论文摘要
野木瓜为木通科（Lardizabalaceae）野木瓜属植物,拉丁学名Stauntonia chinensis DC.,是一种有着重要开发及药用价值的植物类药材。它作为一种常用中药,有强心利尿、驱虫止痛之功效,现代医学研究发现其主要的药理作用是镇痛抗炎、阻滞神经传导和放射增敏等,故在临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎等疾病。目前对其提取物的镇痛作用及其作用机制方面的系统研究尚未见报道,因此本研究在建立多种实验性疼痛的动物模型的基础上,研究了野木瓜根茎提取物（YMG）、YMG的水相提取物（YMGW）和醇相提取物（YMGB）及其子馏分（YMGB1、YMGB2、YMGB3、YMGB4、YMGB5、YMGB6和YMGB7）的镇痛作用,并探讨了有效馏分的可能作用机制,从而为二次开发野木瓜植物药和更深入研究提供科学的实验依据。现对本实验的研究方法和结果简述如下:本研究首先采用三种镇痛实验对野木瓜系列提取物进行了镇痛活性筛选。小鼠醋酸扭体实验结果显示:与空白组相比,给予YMGW、YMGB、YMGB1、YMGB3、YMGB4、YMGB6和YMGB7（500 mg/kg,i.g.）均能够显著抑制小鼠扭体次数,具有较好的镇痛作用;野木瓜水提物YMGW和野木瓜醇提物YMGB和YMGB6在500 mg/kg的剂量下对小鼠热板致痛模型均无镇痛作用;在大鼠福尔马林炎性痛模型上,YMG、YMGW、YMGB1、YMGB3和YMGB5（400 mg/kg,i.g.）具有较好的镇痛作用,YMGB6和YMGB7具有明显的抗炎作用。综合以上结果可以看出:野木瓜提取馏分（YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7）中,除YMGB2外,其他馏分均具有较好的镇痛作用。其次,采用小鼠醋酸扭体模型和大鼠福尔马林炎性痛模型进一步对在两种模型上表现较好镇痛抗炎作用的馏分进行量效关系和时效关系的评价。结果显示,YMG、YMGB1、YMGB4、YMGB6和YMGB7五种馏分在320-976 mg/kg浓度范围内,随着给药剂量的增高,其对醋酸所致的小鼠扭体反应的抑制作用逐渐增强,镇痛作用具有一定的剂量依赖性;YMGB5、YMGB6和YMGW在100-800 mg/kg剂量范围内,随着给药剂量的增高,其对福尔马林所致的大鼠缩足反应和足趾肿胀程度的抑制作用逐渐增强,镇痛抗炎作用具有一定的剂量依赖性。另外,YMGB6的镇痛作用在灌胃给药45 min时达峰值,之后逐渐降低,有效镇痛时间约为1小时。最后,为进一步探讨其镇痛作用机制,本文首先观察了阿片受体拮抗剂纳络酮对有效镇痛馏分镇痛作用的影响,以评价其镇痛作用与阿片受体的关系。结果显示,在小鼠醋酸扭体实验中纳络酮可显著拮抗吗啡的镇痛作用,最大镇痛百分率降低了63.5%;而同等剂量的纳络酮对野木瓜水提物YMGW和醇提物YMGB的镇痛作用无明显影响。提示野木瓜提取馏分的镇痛作用不是由阿片受体介导的。其次,以结肠癌HT-29细胞为研究对象,评价有效镇痛馏分是否抑制与炎症反应相关的COX-2蛋白酶的表达和活性及致炎因子PGE2的生成和释放。结果表明,野木瓜水提物YMGW和醇提物YMGB5良好的镇痛作用可能是通过降低COX-2的表达水平和抑制酶活力来实现的;而YMGB、YMGB4、YMGB6和YMGB7的镇痛作用可能是通过抑制COX-2酶活力,从而抑制PGE2的生成和释放来实现的。上述实验结果提示,野木瓜提取馏分（YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7）中,除YMGB2外,其他馏分均对外周化学性刺激痛有一定的抑制作用,对中枢性热刺激镇痛作用不显著;其镇痛抗炎作用具有一定的剂量依赖性,有效镇痛时间约为1小时;野木瓜有效馏分的镇痛作用与阿片受体镇痛通路无关,主要是通过抑制COX-2的活性和表达,从而抑制PGE2的生成和释放而发挥外周镇痛作用的。