论文摘要
目的:通过实验研究观察肾衰保肾胶囊对5/6肾切除CRF早期大鼠肾脏病理形态和功能的保护作用,从增殖、凋亡及凋亡线粒体途径方面,探讨肾衰保肾胶囊延缓CRF进展的机理。方法:建立大鼠5/6肾切除CRF早期模型,实验分3组:假手术组(K组)、5/6肾切除组(M组)、肾衰保肾胶囊治疗组(S组),在造模一周后用肾衰保肾胶囊进行干预治疗,在12周的观察期内分2周、4周、8周、12周4个不同的时间段对各组进行肾功能、24小时尿蛋白定量及残肾组织标本光镜检查;采用原位检测TUNEL、免疫组化二步法分别检测肾组织中的Caspase-3、Caspase-9、CytC、PCNA动态表达情况;采用Real TimePCR检测肾组织内的Caspase-3、Caspase-9mRNA的动态表达水平。结果:M组2周后出现Scr、BUN、24h尿蛋白定量的逐渐升高。肾脏病理变化为:2周肾小球增大、系膜细胞轻度增生、肾小管扩张;12周出现局灶节段性硬化的肾小球、肾间质轻度纤维化。肾组织细胞增殖、凋亡指数和增殖/凋亡比值均升高。肾实质细胞Cytc的表达随着建模时间延长显著增加;Caspase-3、Caspase-9mRNA明显增加且与肾组织中的Caspase-3、Caspase-9表达趋势一致。S组与M组比较肾功能部分改善,尿蛋白的排泄减少;形态学上系膜基质的增生、肾小球硬化和肾间质纤维化均减轻。与M组比较S组肾小球系膜细胞和/内皮细胞、肾小管上皮细胞8周前增殖指数、12周凋亡指数均显著减少;肾间质细胞增殖指数4周后减少,同期的凋亡指数增加。与M组比较S组肾小球、肾小管细胞增殖/凋亡比值8周前降低但12周时升高;肾间质细胞增殖/凋亡比值降低。CytC表达减弱,Caspase-3、Caspase-9mRNA升高幅度降低。结论:肾衰保肾胶囊对残肾组织的功能和形态有保护作用。肾衰保肾胶囊主要通过抑制肾小球系膜细胞和/内皮细胞、肾小管上皮细胞前期的增殖、后期的凋亡;抑制肾间质细胞的增殖促进同期的凋亡。降低前8周但升高1 2周的肾小球、肾小管细胞增殖/凋亡比值;降低肾间质细胞增殖/凋亡比值来调节肾脏细胞增殖和凋亡的平衡。肾衰保肾胶囊可能通过线粒体途径减少肾实质细胞凋亡。
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