阿维菌素类药物对玫瑰无须鲃及牙鲆鳃细胞系的毒性效应

论文摘要

水体是农药等各种污染物的最终归宿。农药对水环境的污染和对水生生物的毒性作用一直是人们关注的热点问题。本文以玫瑰无须鲃和牙鲆鳃细胞系为研究对象,通过体内和体外两种毒性检测系统,研究了生物农药——阿维菌素（abamectin）和伊维菌素（ivermectin,IVM）对玫瑰无须鲃、玫瑰无须鲃精子及牙鲆鳃细胞系的毒性效应。首先,通过光镜和电镜观察,研究了abamectin对玫瑰无须鲃精子活力和超微结构的影响。研究发现,（1）abamectin对玫瑰无须鲃精子具有毒性作用。0.14μmol/L abamectin即对玫瑰无须鲃精子的活力产生抑制。（2）abamectin对玫瑰无须鲃精子活力的影响具有时间和浓度依赖性。随着药液浓度的增加和作用时间的延长,精子运动率显著下降。（3）电镜观察发现,经阿维菌素处理后,玫瑰无须鲃精子的超微结构发生明显变化,包括头部膨胀、变形甚至溶解,细胞核电子密度增大;中片部位的细胞膜局部破裂,出现漏洞,线粒体严重受损;鞭毛末端弯曲或脱落等。其中以中片部位线粒体处损伤最为明显严重。由此推出,线粒体可能是abamectin作用于玫瑰无须鲃精子的主要靶器官。线粒体的损伤使得能量供给不足,致使精子活力显著下降。上述结果表明,玫瑰无须鲃精子是生物农药如阿维菌素毒性体外快速检测的理想系统。其次,通过光镜观察和分光光度法,研究了abamectin对牙鲆鳃细胞系生长速度和抗氧化酶系统的影响。研究发现,（1）abamectin对牙鲆鳃细胞系具有毒性作用。5-20μmol/L abamectin可抑制牙鲆鳃细胞的生长。（2）20μmol/L abamectin可引起牙鲆鳃细胞抗氧化酶活性及超氧阴离子（O2-）含量的迅速应答。将牙鲆鳃细胞暴露于abamectin 2小时后,SOD、CAT和GSH-Px活性迅速升高,但随后下降并维持在低于对照组的水

论文目录

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• 摘 要
• Abstract
• 1 第一章文献综述
• 1.1 农药及其对水环境的污染
• 1.2 农药对水环境污染的检测方法
• 1.2.1 应用水生动物活体检测农药毒性
• 1.2.2 应用水生动物体外培养细胞检测农药毒性
• 1.2.3 应用水生动物配子及早期胚胎检测农药毒性
• 1.2.4 水体污染物毒性检测中的常用指标
• 1.3 阿维菌素类药物研究进展
• 1.3.1 阿维菌素类药物概述
• 1.3.2 阿维菌素类药物的作用机理
• 1.3.3 阿维菌素类药物在农业、畜牧业等中的应用
• 1.3.4 阿维菌素类药物残留的检测
• 1.3.5 阿维菌素类药物的毒理学研究
• 1.4 玫瑰无须鲃和牙鲆鳃细胞系的研究背景
• 1.4.1 玫瑰无须鲃的研究背景
• 1.4.2 FG细胞系的研究背景
• 1.5 论文立题依据、内容和意义
• 2 第二章阿维菌素（abamectin）对玫瑰无须鲃精子的体外毒性作用
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 化学试剂
• 2.2.2 实验动物
• 2.2.3 精液收集
• 2.2.4 精子活力分析
• 2.2.5 电镜观察
• 2.3 结果
• 2.3.1 abamectin抑制精子运动
• 2.3.2 abamectin 对玫瑰无须鲃精子超微结构的损伤
• 2.3.3 讨论
• 3 第三章阿维菌素（abamectin）对牙鲆（Phralichihys olivaceus）鳃细胞系的体外毒性效应
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料和试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.3 统计分析
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 细胞生长的抑制
• 3.3.2 细胞形态的变化
• 3.3.3 抗氧化系统的变化
• 3.4 讨论
• 4 第四章阿维菌素（abamectin） 对玫瑰无须鲃的毒性效应
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 化学试剂
• 4.2.2 实验动物
• 4.2.3 半致死浓度的测定
• 4.2.4 亚急性毒性实验
• 4.2.5 abamectin 对玫瑰无须鲃体内精子的毒性作用
• 4.2.6 abamectin 对玫瑰无须鲃鳃、肾脏、肝脏和精巢结构的影响
• 4.2.7 统计分析
• 4.3 结果
• 4.3.1 96h LC50 的测定
• 4.3.2 abamectin 对玫瑰无须鲃体内精子的毒性作用
• 4.3.3 abamectin 对玫瑰无须鲃鳃、肾脏、肝脏和精巢结构的影响
• 4.4 讨论
• 5 第五章伊维菌素对玫瑰无须鲃及牙鲆（Phralichihysolivaceus）鳃细胞系的毒性作用
• 5.1 前言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 化学试剂
• 5.2.2 实验材料
• 5.2.3 实验方法
• 5.3 结果
• 5.3.1 伊维菌素对玫瑰无须鲃的LC50 的测定
• 5.3.2 伊维菌素对玫瑰无须鲃体外精子的活力影响
• 5.3.3 伊维菌素对牙鲆鳃细胞的毒性
• 5.4 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 图表目录
• 致谢
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• 近年来参加的科研工作: