消痰散结方对胃癌PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响

论文摘要

目的:1.评价消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤的抑制作用。2.通过免疫组化方法,观察消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。3.探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖、分化的作用机制.为中医痰证理论物质构成提供依据。方法:1.建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,造模48h后,采用完全随机设计法,采用随机数字表,将实验动物随机分为4组:生理盐水组、消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组,每组15只。生理盐水组,给予0.9%生理盐水0.4ml（1次/日,灌胃,用药6周）;消痰散结方组,给予消痰散结方0.4ml（3.354 g/ml,1次/日,灌胃,用药6周）;5-Fu组,给与5-Fu 0.4ml（6mg/ml,1次/周,腹腔注射,用药3周）;消痰散结方+5-Fu组,给予消痰散结方0.4ml（3.354g/ml,1次/日,灌胃,用药6周）,同时给予5-Fu0.4ml（6mg/ml,1次/周,腹腔注射,用药3周）。2.用药开始6周后麻醉处死荷瘤鼠,观察各组荷瘤鼠体重变化,肿瘤生长情况、抑瘤率及大体、组织学结构变化.观察消痰散结方干预对胃癌组织PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白:PI3K、Akt、mTOR、PTEN表达的影响.运用统计学方法,对结果进行分析。结果:1.消痰散结方对荷瘤裸鼠体重影响较小:生理盐水组、消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组,用药前后动物体重变化分别为5.11±0.55g,4.50±0.74g,2.02±0.37g,2.94±0.39g,各组之间均存在显著统计学差异（P＜0.05）。2.消痰散结方对裸鼠人胃癌原位移植瘤有较好的抑制肿瘤生长作用:生理盐水组,消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组平均瘤重分别为3.121±0.403g、1.810±0.410g、1.629±0.389g、1.292±0.344g。消痰散结方组的抑瘤率为41.99%、5-Fu组抑瘤率为47.82%、消痰散结方+5-Fu组抑瘤率为58.58%。消痰散结方组与生理盐水组之间存在显著统计学差异（P=0.000,P＜0.01）;与5-Fu组之间不存在显著统计学差异（P=0.203,P＜0.05）;与消痰散结方+5-Fu组之间存在显著统计学差异（P=0.01,P＜0.05）。3.消痰散结方有较好下调胃癌组织中PI3K蛋白表达的作用,生理盐水组,消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组PI3K的阳性表达率分别为93.33%、53.33%、46.67%和53.33%.消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组的PI3K蛋白阳性表达阳性率与生理盐水组相有统计学意义（P＜0.01）,但其3组之间比较无明显差异（P＞0.05）。4.消痰散结方下调胃癌组织中Akt蛋白表达的作用较小,生理盐水组,消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组Akt蛋白的阳性表达率分别为86.67%、53.33%、46.67%和40%.消痰散结方组与生理盐水组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组比较,Akt蛋白阳性表达率均无显著统计学差异（P＞0.05）。5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组的Akt蛋白阳性表达率与生理盐水组相比较有统计学意义（P＜0.01）,但它们组间比较无明显差异（P＞0.05）。5.消痰散结方下调胃癌组织中mTOR蛋白表达的作用较小,生理盐水组,消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组mTOR蛋白的阳性表达率分别为86.67%、53.33%、53.33%和40%消痰散结方组与生理盐水组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组比较,Akt蛋白阳性表达率均无显著统计学差异,（P＞0.05）。5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组的Akt蛋白阳性表达率与生理盐水组相比较有统计学意义（P＜0.01）,但它们组间比较无明显差异（P＞0.05）。6.消痰散结方有较好上调PTEN蛋白表达的作用,生理盐水组,消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组PTEN蛋白的阳性表达率分别为33.33%、80%、86.67%和86.67%。消痰散结方组、5-Fu组、消痰散结方+5-Fu组的PI3K蛋白阳性表达阳性率与生理盐水组相有统计学意义（P＜0.01）,但其3组之间比较无明显差异（P＞0.05）。结论:1.消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤有较好的抑制作用。2.消痰散结方作用于PI3K/Akt/mTOR信号通路的主要相关蛋白,下调PTEN蛋白的表达,使PI3K磷酸化作用增强,PI3K/Akt/mTOR信号通路的活性得到抑制,从而抑制肿瘤细胞增殖、分化,促进药物对肿瘤细胞的杀伤作用,可能是消痰散结方抑制肿瘤增殖的作用机制之一。3.消痰散结方作用于PI3K/Akt/mTOR信号通路的主要相关蛋白,其机制可能为祛顽痰而使气机调畅,纠正细胞内信号传递异常,达到气行、消痰的治疗作用,抑制肿瘤的增殖。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 前言
• 第一部分:消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤生长的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 第二部分:消痰散结方对胃癌组织PI3K、AKT、mTOR、PTEN蛋白表达影响的研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述:中医痰证的现代病理学基础
• 致谢