论文题目: PDCzm基因的克隆与表达及具有升白作用蒎烷类双苷的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 微生物与生化药学
作者: 郭丽清
导师: 游松
关键词: 丙酮酸脱羟酶,移动单胞,克隆,蒎烷类双苷,升白作用
文献来源: 沈阳药科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本论文包括两部分，第一部分为移动单胞中丙酮酸脱羧酶(PDCzm)基因的克隆与表达，第二部分为具有升白作用蒎烷类双苷(PLD)的研究。 第一部分为了研究PDCzm，首先提取移动单胞总DNA，按PDCzm基因两侧序列(GenBank Access Number：X59558)设计引物，扩增PDCzm基因。收集1.7kb片段，以pMD18-T为克隆载体，转化E.coli JM109感受态细胞，选取阳性克隆，成功构建克隆质粒pZM-MD。 对质粒pZM-MD和pET-22b(+)均进行BamH Ⅰ和Nde Ⅰ双酶切，连接，成功构建表达质粒pZM-22b，并转入E.coli BL21(DE3)进行诱导表达，蓝白斑法筛选阳性克隆，经SDS-PAGE法检测，目的蛋白成功表达，且表达蛋白约占菌体可溶性蛋白的37.9％。 第二部分建立了PLD指纹图谱，并进行了方法学考察，精密度、重现性、稳定性等均符合要求。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件”分析，得到对照指纹图谱，将不同批次的PLD与对照图谱进行相似度比较，其值均大于0.90，为有效控制PLD质量提供依据。 考察了PLD对经X-射线照射小鼠的外周血白细胞总数、血红蛋白含量、血小板数量和骨髓有核细胞总数下降有显著改善作用；对环磷酰胺致小鼠外周血白细胞总数、血红蛋白含量、血小板数量及骨髓有核细胞总数下降有显著改善作用；对盐酸阿糖胞苷致家兔骨髓造血功能抑制有明显改善作用。结果表明，PLD有显著的升白作用。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一部分 移动单胞丙酮酸脱羧酶(PDCzm)基因的克隆与表达
第一章 前言
1.1 丙酮酸脱羧酶的来源
1.2 丙酮酸脱羧酶催化的反应
1.3 课题意义及展望
第二章 PDCzm基因的克隆及表达
2.1 实验材料
2.2 实验方法
第三章 实验结果与小结
3.1 PDCzm基因的获得
3.2 克隆质粒的构建及鉴定
3.3 表达质粒的构建及鉴定
3.4 总蛋白含量的测定(Lowry法)
3.5 工程菌的生长曲线的绘制
3.6 PDCzm的诱导表达
3.7 PDCzm的SDS-PAGE检测
3.8 小结
参考文献
第二部分 具有升白作用蒎烷类双苷(PLD)的研究
第一章 前言
1.1 PLD的研究背景
1.2 指纹图谱研究的必要性
1.3 白细胞及放、化疗引起的损伤
1.4 开发PLD的意义
第二章 PLD的指纹图谱研究
2.1 材料与仪器
2.2 指纹方法的建立
2.3 供试品指纹图谱的测定及比较
2.4 指纹图谱的建立
2.5 小结
第三章 PLD的升白作用研究
3.1 材料与仪器
3.2 实验方法
3.3 结果与讨论
3.4 小结
参考文献
全文结论
个人简历
在学期间成果
致谢
发布时间: 2006-11-27
参考文献
- [1].硼替佐米中间体的合成[D]. 付雪姣.浙江大学2012
相关论文
- [1].毛大丁草多糖C（Gcp）对苯中毒小鼠的升白作用及其机制研究[D]. 高彩凤.山西医科大学2006
- [2].葛根化学成分和质量控制方法研究[D]. 迟霁菲.沈阳药科大学2006
- [3].Aspergillus sp.对左旋一叶萩碱和去氢木香内酯选择性还原反应的初步研究[D]. 杨莉.沈阳药科大学2006
- [4].野菊花注射剂质量评价方法研究[D]. 谭晓杰.沈阳药科大学2005
- [5].假单胞菌TS1138由DL-ATC转化L-半胱氨酸关键酶基因的克隆与表达[D]. 李洋.沈阳药科大学2005
- [6].大豆异黄酮组合物的制备及其生物合成的初步研究[D]. 吕显刚.沈阳药科大学2004
- [7].芍药中相关单萜的分离及其组合物免疫活性的研究[D]. 梁士民.沈阳药科大学2004
- [8].活性愈创木烷内酯组合物的制备及其相关生合成的研究[D]. 赵晓丹.沈阳药科大学2004
- [9].忽地笑叶相关基因表达及克隆分析[D]. 高磊.南京林业大学2006
- [10].白藜芦醇苷的生物转化及其产物稳定性的研究[D]. 王旭.沈阳药科大学2007