普罗布考对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究

论文摘要

普罗布考对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究目的:糖尿病肾病（DN）是导致终末期肾衰的主要原因之一。研究证明,在糖尿病持续高糖状态下,氧自由基生成增多在糖尿病肾病发生、发展中起重要作用。普罗布考是一种降脂抗氧化剂,在降低TC、TG、LDL-C的同时,HDL-C有轻度降低。同时,作为一种抗氧化剂具有重要的机体保护作用。本研究旨在观察普罗布考对糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应和肾脏α-SMA、CTGF、TGF-β、FN的影响及其机制,探讨其对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法:健康的SD（sprague-Dawley）雄性大鼠36只,随机分成两组:E组（正常对照组,喂养普通饲料,10只）,C组（喂养高糖高脂饮食,26只）,8周后测量血脂、血糖和血胰岛素,并将C组注射STZ造模,血糖测定结果＞16.67mmol/l为2型糖尿病造模成功。结果成模23只,将其重新分组:A组12只,B组（成模后予普罗布考500mg/kg/d干预8周组,11只）,A、B组大鼠继续予高脂高糖饲料喂养8周,E组10只不变,继续予普通饲料喂养8周,后处死。各组大鼠处死前留取24小时尿液,检测24h尿微量蛋白定量（UMA）。股动脉取血测肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、甘油三醋（TG）、总胆固醇（TC）。取左肾称重,计算肾脏肥大指数（KW/BW）。取部分肾组织制备组织匀浆,测肾皮质丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性的变化。部分肾组织采用10%福尔马林固定,石蜡切片,观察肾脏的病理改变,并用免疫组化方法和计算机图像分析技术研究肾脏TGF-β1、FN、α-SMA的表达水平,同时电镜下观察肾脏的超微病理改变。剩余组织置于液氮中,RT-PCR方法检测CTGF、TGF-β1、α-SMA mRNA表达量。所得数据采用SPSS13.0统计软件分析。结果:（1）高糖高脂饮食8周后,STZ诱导2型糖尿病造模的成功率为88.46%。（2）高脂高糖喂养加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂较常规饲料喂养组明显增高,胰岛素抵抗指数升高,符合2型糖尿病发病特点。（3）实验结束时A组大鼠血清的TG、TC、LDL-C水平明显高于E组,其差异均有统计学意义（P＜0.05）。B组大鼠的TC、LDL-C水平显著低于A组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。（4）各组大鼠UMA和KW/BW的变化:A和B组的24hUMA水平明显高于E组（P＜0.05）,其差异均有统计学意义;B组的24hUMA水平较A组明显降低（P＜0.05）。A和B组的KW/BW明显高于E组（P＜0.05）,而A组、B组之间的差异没有统计学意义（P＞0.05）。（5）肾皮质氧化还原指标的变化:A组大鼠肾皮质SOD、GSH-PX活性较E组显著降低（P＜0.05）,MDA含量显著升高（P＜0.05）;普罗布考干预后B组SOD、GSH-PX活性较A组升高,MDA含量较A组显著下降,两组之间均有统计学差异（P＜0.05）。（6）A组大鼠肾小球内TGF-β1、α-SMA、FN蛋白表达较E组显著增加（P＜0.05）,CTGF、TGF-β1和α-SMA mRNA的表达较E组显著增加（P＜0.05）,普罗布考干预后各组蛋白和mRNA表达均较A组明显减少。（7）糖尿病组肾小球基膜增厚,系膜基质增多,足细胞足突严重融合、脱落;B组足突融合严重程度介于E组和A组之间。结论:（1）高糖高脂饮食加小剂量多次注射STZ可以成功诱导SD大鼠的T2DM模型,方法简单且成模率高;（2）糖尿病时。肾组织抗氧化能力降低、氧化应激增高,可能导致肾小球上皮细胞和肾小管间质细胞转型分化增加,同时CTGF、TGF-β1、α-SMA、FN表达增加,肾脏肥大、增生及纤维化。普罗布考可能通过增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力,减轻氧化应激,减轻细胞转型分化,减少ECM生成,延缓糖尿病肾病的发生发展,从而起到肾脏保护作用。由此提示氧化应激在糖尿病肾病的发生发展中起重要作用。抗氧化治疗是DN的一个具有潜能的治疗方式。（3）目前研究仅限于体外实验及动物模型,在临床方面尚须进一步研究。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 对象和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• 综述正文
• 综述参考文献
• 致谢