肌的梗死范围，且三者之间无显著性差异。单独应用二氮嗪不能缩小梗死范围。3．心肌细胞凋亡缺血预适应、缺血后处理6个循环和缺血后处理4个循环与二氮嗪联用均能抑制再灌注心肌细胞的凋亡，且三者之间无显著性差异。单独应用二氮嗪不能抑制再灌注心肌细胞凋亡。4．凋亡相关蛋白表达缺血预适应和缺血后处理6个循环均能减少Bax蛋白的表达，升高Bcl-2／Bax比值，且两组间无显著性差异。结论1．缺血后处理能减轻脂质过氧化、缩小梗死范围、抑制细胞凋亡，与缺血预适应的心肌保护作用相似。2．缺血后处理抑制再灌注心肌细胞凋亡是通过减少Bax蛋白表达，升高Bcl-2／Bax的比值实现的。3．二氮嗪后处理可以减少缺血后处理的机械干预次数，加强缺血后处理的心肌保护作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分
• 缺血后处理对兔心肌再灌注损伤的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述部分
• 后处理—一种新的心肌保护策略
• 参考文献
• 英文缩略语
• 致谢