LC/MS技术在几种药物的血药浓度测定与代谢组学分析中的应用研究

论文摘要

临床药代动力学是新药开发的重要组成部分,代谢组学是系统生物学研究的新的重要分支,而专属、准确和灵敏的分析方法是其研究的基础。本论文建立了基于液相色谱—质谱(LC/MS)的复杂生物样品的分析技术,并成功应用于临床药代动力学和代谢组学研究。第一部分介绍了LC/MS在临床药代动力学中的应用。通过对液相色谱分离条件和质谱参数的优化配置,我们建立了血浆中曲美他嗪和硫辛酸含量的LC/MS测定方法,该方法前处理简单,检测准确度、灵敏度、精确度均符合临床生物样品测定的要求。应用此方法能够快速、有效的对曲美他嗪和硫辛酸的临床药动学参数及生物利用度进行评价。第二部分介绍了LC/MS在代谢组学方面的应用。与核磁共振(NMR)、气质联用(GC/MS)等分析工具相比,LC/MS检测灵敏高、无需进行衍生化前处理等优点,近年来广泛应用于代谢组学样品分析。该分析技术适合稳定性差、难于衍生化、不易挥发和小分子化合物的检测。本文通过对混合标准品、尿样样品的分析条件优化,我们建立了一套适用于尿液中代谢物检测的LC/MS分析技术。通过数据挖掘、模式识别等多维统计方法,我们考察了雷公藤多苷片致大鼠毒性,初步的研究结果表明高剂量的雷公藤多苷片能够引起大鼠全身性代谢紊乱,反应出该药物能够引起生理毒性,研究结果与病理表征吻合。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 LC/MS 技术在药物血药浓度测定中的应用
• 1.1 LC/MS 技术及临床药代动力学及生物利用度简介
• 1.1.1 药代动力学及生物利用度简介
• 1.1.2 LC/MS 技术简介
• 1.2 应用 LC/MS 技术研究曲美他嗪人体生物利用度并评价不同制剂生物等效性
• 1.2.1 前言
• 1.2.2 材料和仪器
• 1.2.3 试验设计
• 1.2.4 样本测定方法
• 1.2.5 方法学认证
• 1.2.6 结果
• 1.2.7 讨论
• 1.2.8 小结
• 1.3 应用LC/MS 技术进行硫辛酸临床药代动力学的研究
• 1.3.1 前言
• 1.3.2 材料和仪器
• 1.3.3 样本测定方法
• 1.3.4 方法学认证
• 1.3.5 结果
• 1.3.6 讨论
• 1.3.7 小结
• 1.4 结论
• 2 LC/MS 方法在代谢组学中分析中应用的研究
• 2.1 绪论
• 2.1.1 代谢组学技术简介
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 试剂
• 2.2.2 仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 尿样的前处理
• 2.3.2 流动相的选择
• 2.3.3 质谱条件考察
• 2.4 LC/MS 实验条件的确定
• 2.4.1 尿样的前处理
• 2.4.2 色谱柱选择和流动相的确定
• 2.4.3 MS 条件的确定
• 2.5 用于代谢组学的LC-MS 方法的建立
• 2.5.1 色谱条件
• 2.5.2 样品制备
• 2.5.3 方法学考察
• 2.5.4 结果与讨论
• 2.6 运用代谢组学方法研究雷公藤的生殖毒性
• 2.6.1 大鼠模型的制备
• 2.6.2 尿样分析
• 2.6.3 数据分析
• 2.6.4 讨论
• 2.7 结论
• 3 总结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文