μ型阿片受体与催产素受体二聚化的研究

论文摘要

吗啡有多种药理学作用,包括镇痛、调节免疫功能和神经内分泌等。传统的观点认为,吗啡在体内的多种药理学功能是通过激活μ型阿片受体（MOR）后的信号转导通路而完成的。但是,吗啡的有些效应是不能够单纯的用受体后信号转导理论解释清楚,例如向大鼠脑内注射吗啡可抑制催产素合成与释放。 MOR和催产素受体（OTR）同属于G蛋白耦联受体（GPCRs）的A家族,二者都可以形成同源二聚体和异源二聚体。本工作是从受体的水平探索吗啡抑制催产素合成与释放效应的分子机制,并运用生物化学和生物物理的方法观察MOR和OTR间是否存在着直接的相互作用,以探讨吗啡作用的新途径,为阿片类药物的临床应用提供分子生物学实验资料。 本工作首先表达、纯化包含MOR氨基端86个氨基酸的蛋白,并用以制备MOR抗体,然后以免疫印迹和免疫荧光组织化学的方法检测MOR抗体的特异性。将MOR质粒和OTR质粒转染中国仓鼠卵母细胞（CHO）,经细胞荧光免疫化学检测MOR蛋白和OTR蛋白在转染细胞中的表达情况。运用免疫共沉淀（IP）方法证实MOR和OTR异源二聚体存在于体外培养细胞和大鼠脑组织中。并进一步运用生物物理学方法观察MOR和OTR分子在细胞内的空间分布,以确定MOR和OTR可形成异源二聚体。 结果表明,在MOR质粒和OTR质粒转染的CHO细胞中,可形成MOR-OTR异源二聚体;发现大鼠脑组织中存在MOR-OTR异源二聚体。

论文目录

• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 第二章 实验结果
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明