糖脉通对糖尿病神经病变的药效研究及相关机制探讨

论文摘要

目的：本课题目的在于研究糖脉通对糖尿病神经病变（diabetic neuropathy, DN）的防治作用,并初步探讨其可能机制。方法：小鼠在禁食不禁水24小时后,一次性腹腔注射链脲菌素（streptozotocin, STZ） 140mg/kg～150mg/kg以复制Ⅰ型糖尿病小鼠；正常对照组注射同等体积柠檬酸盐缓冲液。以注射后72h后血糖值>16.65mmol／L为造模成功,将造型成功的动物随机分为模型组、卡马西平（0.1 g／kg）、糖脉康4.3g／kg、糖脉通0.45 g／kg、糖脉通0.15g／kg、糖脉通0.05 g／kg。每天灌胃给药一次,连续4周,模型组和对照组则给予等体积的溶媒；在给药2周后运用热板法测定雌性小鼠热刺激痛阈值；在给药后2、4周,分别测定压刺激痛阈值、电刺激敏感值。利用长期灌胃高糖高脂乳加一次性小剂量尾静脉注射STZ 25mg／kg复制Ⅱ型糖尿病模型,正常对照组注射同等剂量缓冲液。在静脉注射STZ 72h后其血糖值>13.7mmol／L为造模成功。将造型成功的动物随机分为模型组、阳性组（盐酸二甲双胍0.1 g／kg和卡托普利0.25g／kg）、糖脉康4.3g／kg、糖脉通0.3 g／kg、糖脉通0.15 g／kg、糖脉通0.075 g／kg。每天灌胃给药一次,连续8周,分别测定给药后2、8周时各动物的标准2导联心电图,末次给药后24小时测定动物坐骨神经运动神经传导速度（MNCV）,同时取血清测定葡萄糖（GLU）、总胆固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、糖化血清蛋白（GSP）、晚期糖基化终末产物（AGEs）,取坐骨神经做显微观察和电镜检查,采用免疫组织化学LDP法（labeled dextran polymer method）检测坐骨神经晚期糖基化终末产物受体表达。同时还考察了药物对正常小鼠血糖的影响。结果：小鼠在复制成Ⅰ型糖尿病后,其对热刺激、机械刺激的敏感性显著增高,与对照组比较有统计学差异,TMT0.15 g/kg、0.05 g/kg均能减低糖尿病小鼠对热刺激的敏感性（P<0.01,P<0.05）,也有降低糖尿病小鼠对机械刺激（压力）敏感性的趋势,但作用较弱,与模型组比较无统计学差异。在CS条件下（30V）,Ⅰ型糖尿病小鼠的C纤维调节的逃避反射对电刺激产生明显高放电反应；在post-CS条件下（15V）,Aδ纤维调节的逃避反射在强电刺激后对低电刺激的易化程度明显降低,与对照组比较有统计学差异。糖脉通三个剂量组均可降低糖尿病小鼠C纤维调节的逃避反射在强电压刺激下所表现的高敏感性（均为P<0.01）,也可改善Aδ纤维调节的逃避反射在强电刺激后易化程度,与模型组比较有统计学差异。大鼠在复制成Ⅱ型DM模型后2、8周,其清醒心电的心率减缓,MNCV明显减慢,有髓纤维严重脱髓鞘、许旺细胞变性坏死,血清MDA、TG、GSP、AGEs水平显著升高,T-SOD水平降低,但血中TC水平变化不大,与对照组比较无统计学差异,RAGE强度表达减少,与对照组比较有统计学差异。糖脉通0.3 g／kg、0.15 g／kg剂量组均能明显增快运动神经传导速度,改善坐骨神经病理结构,降低血清MDA、GSP、AGEs,增加RAGE表达,与模型组比较有统计学差异。但对2型糖尿病大鼠心率、TC、TG等指标无明显影响。糖脉通对正常小鼠、Ⅰ型糖尿病小鼠及Ⅱ型糖尿病大鼠血糖均无明显影响。结论：糖脉通可降低糖尿病动物痛觉敏感性,改善传导速度,改善或延缓坐骨神经形态学改变,提示糖脉通对周围神经的结构和功能有保护作用：糖脉通对糖尿病神经病变的防治作用不是通过降血糖来实现的,其作用机制可能与抑制糖基化终末产物通路、抗氧化应激等有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 引言
• 实验研究
• 第一部分 糖脉通对糖尿病动物感觉神经的影响
• 1 实验材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二部分 糖脉通对糖尿病大鼠运动及自主神经的影响
• 1 实验材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 糖脉通防治糖尿病神经病变作用机理探讨
• 1 实验材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 综述 糖基化终末产物与糖尿病神经病变
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果