苦参碱对肝癌细胞HepG2凋亡诱导作用与细胞周期调节蛋白P27～（kip1）的关系研究

论文摘要

目的:苦参碱（matrine,Mat）在临床上主要用于肝炎治疗。最近文献报道它还具有抗癌活性,但其作用机理尚不清楚。本文拟研究 Mat对人肝癌细胞 HepG2 凋亡诱导作用;研究细胞周期调节蛋白 P27kip1在凋亡中变化;探讨细胞凋亡与 p27kip1 之间的关系。初步探讨 P27kip1 调控发生的时期。 方法:运用 MTT 法检测细胞增殖情况,形态学观察、流式细胞仪等多种方法检测 HepG2 凋亡及细胞周期分布的改变。免疫细胞法检测细胞内 p27kip1 蛋白表达变化。RT-PCR 技术检测 mRNA 表达水平。 结果:（1）0.5mg/ml～2.0mg/ml Mat 对 HepG2 细胞增殖有明显抑制作用,Mat 与细胞抑制之间具有时间-剂量依赖性。（2）TEM 观察发现,经 1.0mg/ml Mat 处理 24h 的细胞出现了胞膜上微绒毛消失,染色质边集、核浓缩、核碎裂,凋亡小体形成。（3）FCM 发现 1.0 mg/ml﹑2.0 mg/ml Mat 作用 48h,细胞停滞于 G0/G1 期, 细胞发生凋亡,DNA 组方图上出现典型的凋亡峰,随浓度增加,凋亡百分率逐渐增高。（4）免疫细胞化学结果显示苦参碱使人肝癌细胞 HepG2 P27kip1 蛋白表达上调。（5）RT-PCR 结果表明 Mat 作用引起凋亡时 p27kip1 mRNA 水平无变化。 结论:苦参碱抗肿瘤机制是诱导 HepG2 细胞凋亡,与细胞周期蛋

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• KIP1的关系研究'>论文正文：苦参碱对肝癌细胞 HEPG2 凋亡诱导作用与细胞周期调节蛋白P27^KIP1的关系研究
• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 1、P 27KIP1 的研究进展
• 2、周期素激酶抑制剂 P27与心血管疾病
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文