论文摘要
目的: 基底节钙化是脑CT检查的一个并不少见的征象,以往人们认为:脑CT检查发现的基底节钙化,尤其是苍白球钙化者,大多数没有神经系统病变表现,且年龄在40岁以上,临床意义如同松果体和脉络丛钙化,属于生理性钙化。近年有学者研究发现:基底节钙化与线粒体功能异常密切相关。线粒体病是由于线粒体功能异常导致的一组疾病,临床表现为多系统、多器官受累。目前,我国对线粒体病的研究比较少,临床上对线粒体病的筛选诊断缺乏有意义的线索,致使很多线粒体病被误诊、漏诊。因此,本实验的目的就是通过对脑CT示基底节钙化者的mtDNA点突变进行研究,进一步探索基底节钙化（尤其是苍白球钙化）与mtDNA异常的关系,并探讨基底节钙化是否可作为线粒体病的筛选诊断指标。。 材料和方法: 收集基底节钙化（主要为苍白球钙化）病例20例,均为山东大学齐鲁医院神经内科住院或门诊病例。其中17例行肌肉病理活组织检查,10例确诊为MELAS综合征,3例为血液标本。用常规酚/氯仿法提取肌肉组织的DNA,蛋白酶K-盐析法提取外周血中的DNA,通过PCR方法对以上病例标本进行mtDNA突变“热点”—tRNALeu（UUR）的片段扩增。PCR产物用PCR-DNA纯化试剂盒纯化,一部分纯化产物用ApaⅠ及AflⅡ限制性内切酶酶切（即PCR/RFLP）,1.2%琼脂糖凝胶（含EB染液8ul）电泳,另一部分PCR纯化产物送上海生工生物技术有限服务公司测序,以验证PCR/RFLP结果。 结果: 1.经临床与肌肉病理确诊的MELAS病例组: 1.1 PCR/RFLP酶切结果显示:此组病例中6例检测到A3243G点突变,其余4例未检测到A3243G点突变,显示有突变的6例病例4例为母子关系。10例病例均未检测到T3271C点突变。
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