一、胰腺癌患者血浆k-ras基因突变的检测（论文文献综述）
王晓光,宋政炜,倪全法,陈飞,钟征翔[1]（2018）在《新型纳米探针检测血浆K-ras基因突变与胰腺癌根治术后复发的关系研究》文中研究说明[目的]建立纳米捕获探针体系检测血浆中K-ras基因突变的方法,并探讨K-ras基因单核苷酸多态性突变与胰腺癌根治术后复发及预后的关系。[方法]收集2013年1月至2016年1月收治的胰腺癌根治性切除患者51例,抽提外周血DNA,应用特异性纳米捕获探针检测K-ras基因12、13位点密码子突变,通过Kaplan-Meier生存分析,评估K-ras基因点突变对胰腺癌根治术后复发及预后的影响。[结果]51例胰腺癌根治术患者K-ras基因突变率为35.3%（18/51）,Kras突变与淋巴结转移、神经侵犯有显着性相关（P=0.002、P=0.004）。通过随访分析K-ras基因突变者1年、2年累积无瘤生存率为41.3%、0%,K-ras基因野生型1年、2年累积无瘤生存率为66.3%、14.4%,差异有统计学意义（P=0.042、P=0.008）;K-ras基因突变者1年累积总体生存率为81.1%,野生型为93.5%,差异无统计学意义（P=0.203）,而K-ras基因突变者2年累积总体生存率为11.7%,野生型为26.4%,差异有统计学意义（P=0.035）。[结论]纳米捕获探针体系能够快速痕量检测血浆中K-ras基因突变,其与胰腺癌的淋巴结转移、神经侵犯密切相关,可作为判断胰腺癌根治术后患者无瘤生存期的一个重要指标。
王晓光,倪全法,陈飞,亓立峰,钟征翔[2]（2017）在《纳米探针检测鼠类肉瘤病毒癌基因突变与胰腺癌分期及预后的研究》文中指出目的建立纳米捕获探针体系检测血浆中鼠类肉瘤病毒癌基因（K-ras）突变的方法,并探讨K-ras基因单核苷酸多态性突变与胰腺癌临床病理特征及其预后的关系。方法收集胰腺癌患者72例,所有患者均明确诊断。抽提各血浆标本DNA,应用特异性纳米捕获探针检测K-ras基因12、13位点密码子突变,结合临床资料,分析K-ras基因点突变与胰腺癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。结果 72例胰腺癌患者血浆DNA浓度为20200 ng/μl,33例检测到K-ras基因突变,循环阈值（Ct）为21.7l35.61,其中12位点30例,13位点3例,K-ras基因突变率为45.8%（33/72）;其中37例相对早期胰腺癌（Ⅰ+Ⅱ期）的K-ras基因突变10例,突变率为27.0%（10/37）,而35例中晚期胰腺癌（Ⅲ+Ⅳ期）的K-ras基因突变23例,突变率为65.7%（23/35）,两者比较差异有统计学意义（x2=10.843,P=0.001）,提示K-ras基因点突变与肿瘤分期相关;72例胰腺癌患者均获得随访,随访时间为2个月至26个月,平均随访时间9.7个月,通过随访分析K-ras基因突变者1年生存率为42.6%,K-ras基因野生型患者1年生存率为73.4%,差异有统计学意义（x2=5.335,P=0.017）。结论采用纳米捕获探针体系能够快速痕量检测血浆中K-ras基因突变,其与胰腺癌的分期、预后密切相关。
胡昕滢,胡小琴,王莉娜[3]（2016）在《外周血K-ras基因突变联合血清肿瘤标志物检测对胰腺癌诊断价值的Meta分析》文中提出目的系统评价外周血K-ras基因突变联合肿瘤标志物检测在胰腺癌诊断中的临床价值。方法计算机检索Pub Med、The Cochrane Library（2016年3期）、Elsevier、BMJ、CBM、CNKI和Wan Fang Data数据库,搜集有关采用外周血K-ras基因突变联合血清肿瘤标志物检测诊断胰腺癌的诊断性试验,检索时限从2000年至2016年3月。由2位研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的方法学质量后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入23个研究,共计2 071名研究对象。Meta分析结果显示:外周血K-ras基因突变单独诊断的敏感性（SE）、特异性（SP）分别为65%、92%;肿瘤标志物CA19-9单独诊断的SE、SP分别为78%、81%;应用平行法联合传统肿瘤标志物CA19-9与CA242诊断胰腺癌的SE、SP分别为85%、72%,应用系列法联合诊断的SE、SP分别为70%、83%;外周血K-ras基因突变与肿瘤标志物CA19-9联合诊断,平行法和系列法的SE、SP分别为90%、63%与47%、96%。外周血K-ras基因突变与肿瘤标志物CA19-9平行法联合诊断的阳性似然比（+LR=10.89）明显高于其他三种检测方法,而系列法联合诊断的阴性似然比（–LR=0.15）亦小于其他三种检测方法,即外周血K-ras基因突变与肿瘤标志物CA19-9联合检测的诊断效能优于外周血K-ras基因突变、肿瘤标志物CA19-9单项检测以及传统血清学肿瘤标志物CA19-9与CA242联合检测。外周血K-ras基因突变与肿瘤标志物CA19-9平行法联合诊断的曲线下面积（AUC=0.87）高于传统血清学肿瘤标志物CA19-9与CA242平行法联合诊断（AUC=0.83）。结论现有证据表明,外周血K-ras基因突变联合肿瘤标志物CA19-9检测可明显提高胰腺癌的诊断准确度。受纳入研究数量和质量限制,上述结论需开展更多高质量研究加以验证。
王晓光,陈飞,亓立峰,莫娟芬,钟征翔[4]（2016）在《新型纳米捕获探针检测血浆中K-ras基因突变在胰腺癌诊断及预后中的价值》文中指出目的采用纳米捕获探针体系检测血浆K-ras基因突变,探讨其在胰腺癌诊断及预后判断中的价值。方法收集2013年6月至2015年6月嘉兴医学院附属第二医院收治的62例胰腺癌患者及38例胰腺良性疾病患者资料,所有病例均明确诊断。收集31名体检健康者作为对照组。抽提入组者血浆标本DNA,分别应用特异性纳米捕获探针和传统PCR加测序法检测K-ras基因12、13密码子突变。分析K-ras基因点突变与胰腺癌临床指标的相关性、临床诊断价值及对预后的影响。结果纳米捕获探针法检测的胰腺癌患者K-ras突变率为43.5%（27/62）,其中12位点突变25例,13位点突变2例;胰腺良性疾病患者K-ras突变率为7.9%（3/38）,均为12位点突变。PCR扩增后直接DNA测序法检出17例胰腺癌患者有K-ras突变,突变率为27.4%;胰腺良性疾病患者K-ras突变率为5.3%（2/38）。纳米探针法检出率明显高于PCR扩增法,差异有统计学意义（P=0.006）。胰腺癌患者血浆K-ras突变与胰腺癌TMN分期及肝脏转移相关,而与患者性别、年龄、有无临床症状、肿瘤直径、血CA19-9及CEA水平等因素无相关性。K-ras基因突变对胰腺癌诊断的敏感性为43.5%,特异性为92.1%,阳性预测值为90.0%,阴性预测值为50.0%,约登指数为0.356。K-ras基因突变者1年生存率为44.4%,显着低于K-ras基因野生型患者的71.4%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论纳米捕获探针体系能够痕量检测出血浆K-ras基因突变,对胰腺癌诊断的特异性高,敏感性较低。血浆K-ras基因突变与胰腺癌的TMN分期及预后密切相关。
陈飞[5]（2016）在《纳米探针检测血浆中K-ras基因突变在胰腺癌早期诊断及预后中价值的研究》文中研究说明目的:建立新型纳米荧光探针体系检测血浆中K-ras基因突变的方法,通过比较胰腺癌患者、胰腺良性疾病患者和健康自愿者的K-ras基因突变情况,初步探讨该方法在胰腺癌早期诊断及预后判断中的价值。方法:收集2014年1月-2015年7月收住的胰腺癌患者68例,胰腺良性疾病患者33例,并收集健康对照30例,所有样本均经明确诊断。提取各血浆标本DNA,应用新型特异性纳米荧光探针捕获体系来检测各样本的K-ras基因12、13位点密码子突变情况,结合临床资料,分析K-ras基因点突变在胰腺癌早期诊断中的价值及与预后的相关性。结果:在68例胰腺癌患者中有29例检测到K-ras突变,其中12位点27例,13位点2例,K-ras突变率为42.6%（29/68）,在33例胰腺良性疾病患者中有3例检测到K-ras12位点突变,突变率为9.1%（3/33）,二者相比差异有统计学意义（P<0.05）,健康对照者均无K-ras基因突变。纳米荧光探针检测血浆中K-ras基因对胰腺癌诊断的敏感性为42.6%,特异性为95.2%,阳性预测值为90.6%,阴性预测值为60.6%,约登指数为0.379;与血清CA19-9水平相结合,可提升敏感性至85.3%（58/68）。同时胰腺癌患者中35例相对早期胰腺癌（I+II期）的K-ras基因突变率为22.9%（8/35）,而33例中晚期胰腺癌（III+IV期）的K-ras基因突变率60.6%（20/33）,二者差异有统计学意义（P<0.05）,提示K-ras基因点突变与TNM分期相关。随访分析结果显示胰腺癌患者中K-ras基因突变组6月生存率为70.3%,野生型组为86.3%,差异无统计学意义（P>0.05）,而K-ras基因突变组1年生存率28.9%,野生型组为61.8%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论及意义:采用新型纳米荧光探针体系能够痕量检测血浆中K-ras基因突变,其对胰腺癌诊断的特异性高,敏感性较低,单独诊断胰腺癌尚有不足,亦不能作为早期诊断的可靠指标。但联合检测血浆中的K-ras基因突变与血清中的CA19-9水平可明显提高对胰腺癌的诊断效率。血浆K-ras基因突变与胰腺癌的临床分期、预后密切相关,可能成为评估胰腺癌预后的一个重要指标。
权红良,于忠和[6]（2013）在《K-ras基因突变与胰腺癌的早期诊断》文中研究表明胰腺癌具有起病隐匿、诊断困难、进展快和预后差等特点,其发病率在我国近20年增长了4倍。早期胰腺癌手术切除率在90%以上,5年生存率可达37%,晚期胰腺癌的5年生存率低于5%[1],所以加强对胰腺癌的预防和高危人群的监测,及时发现早期病例,是提高胰腺癌诊治效果的关键。一、胰腺癌早期诊断现状目前,胰腺癌的早期诊断主要依赖血清肿瘤标志物、基
武文,陈炯,杨仁保,周杭城,陈龙江,胡立威[7]（2013）在《血浆K-ras基因突变检测对胰腺癌早期诊断价值的影响》文中认为目的采用Meta分析方法系统评价检测血浆K-ras基因第12密码子点突变对胰腺癌早期诊断的价值。方法由两名统计人员电子检索PubMed数据库、EMbase数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网,文献检索起止时间均为建库至2012年5月31日。按照纳入与排除标准筛选文献,同时逐篇进行质量评价和诊断准确度的资料提取。应用Meta-DiSc1.4软件进行Meta分析,Stata12.0软件进行发表偏倚评价。结果共纳入10篇文献,包括690例研究对象。异质性检验无阈值效应,但是存在其他异质性。对PCR-RFLP亚组进行分析,敏感性为0.714（95%CI:0.649-0.773）,特异性为0.868（95%CI:0.781-0.930）,SROC中AUC=0.8544,Q*=0.7853。结论现有资料表明检测血浆K-ras基因突变对胰腺癌早期诊断效能中等,单独作为胰腺癌早期诊断指标尚有不足,可以作为胰腺癌早期诊断检测方法的重要补充,是胰腺癌早期诊断的可选检查方法。
王小玮[8]（2012）在《EUS-FNA穿刺物的基因检测对胰腺癌诊断价值的研究》文中研究说明胰腺癌是一种临床表现隐匿、早期诊断困难、发展迅速和预后极差的消化系统恶性肿瘤。近年来其发病率呈逐年上升的趋势，每年有新发病例约20万人，手术切除仍是目前治疗胰腺癌的主要手段。但是由于胰腺癌的病理及生物学特点使其早期症状缺乏特异性，早期诊断相当困难。胰腺癌约50%的患者就诊时已有远处转移，35％的患者表现为肿瘤局部的晚期性病变，手术切除率只有15%，5年生存率仅有1%-5%。因此，有效治疗胰腺癌、改善预后的关键就是对胰腺癌的早期发现和早期诊断。随着消化内镜的发展，超声内镜（EUS）为胰腺肿瘤的诊断带来了重大进步，其诊断灵敏度较高，同时在EUS监视下对胰腺肿瘤进行细针抽吸活检术（FNA），可以对获取的穿刺物进行病理学检查（液积细胞或者组织学），这在术前对肿瘤的良、恶性鉴别诊断是有意义和价值的。但是临床操作过程中，穿刺吸取的标本量过少、涂片质量差或病理医生的经验不足，都会出现假阴性。根据分子生物学检测高敏感的特点，对部分细胞学表现不典型或病理学可疑恶性的患者的穿刺物运用分子生物学技术进行检测鉴别，对部分患者可避免可能的多次穿刺检查，而对于良性占位病变的患者甚至可避免开腹手术的创伤，从而减少并发症的发生率，也可尽早发现胰腺癌而改善其预后，减少死亡率。因此发现并检测FNA标本的胰腺癌特异性标志物，为胰腺癌早期诊断开辟了新的途径。目前的研究表明，与胰腺癌最为密切的基因改变是K-ras基因第12或13密码子的突变，其突变率为75%-100%。在胰腺癌的早期阶段就可以检测到该突变的发生，因此可以为早期诊断提供重要依据。本研究设计通过肽核酸（PNA）钳制的方法，定性检测EUS-FNA穿刺物中K-ras基因的突变情况；并且通过设计双荧光标记的探针，应用实时定量的方法定量检测K-ras基因的突变情况，探讨K-ras突变在质和量方面对胰腺癌的诊断价值。在我们的研究中，除了选择经典的K-ras基因，我们还对既往文献报道的胰腺癌组织中差异表达的miRNA在EUS-FNA标本中进行了检测，并探讨其诊断价值。在我们的实验中，通过定性检测，我们检测到文献报道的4种常见的12密码子突变（GGT→GAT、GGT→GTT、GGT→GCT、GGT→CGT）及1种13密码子突变（GGC→GAC）。54例胰腺癌患者K-ras基因的突变率88.9%（95%CI:80.5%-97.2%），尤其对于细胞学不能诊断的患者，联合血清CA-199结果，诊断的灵敏度81%（95%CI:64.2,97.7）。在定量检测的试验中，胰腺癌患者的K-ras基因突变拷贝数明显高于非恶性胰腺占位组，对胰腺癌的诊断具有一定的价值。在我们检测7条miRNA中，miRNA-210、miRNA-21、miRNA-181a、miRNA-181b、miRNA-196a在胰腺癌组织中的表达与非胰腺癌患者组织比较差异有统计学意义（P<0.05）。其中miRNA-196a与胰腺癌局部淋巴结转移和肿瘤分期具有明显相关关系（P=0.023，P=0.047）。这说明miRNA与胰腺癌的发生及临床生物学行为有关。通过以上实验，我们证实了EUS-FNA穿刺物的基因检测是可行的，而我们用于检测K-ras基因突变及miRNA的方法灵敏度高、操作简便，为胰腺癌的早期诊断提供了新的思路。此外，为胰腺癌变分子机理的研究及治疗提供理论依据，也是胰腺癌相关基础研究向临床转化的新的尝试。
杨鸣[9]（2011）在《叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌关系的研究》文中认为胰腺癌作为恶性程度最高的肿瘤之一,近年来研究发现发病率呈明显上升趋势。由于缺乏早期诊断方法和有效治疗手段,其确诊后的平均生存时间不超过6个月。阐明其病因并进行一级预防在胰腺癌控制中具有重要的实际意义。多数研究表明,叶酸、维生素B12等营养成分慢性缺乏可能是胰腺癌的危险因素。在其它恶性肿瘤病因研究中发现,叶酸、维生素B12等营养成分缺乏与恶性肿瘤发病关系可能依赖于K-ras基因突变情况。K-ras基因突变是胰腺癌病程中的早期分子事件。因此可以推测,叶酸、维生素B12缺乏可能通过K-ras突变或者通过与其它病因所致的K-ras基因突变的协同作用导致胰腺癌发生。此外,叶酸、维生素B12等营养成分缺乏可导致高同型半胱氨酸血症。同型半胱氨酸氧化过程中产生的自由基可导致DNA氧化合损伤,从而引起K-ras基因突变。在其他肿瘤病因研究中,高同型半胱氨酸血症被认为是可能的危险因素。所以可以推测,高同型半胱氨酸血症可能是胰腺癌的危险因素,其致癌机制可能类似于叶酸缺乏。本课题采用以医院人群、社区健康人群为基础的病例-病例-对照研究,探讨叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌发生的关系。一、研究目的通过分别进行针对血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌,血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌,血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究,及血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸水平关系的研究,探讨叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和胰腺K-ras基因突变相互作用与胰腺癌发病关系,从而为胰腺癌预防控制策略和措施的制定提供科学依据。二、材料与方法采用基于医院及社区健康人群的1∶1病例-对照研究设计,以胰腺导管腺癌手术治疗患者为病例组研究对象,以健康体检人群为对照组研究对象,由专门训练的调查员对所有研究对象采用面访和病案调查的方法采集问卷信息。问卷包括两部分,第一部分包括病例纳入标准、排除标准;第二部分包括一般情况、既往史、家族史及个人史、饮食史、月经史。血浆叶酸、维生素B12浓度应用电化学发光法检测,血浆同型半胱胺酸应用循环酶法检测。巢式聚合酶链式反应DNA片段扩增技术（巢式PCR）及直接测序法确定胰腺癌肿瘤细胞K-ras基因突变情况。在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌关系的研究中,采用配对资料分析方法。单因素分析应运单因素条件Logistic回归分析模型,P值小于0.25的因素与本研究目标因素(血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸)入选多因素分析;多因素分析应运多因素条件Logistic回归分析模型。在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型或K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究,及血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸水平关系的研究中,采用成组资料分析方法。连续变量、分类变量分别选用t检验、χ2检验进行单因素分析,P值小于0.25的因素与本研究目标因素(血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸)入选多因素分析;多因素分析运用多因素非条件Logistic回归分析模型。并分别计算回归方程中各因素的OR值（Odds Ratio）及其95%可信区间（CI）。三、结果1.本课题研究共纳入经病理诊断为胰腺导管腺癌患者、健康对照人群各66例,病例组、对照组按1∶1,年龄（±3岁）、性别匹配。2. 66名胰腺癌患者中,胰腺癌组织细胞K-ras野生型39例,突变型共27例。3.血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌关系在不考虑胰腺癌K-ras基因是否突变的情况下,单因素分析结果表明:血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、白肉摄入、蛋类摄入、牛奶摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。将这些潜在因素纳入多因素分析,结果显示:血浆叶酸[OR=1.004,95%CI（0.041,2.434）,0.993]、维生素B12[OR=2.290,95%CI（0.904,5.800）,0.080]与胰腺癌无明显关系;血浆同型半胱氨酸升高是胰腺癌的保护因素,血浆同型半胱氨酸降低是胰腺癌的危险因素[OR=0.291,95%CI（0.109,0.779）,0.014]。4.血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌关系单因素分析结果显示:血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、白肉摄入、蛋类摄入、牛奶摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。将这些潜在因素纳入多因素分析,结果显示:血浆叶酸[OR=0.504,95%CI（0.193,1.317）,0.162]、维生素B12 [OR=0.630,95%CI（0.231,1.715）,0.365]、同型半胱氨酸[OR=2.603,95%CI（0.988,6.855）,0.053]与K-ras基因野生型胰腺癌无明显关系。5.血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系单因素分析结果显示:血浆叶酸浓度、血浆维生素B12、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、牛奶摄入、咖啡摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。将这些潜在因素纳入多因素分析,结果显示:血浆叶酸与K-ras基因突变型胰腺癌无明显关系[OR=1.069,95%CI（0.972,1.176）,0.169];血浆维生素B12升高是K-ras基因突变型胰腺癌的保护因素[OR=0、995,95%CI（0.992,0.998）,0.002];血浆同型半胱氨酸升高是K-ras基因突变型胰腺癌的危险因素[OR=3.689 , 95%CI（1.146,11.878）,0.029]。6.血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸的关系:单因素分析结果显示:血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、咖啡摄入是同型半胱氨酸潜在的影响因素（P≤0.25）。将这些潜在因素纳入多因素分析,结果显示:血浆叶酸与血浆同型半胱氨酸无明显关系[OR=0.778,95%CI（0.384,1.574）,0.485];血浆维生素B12与血浆同型半胱氨酸呈负相关,前者的升高伴随后者的升高的可能性减小[OR=0.438,95%CI（0.216,0.886）,0.022]。四、结论:本研究结果显示:在不考虑胰腺癌K-ras基因是否突变的情况下,血浆叶酸、维生素B12与胰腺癌无明显关系,血浆同型半胱氨酸是胰腺癌的保护因素;在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌关系的研究中,血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与其无明显关系;在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究中,血浆叶酸与其无明显关系,血浆维生素B12升高是K-ras基因突变型胰腺癌的保护因素,血浆同型半胱氨酸升高是其危险因素;在血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸关系的研究中,血浆叶酸与血浆同型半胱氨酸无明显关系,血浆维生素B12与血浆同型半胱氨酸呈负相关,前者的升高伴随后者的升高的可能性减小。上述结果证实了维生素B12缺乏可能通过K-ras突变或者通过与其它病因所致（如:血浆同型半胱氨酸升高）的K-ras基因突变的协同作用导致胰腺癌发生;同型半胱氨酸升高导致胰腺癌的机制可能类似于维生素B12缺乏。进一步阐明维生素B12、同型半胱氨酸等饮食相关因素在胰腺癌发病中的作用,可望为胰腺癌预防控制策略和措施的制定提供科学依据。
沈永奇[10]（2010）在《结直肠癌K-ras基因突变的实验研究及临床意义》文中指出目的:研究结直肠癌（CRC）不同组织标本K-ras基因检测的临床意义。方法:用DNA提取试剂盒提取CRC患者的新鲜原发灶组织120例、石蜡包埋原发灶组织173例、淋巴结转移灶组织48例、远处转移灶组织24例、结直肠腺瘤28例、血浆100例和全血67例的脱氧核糖核酸（DNA）,经聚合酶链反应（PCR）扩增,对产物进行K-ras基因所有外显子序列分析（血浆和全血仅检测第一外显子）。同时,对293例CRC原发灶的K-ras状态与其临床病理特征进行对比分析。结果:K-ras检出率:新鲜CRC原发灶100%、石蜡包埋原发灶97.1%、患者全血100%、血浆73.0%。K-ras突变率:新鲜CRC原发灶34.2%、石蜡包埋原发灶33.9%、淋巴结转移灶29.8%、远处转移灶29.2%、患者血浆13.7%、患者全血0%、结直肠腺瘤25.9%。从血浆中检出K-ras突变的10例患者全部为Duke’s分期D期患者。K-ras突变类型的一致率:淋巴结转移灶、远处转移灶、患者血浆、结直肠癌腺瘤与其原发灶比较K-ras突变类型的一致率分别为92.5%（13/14）、85.7%（6/7）、100.0%（10/10）和57.1%（4/7）。在原发灶标本中,第一外显子12、13位点突变占88.8% （87/98）,第二外显子61位点突变占3.1% （3/98）,第三外显子146位点突变占8.2%（8/98）,第一外显子12密码子GGT→GAT是最常见的突变类型。男性患者比女性患者、大于60岁患者比小于60岁患者、隆起型患者比溃疡型患者、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）升高患者比CEA正常患者有更高的K-ras基因突变率,而K-ras基因突变率与病理组织学类型、肿瘤位置、Dukes’分期、淋巴结转移、远处转移无关。结论:结直肠癌石蜡包埋的或新鲜的原发灶组织均可用于K-ras检测要求;仅检测K-ras 12、13位点状态以预测抗EGFR单抗对CRC的敏感性可能不够,应该增加61位点、146位点检测;患者血浆K-ras检测仅在Duke’s分期D期患者中有意义;在无法获得原发灶标本时,患者淋巴结转移灶、远处转移灶的K-ras检测结果也有一定参考意义;患者全血、结直肠腺瘤不宜用于临床K-ras检测。CRC的K-ras突变率与患者性别、年龄、大体标本类型、CEA水平有关。
二、胰腺癌患者血浆k-ras基因突变的检测（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、胰腺癌患者血浆k-ras基因突变的检测（论文提纲范文）
（1）新型纳米探针检测血浆K-ras基因突变与胰腺癌根治术后复发的关系研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 血浆DNA抽提及鉴定 |
| 1.3 纳米捕获探针体系的建立 |
| 1.3.1 采用水热合成法合成磁性纳米粒子 |
| 1.3.2 制备链接有K-ras捕获探针的磁性纳米粒子 |
| 1.4 血浆K-ras基因突变的检测 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 血浆K-ras基因突变及其与胰腺癌临床病理因素的关系 |
| 2.2 胰腺癌根治术后复发、预后情况 |
| 2.3 K-ras基因突变与生存率 |
| 3 讨论 |
（3）外周血K-ras基因突变联合血清肿瘤标志物检测对胰腺癌诊断价值的Meta分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 纳入与排除标准 |
| 1.1.1 研究类型 |
| 1.1.2 研究对象 |
| 1.1.3 诊断方法 |
| 1.1.4 结局指标 |
| 1.1.5 排除标准 |
| 1.2 检索策略 |
| 1.3 文献筛选与资料提取 |
| 1.4 纳入研究的方法学质量评价 |
| 1.5 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入研究的基本特征 |
| 2.3 Meta分析结果 |
| 2.3.1 异质性检验 |
| 2.3.2 合并统计量 |
| 2.3.3 SROC曲线及AUC |
| 2.3.4 发表偏倚 |
| 2.3.5亚组分析 |
| 3 讨论 |
（5）纳米探针检测血浆中K-ras基因突变在胰腺癌早期诊断及预后中价值的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图表 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（6）K-ras基因突变与胰腺癌的早期诊断（论文提纲范文）
| 一、胰腺癌早期诊断现状 |
| 二、K-ras基因突变与胰腺癌早期诊断 |
| 1. 组织K-ras基因突变的检测: |
| 2. 胰液中K-ras基因突变的检测: |
| 3. 粪便中K-ras基因突变的检测: |
| 4. 血液中K-ras基因突变的检测: |
| 三、K-ras基因突变的检测方法 |
（7）血浆K-ras基因突变检测对胰腺癌早期诊断价值的影响（论文提纲范文）
| 1 资料和方法 |
| 1.1 文献纳入标准 |
| 1.2 文献排除标准 |
| 1.3 检索策略 |
| 1.3.1 数据库: |
| 1.3.2检索策略: |
| 1.4 文献数据提取和质量评价 |
| 1.4.1 文献数据提取: |
| 1.4.2 文献质量评价: |
| 1.5 诊断准确度评价指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 文献筛选结果 |
| 2.2 文献特征和质量评价 |
| 2.3 统计分析结果 |
| 2.3.1 异质性检验: |
| 2.3.2 Meta回归分析: |
| 2.3.3 亚组分析: |
| 2.3.4 发表偏倚评价: |
| 3 讨论 |
（8）EUS-FNA穿刺物的基因检测对胰腺癌诊断价值的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中文大摘要 |
| 英文大摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 EUS-FNA 穿刺物 K-ras 基因定性检测对胰腺癌诊断价值评价 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 EUS-FNA 穿刺物 K-ras 基因定量检测对胰腺癌诊断价值评价 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 EUS-FNA 穿刺物 miRNA 检测对胰腺癌诊断的价值评价 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 综述一 microRNA 在胰腺癌方面的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 循环 DNA 的特点及其诊断价值的研究 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况 |
| 致谢 |
（9）叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌关系的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 材料与方法 |
| 一、 研究对象 |
| 二、 样本量估计 |
| 三、 问卷调查、血样及胰腺癌病理标本采集 |
| 四、 实验室检测方法 |
| 五、 资料整理及统计分析 |
| 六、 数据采集和统计分析的质量控制 |
| 第二部分 结果 |
| 一、 研究对象一般情况 |
| 二、 胰腺癌细胞K ras基因突变检测 |
| 三、 血浆叶酸、维生素B_(12)、同型半胱氨酸与胰腺癌关系 |
| 四、 血浆叶酸、维生素B_(12)、同型半胱氨酸与K ras基因野生型胰腺癌关系 |
| 五、 血浆叶酸、维生素B_(12)、同型半胱氨酸与K ras基因突变型胰腺癌关系 |
| 六、血浆叶酸、维生素B_(12)、血浆同型半胱氨酸的关系 |
| 第三部分 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 附录1 胰腺癌及健康人群调查表 |
| 附录2 综述叶酸与胰腺癌关系研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文 |
| 致谢 |
（10）结直肠癌K-ras基因突变的实验研究及临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 结直肠癌不同实体组织K-ras 基因突变的临床意义 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 结直肠癌患者外周血K-ras 基因突变的临床意义 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 结直肠癌K-ras 基因研究进展 |
| 附录 作者读博期间发表的论文 |
四、胰腺癌患者血浆k-ras基因突变的检测（论文参考文献）
- [1]新型纳米探针检测血浆K-ras基因突变与胰腺癌根治术后复发的关系研究[J]. 王晓光,宋政炜,倪全法,陈飞,钟征翔. 肿瘤学杂志, 2018(01)
- [2]纳米探针检测鼠类肉瘤病毒癌基因突变与胰腺癌分期及预后的研究[J]. 王晓光,倪全法,陈飞,亓立峰,钟征翔. 中华实验外科杂志, 2017(03)
- [3]外周血K-ras基因突变联合血清肿瘤标志物检测对胰腺癌诊断价值的Meta分析[J]. 胡昕滢,胡小琴,王莉娜. 中国循证医学杂志, 2016(06)
- [4]新型纳米捕获探针检测血浆中K-ras基因突变在胰腺癌诊断及预后中的价值[J]. 王晓光,陈飞,亓立峰,莫娟芬,钟征翔. 中华胰腺病杂志, 2016(03)
- [5]纳米探针检测血浆中K-ras基因突变在胰腺癌早期诊断及预后中价值的研究[D]. 陈飞. 泰山医学院, 2016(06)
- [6]K-ras基因突变与胰腺癌的早期诊断[J]. 权红良,于忠和. 中国肿瘤临床与康复, 2013(12)
- [7]血浆K-ras基因突变检测对胰腺癌早期诊断价值的影响[J]. 武文,陈炯,杨仁保,周杭城,陈龙江,胡立威. 肝胆胰外科杂志, 2013(01)
- [8]EUS-FNA穿刺物的基因检测对胰腺癌诊断价值的研究[D]. 王小玮. 第二军医大学, 2012(09)
- [9]叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌关系的研究[D]. 杨鸣. 第二军医大学, 2011(10)
- [10]结直肠癌K-ras基因突变的实验研究及临床意义[D]. 沈永奇. 福建医科大学, 2010(10)