论文摘要
目的:观察缬沙坦对高糖环境下系膜细胞氧化应激水平的影响,研究缬沙坦对高糖刺激后系膜基质沉积的影响,初步探讨缬沙坦对糖尿病肾病作用的机制。方法:1、高糖体外培养系膜细胞,不同浓度缬沙坦干预,以RT-PCR方法检测细胞内NADPH氧化酶亚基p22phox的mRNA表达的变化,并以DCFH-DA和HE标记细胞内活性氧（ROS）,流式细胞术检测细胞内ROS表达改变,观察缬沙坦对高糖刺激后系膜细胞内氧化应激水平的影响。2、不同浓度缬沙坦作用高糖体外培养系膜细胞,选取纤维连接蛋白（FN）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、基质金属蛋白酶（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2）反映基质合成和降解,RT-PCR方法检测,选取细胞外基质重要相关因子转化生长因子-β1（TGF-β1）,ELISA方法检测,观察缬沙坦对高糖下系膜细胞基质沉积的影响。结果:1、高糖作用2天时,NADPH氧化酶亚基p22phox的mRNA表达无明显变化,缬沙坦对其无影响,高糖作用5天后,p22phox的mRNA表达增加,缬沙坦对高糖引起系膜细胞p22phox的mRNA表达增加有下调作用,具浓度依赖性;高糖分别作用2天、5天的系膜细胞内,超氧阴离子（.O2-）与过氧化氢（H2O2）随着时间延长,升高愈加明显,缬沙坦对其均具有下调作用,并呈浓度依赖性。2、缬沙坦能够以浓度依赖关系抑制不同作用时间下高糖引起系膜细胞FN、PAI-1、TIMP-2 mRNA及TGF-β1蛋白水平的升高,上调高糖引起系膜细胞MMP-2 mRNA水平的降低。结论:1、缬沙坦对高糖引起系膜细胞氧化应激水平的升高具有下调作用,其作用具有浓度依赖性。2、缬沙坦能够以浓度依赖关系抑制高糖引起系膜细胞的基质沉积。