牡丹远缘杂交及部分杂交后代的AFLP分子标记鉴定

论文摘要

牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)是世界著名花卉之一。长期以来,牡丹的品种改良和育种工作一直是牡丹科研和生产的主要内容,远缘杂交育种是目前及今后相当长的一段时间内牡丹育种的主要方式,而亲和性较强的杂交亲本是牡丹远缘杂交成功的关键因素。本研究从丰富的种质资源中,选择性状优良的亲本材料,进行杂交试验,并对部分疑似杂种利用AFLP分子标记技术进行杂种鉴定,选择出亲和性较高的杂交组合,为探索克服牡丹远缘杂交的不亲和性的有效途径提供依据,同时获得一批牡丹远缘杂种材料为实现延长花期、一年多次开花以及丰富花色等品种改良目标奠定基础。主要结论如下:1、对14个牡丹种和品种、4个芍药种和品种及7个Itoh品种进行了远缘杂交的初步研究,共尝试了48个杂交组合,进行杂交1084朵花,得到1715粒种子,其中发芽534粒。发现杂交组合对远缘杂交结实率有很大影响,紫斑牡丹ב正午’与杨山牡丹‘凤丹白’ב正午’这两种杂交组合结实率高,能够较好打破牡丹组亚组间的远缘杂交不亲和;以芍药1#、2#和川赤芍作为母本,‘Golden Era’、‘金阁’、‘Renown’和‘Viking Full Moon’作为父本结实率较高,能够较好打破芍药组与牡丹组间的远缘杂交不亲和。2、对以紫斑牡丹不同无性系为母本,‘正午’为父本杂交所得子代中,选取22个杂交子代使用AFLP分子标记技术进行杂种鉴定,根据条带统计结果及聚类分析发现多数子代确实是紫斑牡丹与‘正午’的杂交后代,而且属于偏母本类型的杂种。子代AFLP扩增结果出现了父母本都不具有的谱带,说明子代不仅遗传了亲本的特征还产生了变异。3、紫斑牡丹ב正午’这一杂交组合亲和性较高,经杂种鉴定证明多数子代为真杂种,说明这一杂交组合具有较大的潜力,应该在今后的育种工作中得到进一步推广利用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 牡丹远缘杂交育种研究
• 1.1.1 牡丹远缘杂交的类型
• 1.1.2 牡丹组内远缘杂交研究
• 1.1.3 牡丹组与芍药组间远缘杂交研究
• 1.1.4 牡丹远缘杂交的特点以及育种策略
• 1.2 AFLP 技术的研究概况
• 1.2.1 AFLP 的原理及特点
• 1.2.2 AFLP 技术的在芍药属植物研究及杂种鉴定方面的应用
• 1.3 本课题的目的和意义
• 2 牡丹远缘杂交育种研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.1.2.1 亲本材料的田间观察
• 2.1.2.2 自交亲和性试验
• 2.1.2.3 杂交试验
• 60Coγ射线辐射处理后杂交试验'>2.1.2.4 花粉⁶⁰Coγ射线辐射处理后杂交试验
• 2.1.2.5 杂交种子的处理及播种
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 亲本的形态学特征
• 2.2.2 自交亲和性
• 2.2.3 杂交组合的亲和性及结实率
• 2.2.3.1 牡丹组内远缘杂交不同组合的结实率
• 2.2.3.2 牡丹组、芍药组间远缘杂交不同组合的结实率
• 60Coγ射线辐射处理后杂交结果'>2.2.3.3 花粉⁶⁰Coγ射线辐射处理后杂交结果
• 2.2.4 杂交种子的发芽率
• 2.3 小结与讨论
• 2.3.1 自交亲和性
• 2.3.2 牡丹远缘杂交亲本选择对杂交结实率的影响
• 2.3.3 不同处理方式对种子出苗率的影响
• 3 部分疑似杂种的AFLP 分子标记技术鉴定
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.1.1 植物材料
• 3.1.1.2 主要生化试剂
• 3.1.2 叶片基因组总DNA 提取与检测
• 3.1.2.1 叶片样品的采集与处理
• 3.1.2.2 叶片基因组总DNA 提取与检测
• 3.1.3 AFLP 分子标记的反应体系建立与引物筛选
• 3.1.3.1 AFLP 标记最佳反应体系的建立
• 3.1.4 AFLP 标记结果统计与数据分析方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 AFLP 标记扩增结果分析
• 3.2.2 杂交亲本及后代的相似系数与聚类分析
• 3.3 小结与讨论
• 4 总结
• 参考文献
• 图版
• 个人介绍
• 导师介绍
• 致谢