侧耳属平菇种质资源AFLP分析

侧耳属平菇种质资源AFLP分析

论文摘要

侧耳属种质资源丰富,目前世界上已知的100多种侧耳中,我国发现的就有36种。在长期的栽培驯化过程中,由于其形态特征极易受外界环境条件的影响,以致于同一物种因生长环境的不同而在表型特征上表现出较大的差异,造成同种异名,异种同名的现象显著。AFLP技术灵敏度高,重复性好,分辨率高,通常用来进行种间或种内不同菌株间的比较。本试验采用AFLP技术对30份侧耳属平菇菌株材料进行遗传多样性、分类、亲缘关系及种质鉴定等方面的研究,为侧耳属种质资源的评价、分类、选育优质资源和保护利用提供理论依据。1.采用CTAB+free洗涤法对直接采用PDA培养基培养的菌丝体进行DNA提取。结果表明,DNA相对分子量接近21kb,EcoRI完全酶切,并能获得清晰的PCR图谱和AFLP的指纹图谱。2.本研究选用的9对引物组合对30份供试材料进行AFLP分析,共扩增出1830条带,多态性条带1799条,平均多态性百分比为98.3%,结果表明不同供试材料间表现出丰富的遗传多样性。30份供试材料之间相似性系数的范围为0.3798~0.8922,P999与P777之间的相似性系数最大为0.8922,说明二者遗传差异最小,亲缘关系最近。玉秀3号与615之间的相似系数最小且为0.3798,说明二者遗传差异最大,亲缘关系最远。3.在相似系数为(0.51)处取一结合线可将供试材料分为3组,在相似系数为(0.62)处取一结合线可将供试材料分为4组,本研究结果可以作为侧耳属分类的理论依据和基础。4.用AFLP技术对30份侧耳属种质资源进行种质鉴别分析,结果显示,30个侧耳属平菇品种中有29个品种具有特异带,特异带条数最多的高达15条,而对一个品种的鉴别只需要根据一条特异带的存在或缺失就可以与其他资源区分开来,这充分说明了用AFLP技术鉴定种质资源的效率很高。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  • 1 侧耳属分类研究进展
  • 2 国内已知侧耳属种质资源及其分布
  • 3 遗传多样性的概论及其意义
  • 3.1 遗传多样性的概论
  • 3.2 研究遗传多样性的意义
  • 3.3 遗传多样性的研究方法
  • 3.3.1 形态标记
  • 3.3.2 细胞标记
  • 3.3.3 生化标记
  • 3.3.4 分子标记
  • 4 DNA分子标记技术及其在食用菌研究中的应用
  • 4.1 几种常用的分子标记技术
  • 4.2 几种常用的分子标记技术在食用菌研究中的应用
  • 4.2.1 RFLP标记
  • 4.2.2 RAPD标记
  • 4.2.3 ISSR标记
  • 4.2.4 AFLP标记
  • 5 本研究的目的和意义
  • 5.1 研究的目的意义
  • 5.2 研究内容
  • 第二章 侧耳属30个平菇品种的AFLP分析
  • 1 材料和方法
  • 1.1 材料
  • 1.1.1 供试材料
  • 1.1.2 材料处理方法
  • 1.1.3 试验时间及地点
  • 1.1.4 器材和药品
  • 1.2 试验方法
  • 1.2.1 CTAB法提取DNA
  • 1.2.2 DNA纯化
  • 1.2.3 DNA质量检测
  • 1.2.4 AFLP分析
  • 1.2.5 数据分析
  • 2 结果与分析
  • 2.1 基因组 DNA的质量
  • 2.2 AFLP分析
  • 2.2.1 酶切连接结果分析
  • 2.2.2 预扩增
  • 2.2.3 引物筛选
  • 2.3 30份供试材料的AFLP多态性分析
  • 2.3.1 引物多态性
  • 2.3.2 品种多态性
  • 2.4 供试材料的遗传距离和聚类分析
  • 2.4.1 遗传距离
  • 2.4.2 聚类分析
  • 2.5 供试材料的特异性条带分析
  • 3 讨论
  • 3.1 影响侧耳属AFLP分析的因素
  • 3.2 AFLP标记在遗传多样性分析中的特点及优势
  • 3.3 AFLP分类与形态分类的比较
  • 3.4 侧耳属平菇种质资源的AFLP鉴定
  • 第四章 全文总结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简介
  • 相关论文文献

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