效应物对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用及其抑制机理的研究

论文摘要

酪氨酸酶（EC.1.14.18.1）是一种含铜的氧化还原酶,广泛存在于微生物、动植物以及人体内,能将酪氨酸转化成多巴醌,进而形成黑色素;过量的黑色素形成能产生色素沉着性疾病以及能使果蔬褐变,因此,研究酪氨酸酶抑制剂具有十分重要的意义。本论文以蘑菇酪氨酸酶为研究对象,筛选抑制剂并研究其抑制机理,并总结了抑制剂的构效关系,同时探讨了化妆品中的一些化合物对酪氨酸酶的抑制作用,研究结果和内容如下:分别研究了对羟基苯甲酸酯类化合物对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯;水杨酸甲酯、水杨酸乙酯以及水杨酸衍生物3,5-二硝基水杨酸、5-磺基水杨酸;邻苯二胺、对苯二胺对酪氨酸酶的抑制作用,这些化合物对酪氨酸酶具有不同程度的抑制作用,磺基水杨酸和邻苯二胺对酪氨酸酶具有激活作用。分别研究了苯二甲酸类化合物邻苯二甲酸、间苯二甲酸、对苯二甲酸对酪氨酸酶的抑制作用,研究表明邻苯二甲酸对酪氨酸酶没有抑制作用,间苯二甲酸对酪氨酸酶具有较弱的抑制作用,而对苯二甲酸对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,对苯二甲酸对酪氨酸酶的抑制为混合型抑制。分别研究了苯乙醛、苯乙酸、苯乙醇;呋喃化合物糠醛、糠酸、糠醇、1,4-丁内酯、顺丁烯二酸酐;萘环化合物1-萘酚、2-萘酚、1-萘乙酸;脂肪酸化合物正辛酸、山梨酸、正己酸、巴豆酸、正丁酸对酪氨酸酶的抑制作用,这些化合物对酪氨酸酶具有不同程度的抑制作用,研究了这些化合物对酪氨酸酶的抑制机理,研究表明这些化合物对酪氨酸酶均为可逆抑制,测定了这些化合物对酪氨酸酶的抑制常数,同时研究了这些化合物对酪氨酸酶单酚酶活力的影响,结果表明,这些化合物对酪氨酸酶单酚酶活力具有一定的抑制作用,苯乙醛对则酪氨酸酶单酚酶没有抑制作用。合成了呋喃丙烯酸、2-氯苯丙烯酸、2,4-二氯苯丙烯酸、3,5-二甲氧基苯丙烯酸,研究了这些化合物对酪氨酸酶的抑制作用,研究表明这些化合物对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,其对酪氨酸酶的抑制为可逆抑制,抑制类型均为反竞争抑制;同时研究这些化合物对酪氨酸酶单酚酶活力的影响,结果表明,这些化合物对酪氨酸酶单酚酶活力具有一定的抑制作用。合成了乙酰水杨酸、乙酰对羟基苯甲酸,研究了这些化合物对酪氨酸酶的抑制作用,研究表明这些化合物对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,它们对酪氨酸酶的抑制为可逆抑制,乙酰对羟基苯甲酸对酶的抑制类型为混合型抑制。研究了化妆品中的化合物保湿剂:乙二醇、丙二醇、丙三醇、肌醇、甘露醇;防腐剂苯甲醇、对羟基苯甲酸;果酸类化合物:甘醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、二苯乙醇酸对酪氨酸酶活性的影响情况,研究表明保湿剂类化合物对酪氨酸酶没有抑制作用,防腐剂化合物对酪氨酸酶具有一定的抑制作用,苯甲醇和对羟基苯甲酸对酪氨酸酶的抑制均为可逆抑制,抑制类型为分别混合型和竞争型,果酸类化合物对酪氨酸酶抑制作用最强的为甘醇酸,甘醇酸对酪氨酸酶的抑制为混合型抑制,其它果酸类化合物对酪氨酸酶具有较弱的抑制作用。通过本课题的研究,为高效酪氨酸酶抑制剂的开发以及化妆品上的应用奠定了基础。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1.前言
• 1.1 黑色素的产生
• 1.1.1 黑色素与黑色素细胞
• 1.1.2 黑色素合成途径
• 1.1.3 黑色素的作用以及异常表达的影响
• 1.2 酪氨酸酶
• 1.2.1 酪氨酸酶概况
• 1.2.2 酪氨酸酶的结构
• 1.2.3 酪氨酸酶的催化机制
• 1.3 酪氨酸酶抑制剂的研究概况
• 1.3.1 芳香醛
• 1.3.2 芳香酸
• 1.3.3 羟基化合物
• 1.3.4 糖苷类化合物
• 1.3.5 杂环类化合物
• 1.3.6 天然活性产物
• 1.4 酪氨酸酶抑制剂在化妆品上的应用
• 1.5 本研究的内容与意义
• 2.实验试剂与仪器
• 2.1 试剂和仪器
• 2.2 仪器设备
• 3.实验方法
• 3.1 呋喃丙烯酸、2-氯苯丙烯酸、2,4-二氯苯丙烯酸、3,5二羟基苯丙烯酸的合成
• 3.2 乙酰水杨酸、乙酰对羟基苯甲酸的合成
• 3.3 效应物对酪氨酸酶抑制作用的测定
• 3.3.1 效应物对酪氨酸酶单酚酶活力的测定
• 3.3.2 效应物对酪氨酸酶二酚酶的抑制作用
• 3.3.3 效应物对酪氨酸酶二酚酶抑制机理
• 3.3.4 效应物对酪氨酸酶二酚酶抑制类型和抑制常数
• 4.实验结果
• 4.1 酪氨酸酶抑制剂的筛选以及相应的抑制机理
• 4.1.1 对羟基苯甲酸酯
• 4.1.1.1 对羟基苯甲酸酯对酪氨酸酶活力的影响
• 4.1.1.2 对羟基苯甲酸酯对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.2 水杨酸衍生物
• 4.1.2.1 水杨酸衍生物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.3 苯二胺
• 4.1.3.1 苯二胺对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.4 苯二甲酸
• 4.1.4.1 苯二甲酸对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.4.2 对苯二甲酸（D3）对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.4.3 对苯二甲酸（D3）对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.5 呋喃化合物
• 4.1.5.1 呋喃化合物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.5.2 呋喃化合物对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.5.3 呋喃化合物对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.6 苯乙醛、苯乙酸、苯乙酸
• 4.1.6.1 苯乙醛、苯乙酸、苯乙酸对二酚酶活力的影响
• 4.1.6.2 苯乙醛、苯乙酸、苯乙醇对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.6.3 苯乙醛、苯乙酸、苯乙醇对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.6.4 苯乙醛、苯乙酸、苯乙醇对酪氨酸酶单酚酶的作用
• 4.1.7 萘环化合物
• 4.1.7.1 萘环化合物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.7.2 萘环化合物对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.7.3 萘环化合物对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.7.4 萘酚对酪氨酸酶单酚酶的作用
• 4.1.8 脂肪酸化合物
• 4.1.8.1 脂肪酸化合物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.8.2 脂肪酸化合物对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.8.3 脂肪酸化合物对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.8.4 脂肪酸化合物对酪氨酸酶单酚酶的作用
• 4.1.9 肉桂酸衍生物
• 4.1.9.1 苯丙烯酸类化合物的化学合成
• 4.1.9.2 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.9.3 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.9.4 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.1.9.5 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶单酚酶的作用
• 4.1.10 乙酰化羟基酸
• 4.1.10.1 乙酰水杨酸（J1）、乙酰对羟基苯甲酸（J2）的化学合成
• 4.1.10.2 乙酰化羟基酸对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 4.1.10.3 乙酰化羟基酸对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.1.10.4 乙酰化羟基酸对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.2 化妆品中常见物质对酪氨酸酶的抑制作用
• 4.2.1 保湿剂
• 4.2.1.1 保湿剂类化合物对酪氨酸酶二酚酶活力的抑制作用
• 4.2.2 α-羟基酸
• 4.2.2.1 α-羟基酸对酪氨酸酶二酚酶活力的抑制作用
• 4.2.2.2 甘醇酸（L1）对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.2.2.3 甘醇酸（L1）对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 4.2.2.4 甘醇酸对酪氨酸酶单酚酶的作用
• 4.2.3 防腐刘
• 4.2.3.1 对羟基苯甲酸和苯甲醇对酪氨酸酶活力的抑制作用
• 4.2.3.2 对羟基苯甲酸和苯甲醇对酪氨酸酶抑制机理的判定
• 4.2.3.3 苯甲醇对酪氨酸酶抑制常数的测定
• 5.讨论
• 5.1 对羟基苯甲酸酯、水杨酸衍生物对酪氨酸酶抑制的作用
• 5.2 苯二胺对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 5.3 苯二甲酸对酪氨酸酶的影响
• 5.4 呋喃化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 5.5 苯乙醛、苯乙酸、苯乙酸对酪氨酸酶的抑制作用
• 5.6 萘环化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 5.7 脂肪酸化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 5.8 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶的抑制作用
• 5.9 化妆品中常见物质对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.结论
• 6.1 对羟基苯甲酸酯对酪氨酸酶抑制的作用
• 6.2 水杨酸衍生物对酪氨酸酶抑制的作用
• 6.3 苯二胺对酪氨酸酶二酚酶活力的影响
• 6.4 苯二甲酸对酪氨酸酶的影响
• 6.5 呋喃化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.6 苯乙醛、苯乙酸、苯乙酸对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.7 萘环化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.8 脂肪酸化合物对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.9 肉桂酸衍生物对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.10 乙酰化羟基酸对酪氨酸酶的抑制作用
• 6.11 化妆品中常见物质对酪氨酸酶的抑制作用
• 7.参考文献
• 已发表文章
• 致谢