小鼠早期胚胎中nNOS、iNOS 和 eNOS mRNA的表达

论文摘要

一氧化氮（nitric oxide,NO）是一种具有自由基性质的生物活性分子,作为一种信号分子,NO在机体防御、神经信号传导、血管扩张等生理过程中发挥着重要的作用。生物体内的一氧化氮由一氧化氮合酶（NOS）催化L-精氨酸脱胍基产生L-胍氨酸而成,现已确认的一氧化氮合酶有3种亚型,分别是神经元型NOS（nNOS）、内皮型NOS（eNOS）和诱导型NOS（iNOS）。NOS是一氧化氮生成过成中的限速酶,因此某一组织中NOS的量能线性反应出该组织中NO的量。 NO作为一种多功能的分子,在许多生理系统的信号传递中起重要作用,近年来有许多研究表明NO在体内外早期胚胎发育中具有重要的调节作用。动物早期胚胎的发育是个体发育的重要阶段,其发育过程受体内许多因素的调节和影响。人们已从多个方面对早期胚胎发育过程作了大量的研究,然而对NO在早期胚胎中可能产生的生理调节作用了解较少。为了探讨NO对小鼠早期胚胎发育的影响,深入研究早期胚胎发育机制,揭示其发育过程的调节规律,本研究采用反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase RT-PCR）方法检测了附植前各发育时期胚胎中nNOS、iNOS和eNOS的mRNA的表达情况。结果表明:1-细胞胚胎到早期囊胚均有nNOS和eNOS mRNA的表达,1-细胞期到桑椹胚的相对表达量有上升趋势,到早期囊胚又有所下降,经t检验各期胚胎nNOS和eNOSmRNA的相对表达量差异不显著（P>0.05）。除了早期囊胚,其它各期的早期胚胎均有iNOS mRNA的表达,且相对表达量有所增加,到桑椹胚时相对表达量最大,经t检验,1-细胞胚胎到8-细胞胚胎的iNOS mRNA的相对表达量差异不显著（P>0.05）,而桑椹胚和其它各期胚胎的iNOS mRNA的相对表达量差异显著（P<0.05）。 结果表明,小鼠早期胚胎的发育至少需要两种NOS的参与,NO在小鼠早期胚胎的正常发育过程中起着重要的调节作用,并可能与附植前胚胎的信号传递及早期分化有关。

论文目录

• 前言
• 材料与方法
• 1.材料
• 2.方法
• 结果与分析
• 1.超数排卵
• 2.早期胚胎的发育时期和形态学观察
• 3.总RNA样品的检测
• 4.cDNA的检测
• 5.目的基因PCR扩增的琼脂糖电泳
• 6.PCR扩增产物半定量
• 讨论
• 1.超排效果的影响因素
• 2.NO对小鼠早期胚胎发育的影响
• 3.一氧化氮在生殖系统中的作用前景
• 4.胚胎总RNA的提取NOS的RT-PCR测定
• 结论
• 参考文献
• 缩略词
• 致谢
• 作者简历