论文摘要
目的:1.建立猪急性心肌梗死模型;2.观察人胚胎生殖细胞（human embryonic germ cells,hEGCs）移植到猪急性心肌梗死模型心肌中的存活及分化;3.探讨人EG细胞移植心肌组织后血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及意义。方法:取5-10周流产人胚胎生殖腺嵴,采用组织块培养法培养人EG细胞。单独培养人EG细胞,同时将人EG细胞与胚胎心肌细胞共培养以模拟心肌微环境,分别检测二者第3天与第9天培养上清液中VEGF的表达水平。通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立猪急性心肌梗死（AMI）模型,分为移植组、对照组。移植组为将体外扩增的人EG细胞注射到猪梗死心肌周边,对照组用同样方法注射无菌PBS。移植后2周处死猪,用免疫组织化学方法以鼠抗人细胞核抗体MAB1281作示踪剂,检测移植细胞的存活情况,并观察转录因子GATA-4、连接蛋白Cx43在移植细胞的表达。结果:体外培养获得大量人EG细胞,人EG细胞与胚胎心肌细胞共培养组第3天与第9天上清液中VEGF含量分别较人EG细胞单独培养组高,差别有显著意义（P<0.05）;成功建立猪急性心肌梗死模型,结扎冠脉后可见心电图典型的心肌梗死变化;免疫组化显示移植组抗人细胞核抗体MAB1281、转录因子GATA-4、连接蛋白Cx43均呈阳性表达,对照组为阴性表达。结论:在猪急性心肌梗死模型建立后经心外膜移植人EG细胞,人EG细胞在宿主心肌存活且逐渐向心肌细胞分化,植入的人EG细胞可能通过分泌VEGF等细胞因子促进梗死区的心肌修复。
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