抗烟草黑胫病分子标记的筛选及抗性遗传规律的研究

论文摘要

在烟草生产中,烟草黑胫病（Phytophoranicotiana Breda de Haan）,是我国烟草的主要真菌性病害。因此,为了给烟草黑胫病抗性育种提供有效的分子标记,以便更好的提高烟草抗病育种的效率。本实验以高抗品种Florida301和高感品种红花大金元为亲本,及其F1和155个F2单株进行苗期抗病性鉴定。利用SSR标记方法获得了与抗黑胫病基因相连锁的标记。实验取得如下结果:1.通过对155株F2代单株进行抗病性鉴定,在155个F2单株中,抗病单株为31株,感病单株为124株,经X2测验Xc2=3.23＜X0.052=3.84,符合1R:3S的分离比例,证明烟草黑胫病的感病性状主要受由1对隐性基因控制。2.采用BSA与SSR技术相结合,利用592条SSR引物对抗、感亲本进行筛选,其中有53条引物在两亲本之间表现多态性,但仅有引物PT20308与PT30173在抗感池间多态性标记与两亲本的多态性标记相同。经F2单株分析,PT20308扩增出的特异DNA片段与亲本Florida301品种中的黑胫病抗性基因连锁,遗传距离17cM,DNA标记条带大约为180bp,定名为PT20308-180。PT30173与Florida301抗黑胫病基因遗传距离为22cM,DNA标记条带大约为400bp,定名为PT30173-400

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 烟草黑胫病的研究
• 1.1.1 烟草黑胫病的症状
• 1.1.2 烟草黑胫病的病原
• 1.1.3 烟草黑胫病的生理小种
• 1.1.4 抗烟草黑胫病种质资源的研究
• 1.2 分子标记的简介
• 1.2.1 遗传标记的发展及种类
• 1.2.2 DNA分子标记主要类型、原理和特点
• 1.2.3 与目标性状紧密连锁的分子标记筛选方法
• 1.2.4 分子标记在烟草黑胫病抗病育种中的应用
• 1.3 本试验研究的目的和意义
• 1.4 技术路线
• 2 材料与方法
• 2.1 试验地点
• 2.2 试验材料
• 2.2.1 烟草材料
• 2.2.2 烟草黑胫病菌
• 2.2.3 SSR引物
• 2.3 主要试剂、仪器设备
• 2.4 试验方法
• 2.4.1 烟草材料的准备
• 2.4.2 接种液的制备
• 2.4.3 接种方法
• 2.4.4 抗病性鉴定
• 2.4.5 基因组DNA的提取
• 2.4.6 烟草黑胫病SSR体系构建及分析
• 2.4.7 数据记录、与连锁分析
• 2.4.8.所用试剂的配制
• 3 结果与分析
• 3.1 烟草黑胫病的遗传分析
• 3.2.基因组DNA的提取及检测
• 3.3 烟草黑胫病SSR分子标记
• 3.3.1 多态性SSR引物的筛选
• 2代单株验证'>3.3.2 特异片段的F₂代单株验证
• 3.4 SSR标记与烟草抗黑胫病基因的连锁关系分析
• 4 讨论
• 4.1 烟草黑胫病抗性遗传分析
• 4.2 DNA的提取
• 4.3 对SSR标记方法的分析
• 4.3.1 对SSR标记稳定性的分析
• 4.3.2 SSR引物的筛选
• 4.3.3 对SSR标记结果的分析
• 4.4 关于SSR标记的体会
• 4.5 JOINMAP3.0软件分析的优势
• 2代分离群体与分离群体分组分析法（BSA）法鉴别分子标记的可行性分析'>4.6 F₂代分离群体与分离群体分组分析法（BSA）法鉴别分子标记的可行性分析
• 5 结论
• 6 下一步工作计划与展望
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介