论文摘要
目的:探讨Gremlin1与肾纤维化的关系及大黄素对TGF-β1诱导的肾小管上皮表达Gremlin1的影响。方法:（1）在人肾小管上皮细胞（HK-2）培养的基础上。以TGF-B1诱导细胞转分化并作为阳性对照,观察不同浓度大黄素干预转分化细胞生长。实验分组:A:正常对照组（无血清培养基）,B:阳性对照TGF-B1（2ng/m1）,C:TGF-β1（2ng/ml）+大黄素（10 ug/ml）,D:TGF-β1（2ng/ml）+大黄索（20ug/ml）E:TGF-β1（2ng/ml）+大黄素（40 ug/ml）。（2）处理12h、24h、48 h后,实时荧光定量PCR检测12h组细胞Gremlin1 mRNA含量的表达:免疫印迹法（Westernblotting）检测24h、48 h组Gremlin。蛋白的表达。（3）选取不同病因的原发性肾小球肾炎肾活检标本40例,根据光镜下小管间质的病变程度评级分4组,免疫组化法检测Gremlin1表达,与患者血肌酐水平（Scr）,24h尿蛋白定量（24hRpro）进行相关性分析。结果:（1）2ng/ml TGF-β1刺激HK-2细胞12h、24h、48h可上调Gremlin1表达。（2）随着大黄素浓度梯度（10 ug/ml、20 ug/ml、40 ug/ml）的增加,Gremlin1基因及蛋白表达水平逐渐下降（P＜0.05）。（3）正常肾组织无Gremlin1表达,纤维化肾组织Gremlin1表达增多。并且其表达量与Scr呈正相关（r=0.818,p＜0.05）与24h尿蛋白定量无相关性。结论:（1）TGF-β1能上调Gremlin1表达。（2）大黄素可以抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞Gremlin1表达。（3）纤维化肾组织中,Gremlin1表达量明显增多。随着纤维化程度加重,Gremlin1表达量增加,并与患者肾脏损害程度相关。Gremlin1可能参与纤维化过程,加重肾损害,可以作为判断肾脏纤维化程度的标志物,是潜在的治疗靶点。