鸡新城疫灭活疫苗生产关键环节质量控制

论文摘要

新城疫是由病毒引起的鸡和火鸡急性高度接触性传染病,常呈败血症经过。目前在世界上许多国家和地区都有发生,给养禽业造成了巨大的经济损失。这种病毒,主要引起禽类的全身性或者呼吸系统性疾病问题,鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染,发病情况从急性败血性死亡到无症状带毒等,现阶段接种疫苗仍然是防控新城疫疫情的最有效措施。目前世界上研制出的新城疫疫苗有灭活全病毒疫苗、亚单位疫苗、重组活载体疫苗和核酸疫苗等,其中,灭活疫苗具有制备工艺简单、免疫效果确实、免疫持续期长等特点,已被许多国家使用,有效地避免了新城疫的大暴发或大流行。因此,生产安全高效疫苗对本病预防和控制十分重要。本文以新城疫灭活疫苗半成品抗原活性成份及成品规模化生产线为研究对象,探讨3个生产过程质量控制要点,为完善疫苗生产提供有效依据。（1）鸡胚质量：通过总结分析连续2年的生产数据,结合半成品细菌计数和质检合格率情况,探讨鸡胚质量对半成品生产质量控制的影响规律,建议重视对鸡胚质量控制。本研究结果表明,生产用鸡胚的前期孵化死亡率与接种后孵化培养死亡率成正比,鸡胚接种后孵化培养的死亡率与收获的尿囊液细菌计数成正比,收获尿囊液中的细菌计数越多,抗原活性成份的灭活效果越差。将接毒前孵化死亡率控制在14%以下,将有利于将接毒后孵化培养死亡率控制在8%以下,继而有利于将收获尿囊液细菌计数控制在105水平以下。（2）病毒培养和病毒灭活方法：通过比较4个不同时间段的病毒培养时间,结合血凝试验结果和生产实际,筛选出最适宜的病毒培养时间为72小时；通过比较4个不同时间段的病毒灭活时问,根据灭活试验、无菌检验结果,并结合生产实际,筛选出最适宜的病毒灭活时间为24小时。（3）乳化工艺：通过试验分析影响疫苗稳定性的因素,从乳化时间,混合速度,乳化速度,储存温度等方面总结出了最适的乳化时间是42-48分钟,水相加入油相的时间是15-20分钟,乳化速度是6000转／分,储存温度是5℃-10℃。

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSTRACT
• 第一篇 文献综述
• 1 鸡新城疫概述
• 2 鸡新城疫的历史
• 3 目前我国鸡新城疫的发生特点
• 3.1. 病原
• 3.2. 流行病学
• 3.3. 症状和病变
• 4 当前鸡新城疫发生的主要原因
• 4.1. 病毒因素
• 4.2. 混合感染和/或继发感染
• 4.3. 免疫不合理
• 4.4. 饲养管理欠缺
• 5 诊断技术
• 5.1. 血清学
• 5.2. 病毒的分离和鉴定
• 6 防控对策
• 6.1. 完善和加强兽医行政管理
• 6.2. 加强养鸡场的生物安全措施
• 6.3. 加强饲养管理
• 6.4. 加强疫苗预防
• 6.5. 紧急补救措施
• 参考文献
• 第二篇 试验研究
• 第一章 鸡胚质量对鸡新城疫灭活疫苗抗原抗原活性成份质量的影响
• 摘要
• 1 材料与方法
• 1.1 鸡胚
• 1.2 鸡胚接毒前孵化记录
• 1.3 工作种毒
• 1.4 无菌生理盐水
• 1.5 抗生素
• 1.6 灭活剂
• 1.7 设备
• 1.8 鸡胚接毒前孵化死亡率对接种后孵化培养死亡率的影响
• 1.9 鸡胚接种后孵化培养死亡率对收获尿囊液浓缩前的细菌计数水平的影响
• 1.10 收获尿囊液浓缩前细菌计数控制水平对疫苗抗原活性成份灭活效果的影响
• 2 结果
• 2.1 鸡胚接毒前孵化死亡率和接种后孵化培养死亡率的关系
• 2.2 鸡胚接种后孵化培养死亡率和收获尿囊液细菌数关系
• 2.3 季节与鸡胚接毒前孵化死亡率的关系
• 2.4 灭活检验一次性通过和重新灭活通过批次尿囊液的细菌计数比较
• 2.5 鸡胚质量控制指标分析结果
• 3 讨论
• 3.1 鸡胚接毒前孵化死亡率对接种后孵化培养死亡率的影响
• 3.2 季节因素对接毒前孵化死亡率和接毒后孵化培养死亡率的影响
• 3.3 鸡胚接种后孵化培养死亡率对收获尿囊液的细菌计数水平的影响
• 3.4 尿囊液细菌计数控制水平对疫苗抗原活性成份灭活效果的影响
• 参考文献
• 第二章 鸡新城疫灭活疫苗抗原活性成份生产技术参数筛选
• 摘要
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 不同孵化时间的尿囊液效价
• 2.2 抗原活性成份不同灭活时间的灭活效果
• 3 分析与讨论
• 3.1 最适病毒培养时间的选择
• 3.2 最适灭活时间的选择
• 参考文献
• 第三章 鸡新城疫灭活疫苗稳定性影响因素研究
• 摘要
• 1 材料与方法
• 1.1 主要材料与设备
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 乳化时间对鸡新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 2.2 乳化速度对新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 2.3 乳化温度对鸡新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 2.4 水相加入油相的速度对新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 2.5 乳化剂对新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 2.6 储存温度对新城疫油乳剂灭活疫苗稳定性的影响
• 3 分析与讨论
• 3.1 疫苗稳定性
• 3.2 乳化剂及其比例
• 3.3 最佳乳化时间与乳化转速
• 3.4 温度对油乳剂疫苗稳定性影响
• 参考文献
• 全文总结
• 符号及縮略语说明
• 致谢