地锦草总黄酮的提取及质量控制研究

论文摘要

本研究建立了地锦草总黄酮的提取、分离、纯化和含量测量方法,检测了地锦草不同部位总黄酮和槲皮素的含量,进行了地锦草不同部位总黄酮含量的指纹图谱分析。采用超声-加热回流-大孔吸附树脂吸附的方法提取分离纯化地锦草总黄酮,正交试验筛选超声提取地锦草总黄酮的最佳工艺。结果表明100g地锦草干燥全草提取纯化得到3.679g黄褐色总黄酮粉末,经多种化学试剂鉴定,均呈明显的黄酮反应,在3.679g地锦草黄酮粉末中,含纯黄酮84.7%,即3.131g,总得率为3.13%。超声波提取地锦草总黄酮的最佳工艺:为以料液比为1:20,70%的乙醇为提取溶剂,60℃超声提取35min,影响超声提取效果大小的因素依次为提取时间＞溶剂浓度＞料液比＞提取温度。采用紫外分光光度法测地锦草总黄酮含量（以芦丁为标准品,NaNO2-Al（NO3）3-NaOH体系为显色剂,510nm处测吸光度）;高效液相色谱法（HPLC）测地锦草槲皮素含量（色谱柱:ShimADZU VP-ODS-C18,5μm,4.6×250mm（日本岛津）,柱温35℃;检测器:紫外检测器,检测波长360nm;流动相:甲醇:0.4%磷酸（50:50）,流速0.8 ml/min,进样量10μl）,并对地锦草不同部位总黄酮和槲皮素进行综合评价。结果显示总黄酮在2μg-16μg（R=0.9993）内线性关系良好,平均回收率为102.2%;HPLC法测槲皮素在0.5835μg-29.190μg（R=0.9998）内线性关系良好,平均回收率为99.6%。地锦草不同部位中总黄酮和槲皮素含量由高到低依次为叶、全草、种子、茎、根,其中叶的总黄酮和槲皮素含量分别达到了43.25mg/g和17.86 mg/g。此实验研究可为地锦草全草及不同部位总黄酮和槲皮素的质量标准制定提供依据HPLC研究地锦草不同部位指纹图谱（色谱条件:色谱柱:ShimADZU VP-ODS-C18,5μm,4.6×250 mm（日本岛津）,流动相:乙腈:0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱;柱温:35℃;检测波长:360nm,分析时间60min;自动进样10μl）。采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对指纹图谱进行分析,图谱分析结果显示,地锦草各部位成分存在一定的差异,以全草为参照,各部位与全草的相似度分别为根0.818、茎0.794、种子0.751、叶0.930。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 1 地锦草的研究进展
• 2 黄酮类化合物研究概述
• 第一章 地锦草总黄酮的提取工艺及含量测定
• 1 材料与方法
• 1.1 主要材料及仪器
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 提取纯化结果
• 2.2 超声提取正交实验结果
• 2.3 地锦草总黄酮鉴定结果
• 2.4 地锦草总黄酮含量测定结果
• 3. 讨论与小结
• 第二章 地锦草不同部位总黄酮和槲皮素的含量研究
• 1 材料与方法
• 1.1 主要材料与仪器
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 槲皮素标准品及地锦草不同部位黄酮类化合物HPLC色谱图
• 2.2 地锦草不同部位总黄酮含量测定
• 2.3 地锦草不同部位槲皮素含量测定
• 3 讨论与小结
• 第三章 地锦草不同部位指纹图谱研究
• 1 材料与方法
• 1.1 主要材料及仪器
• 1.2 方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 对照品指纹图谱及地锦草各部位指纹图谱
• 2.2 方法学考察结果
• 2.3 指纹图谱相似度评价
• 3. 讨论与小结
• 第四章 结论与创新点
• 参考文献
• 英文缩略词一览表
• 致谢
• 作者简介