论文摘要
白血病是一种严重危害人类健康的造血组织恶性疾病,目前化学治疗仍是白血病治疗的主要途径。石蒜碱（lycorine）是从我国广泛分布的多年生草本植物石蒜鳞茎中分离出的一种化学单体,属于异喹啉类（isoquinoline）生物碱,具有很好的抗白血病作用。本研究以人急性早幼粒白血病细胞株HL-60作为实验对象,研究石蒜碱诱导HL-60细胞凋亡过程中相关蛋白表达的变化,探讨石蒜碱抗白血病作用的分子机制。用5.0μM浓度石蒜碱干预HL-60细胞,并设立对照组（0μM）,24 h后提取总RNA,通过RT-PCR研究石蒜碱对TNF-α的影响;设立4个石蒜碱干预浓度梯度,分别为0、1.25、2.5和5.0μM,处理细胞24小时后提取蛋白,通过Western blotting分析石蒜碱对TNF-α、Bid、IκB、NF-κB和Survivin的影响;用5.0μM浓度石蒜碱干预HL-60细胞24小时,并设立对照组（0μM）,通过免疫细胞化学方法研究石蒜碱对NF-κB入核的影响。RT-PCR结果显示石蒜碱导致TNF-α表达明显上调。Western Blotting结果表明,随着药物浓度的逐渐增大,TNF-α表达上调,Bid表达下降,tBid生成量增加,IκB表达量没有显著变化,p-IκB生成量减少,NF-κB表达量没有显著变化,Survivin蛋白表达下调。免疫细胞化学结果表明石蒜碱处理后NF-κB入核明显减少。综上所述,石蒜碱诱导HL-60细胞凋亡的过程中上调了TNF-α的表达并促进了Bid蛋白被剪切,激活了线粒体凋亡途径;石蒜碱还降低了IκB磷酸化水平并抑制了NF-κB进入细胞核行使其转录调节功能。同时,石蒜碱对凋亡抑制蛋白家族的表达也产生了影响,明显下调了Survivin的表达。
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