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芍芪多苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用及部分机制

2020-12-07阅读(146)

芍芪多苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用及部分机制

论文摘要

目的:研究芍芪多苷（SQDG）对大鼠胶原性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）的继发性炎症和免疫反应的影响,并以单核巨噬细胞为实验对象,初步探讨其可能作用机制。方法:在建立鸡Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型基础上,通过足容积法检测大鼠继发侧（右后）足爪肿胀度（Δml）、关节炎评分和未致炎侧大鼠的足爪压痛观察和评价关节炎症的发生情况;观察胸腺指数、脾脏指数的变化; MTT法检测T、B淋巴细胞增殖反应;小鼠淋巴细胞增殖法检测腹腔巨噬细胞（perironeal macrophage,PMФ）白介素1（interleukin-1,IL-1）活性、脾细胞白介素2（interleukin-2,IL-2）活性;ELISA法检测血中抗Ⅱ型胶原抗体。通过Ficoll密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）;贴壁法分离PBMC中的单核巨噬细胞（monocyte/macrophage,Mo/Mφ）,吞噬中性红方法检测Mo/Mφ的吞噬功能;小鼠淋巴细胞增殖法检测Mo/MφIL-1活性;MTT法检测SQDG体外给予单核巨噬细胞后对T淋巴细胞增殖功能的影响。结果:1、SQDG能减轻CIA大鼠继发性关节炎症、调节机体的免疫功能,对大鼠CIA具有明显治疗作用大鼠免疫后d14出现足爪红肿,继发性炎症高峰期在d22,炎症在d26后开始减轻。SQDG（21.25、42.5、85mg.kg-1, d14～d28） ig给药能不同程度的减轻CIA大鼠的关节炎症,使增高的大鼠胸腺指数和脾脏指数降低;进一步研究表明,SQDG（21.25、42.5、85mg.kg-1, d14～d28） ig能使CIA大鼠升高的ConA诱导的T细胞增殖和LPS诱导的B细胞增殖反应下降;下调升高的脾细胞IL-2水平和升高的腹腔巨噬细胞IL-1水平;并使CIA大鼠血清中升高的抗CⅡ抗体下降。2、SQDG体内试验对正常大鼠和炎症不同时期CIA大鼠Mo/Mφ功能的影响在大鼠Mo/Mφ上的研究表明,SQDG（21.25、42.5、85mg.kg-1, d14～d28） ig能增强正常大鼠Mo/Mφ的吞噬功能;不同程度的抑制CIA大鼠过强的Mo/Mφ的吞噬功能,并使其分泌增高的IL-1水平降至正常范围内。3、SQDG体外试验对正常大鼠和炎症不同时期CIA大鼠Mo/Mφ功能的影响, SQDG作用后的Mo/Mφ对T淋巴细胞增殖功能的影响体外给予SQDG（10,20,40,80,160mg.L-1 d14～d28）使正常大鼠的Mo/Mφ的吞噬功能增强;对IL-1的产生无影响;SQDG作用后的Mo/Mφ对T淋巴细胞增殖功能无明显影响。d7体外给予SQDG可使CIA大鼠增强的Mo/Mφ的吞噬功能降低;分泌升高的IL-1水平降低; SQDG作用后的Mo/Mφ对T淋巴细胞增殖功能无明显影响;d15、d23体外给予SQDG可使CIA大鼠Mo/Mφ明显增强的吞噬功能降低;升高的IL-1水平降低; SQDG作用后的Mo/Mφ使增强的T淋巴细胞增殖反应降低。结论:1、SQDG对大鼠CIA有明显治疗作用;其作用与调节机体的免疫功能有关;2、SQDG可能通过调节单核巨噬细胞的功能,调节CIA大鼠异常的机体免疫功能

论文目录

  • 英文缩略词对照（Abbreviation）
  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 前言
  • 2 实验材料
  • 2.1 动物
  • 2.2 药物
  • 2.3 试剂
  • 2.4 仪器
  • 3 实验方法
  • 3.1 大鼠 CIA 模型的制备
  • 3.2 分组及给药
  • 3.3 关节肿胀度测定
  • 3.4 关节炎症评分
  • 3.5 关节疼痛值
  • 3.6 胸腺指数脾脏指数测定
  • 3.7 血清抗CⅡ抗体的检测
  • 3.8 T、B 淋巴细胞增殖反应检测
  • 3.9 PMφIL-1 的诱生与检测
  • 3.10 IL-2 的诱生与测定
  • 3.11 分离外周血单个核细胞
  • 3.12 Mo／Mφ的分离和培养
  • 3.13 吞噬中性红试验
  • 3.14 T 细胞的分离
  • 3.15 体外试验T 细胞增殖反应检测
  • 3.16 Mo/MφIL-1 的诱生与检测
  • 3.17 病理学检查
  • 3.18 统计学处理
  • 4 结果
  • 4.1 SQDG 对大鼠CIA 关节肿胀和疼痛的影响
  • 4.2 SQDG 对CIA 大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响
  • 4.3 SQDG 对CIA 大鼠血清抗Ⅱ型胶原抗体的影响
  • 4.4 SQDG 对ConA 诱导CIA 大鼠胸腺T 淋巴细胞和LPS 诱导B 淋巴细胞增殖反应的影响
  • 4.5 SQDG 对CIA 大鼠PMφ产生IL-1 和脾淋巴细胞产生IL-2 的影响
  • 4.6 SQDG 灌胃给药对正常大鼠和CIA 大鼠Mo/Mφ吞噬功能的影响
  • 4.7 SQDG 灌胃给药对正常大鼠和CIA 大鼠Mo/Mφ分泌IL-1 的影响
  • 4.8 SQDG 体外给予对正常大鼠Mo/Mφ吞噬功能和分泌功能的影响
  • 4.9 SQDG 体外给予正常大鼠Mo/Mφ，对T 淋巴细胞增殖功能的影响
  • 4.10 在炎症不同时期，SQDG 体外给予对CIA 大鼠Mo/Mφ 吞噬功能的影响
  • 4.11 在炎症不同时期，SQDG 体外给予CIA 大鼠Moo/Mφ 对 T 淋巴细胞增殖功能的影响
  • 4.12 在炎症不同时期，SQDG 体外给予对CIA 大鼠Mo/Mφ 产生 IL-1 的影响
  • 4.13 SQDG 对CIA 大鼠局部关节组织病理的影响
  • 5 讨论
  • 5.1 SQDG 对CIA 的影响及其免疫调节作用
  • 5.2 SQDG 对单核巨噬细胞功能的调节
  • 6 结论
  • 7 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 综述:类风湿关节炎病理机制的研究进展
  • 参考文献

    • 相关论文文献

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