郭静静:固氮菌(Ensifer meliloti 1021)降解苯甲腈及其代谢酶的基因克隆和表达论文

郭静静:固氮菌(Ensifer meliloti 1021)降解苯甲腈及其代谢酶的基因克隆和表达论文

本文主要研究内容

作者郭静静,郭磊磊,赵云岫,葛峰,戴亦军(2019)在《固氮菌(Ensifer meliloti 1021)降解苯甲腈及其代谢酶的基因克隆和表达》一文中研究指出:对固氮菌(Ensifer meliloti 1021)降解环境污染物苯甲腈途径及其相关酶进行了基因克隆和表达研究。高效液相色谱法(HPLC)分析显示En.meliloti 1021静息细胞可将苯甲腈降解为苯甲酰胺和苯甲酸。En.meliloti 1021全基因组中没有腈水解酶(nitrilase)基因,但有1个腈水合酶(nitrile hydratase)基因和12个酰胺酶(amidase)基因,因而其降解苯甲腈生成苯甲酸是经腈水合酶/酰胺酶途径。PCR扩增En.meliloti 1021的腈水合酶基因并在Esche-richia coli Rosetta (DE3)中成功表达。腈水合酶过表达的E.coli可在5 min内降解90%的浓度为97 mmol·L-1的苯甲腈,10 min基本检测不到苯甲腈,产生66.9 mmol·L-1苯甲酰胺。对12个酰胺酶进行了系统发育树分析,发现有4个酰胺酶与Genbank数据库中的苯甲酰胺水解酶(benzamide amidohydrolase)有较高的同源性。对这4个酰胺酶基因进行克隆表达以及酶活检测,发现只有登录号为CAC47672.1的酰胺酶有苯甲酰胺酶活性,可将苯甲酰胺水解为苯甲酸。该酰胺酶由434个氨基酸组成,分子量为47 k Da,等电点5.37。

Abstract

dui gu dan jun (Ensifer meliloti 1021)jiang jie huan jing wu ran wu ben jia jing tu jing ji ji xiang guan mei jin hang le ji yin ke long he biao da yan jiu 。gao xiao ye xiang se pu fa (HPLC)fen xi xian shi En.meliloti 1021jing xi xi bao ke jiang ben jia jing jiang jie wei ben jia xian an he ben jia suan 。En.meliloti 1021quan ji yin zu zhong mei you jing shui jie mei (nitrilase)ji yin ,dan you 1ge jing shui ge mei (nitrile hydratase)ji yin he 12ge xian an mei (amidase)ji yin ,yin er ji jiang jie ben jia jing sheng cheng ben jia suan shi jing jing shui ge mei /xian an mei tu jing 。PCRkuo zeng En.meliloti 1021de jing shui ge mei ji yin bing zai Esche-richia coli Rosetta (DE3)zhong cheng gong biao da 。jing shui ge mei guo biao da de E.colike zai 5 minnei jiang jie 90%de nong du wei 97 mmol·L-1de ben jia jing ,10 minji ben jian ce bu dao ben jia jing ,chan sheng 66.9 mmol·L-1ben jia xian an 。dui 12ge xian an mei jin hang le ji tong fa yo shu fen xi ,fa xian you 4ge xian an mei yu Genbankshu ju ku zhong de ben jia xian an shui jie mei (benzamide amidohydrolase)you jiao gao de tong yuan xing 。dui zhe 4ge xian an mei ji yin jin hang ke long biao da yi ji mei huo jian ce ,fa xian zhi you deng lu hao wei CAC47672.1de xian an mei you ben jia xian an mei huo xing ,ke jiang ben jia xian an shui jie wei ben jia suan 。gai xian an mei you 434ge an ji suan zu cheng ,fen zi liang wei 47 k Da,deng dian dian 5.37。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生态与农村环境学报的郭静静,郭磊磊,赵云岫,葛峰,戴亦军,发表于刊物生态与农村环境学报2019年02期论文,是一篇关于固氮菌论文,腈水合酶论文,酰胺酶论文,苯甲腈论文,微生物降解论文,生态与农村环境学报2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生态与农村环境学报2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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