降糖药物干预对2型糖尿病大鼠血浆Ghrelin、Visfatin水平及其在组织中表达的研究

论文摘要

目的:分析2型糖尿病大鼠血浆ghrelin、visfatin水平与体重、内脏脂肪含量、大鼠肥胖评定指数（Lee index）、血糖、血胰岛素、血脂、胰岛素敏感性的关系以及两因子之间的相关性,观察胰岛素、二甲双胍和吡格列酮干预治疗对2型糖尿病大鼠血浆中两因子水平及胃部ghrelin、内脏脂肪组织visfatin表达的影响,探讨ghrelin、visfatin与胰岛素敏感性的关系。方法:50只体重（180±20）克的6周龄雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（NC组,8只）和糖尿病组（42只）,正常对照组喂标准普通大鼠饲料,糖尿病组喂高糖高脂饲料。8周后,糖尿病组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）。48小时后,尾静脉检测血糖,血糖≥16.7mmol/L的37只大鼠为2型糖尿病大鼠模型。将37只模型大鼠随机分为糖尿病对照组（DC组,8只）、胰岛素治疗组（INS,5U/kg,9只）、二甲双胍治疗组（MET组,200mg/kg,10只）和吡格列酮治疗组（PIO组,20mg/kg,10只）,药物干预8周。其中8只大鼠在诱导后因酮症、感染等原因死亡被剔除。实验16周末,所有大鼠禁食12小时,测量体重、身长、内脏脂肪含量,计算肥胖评定指数。麻醉条件下取血,酶联免疫方法（EIA）测定空腹血浆ghrelin、visfatin浓度,并测定空腹血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇,计算胰岛素敏感指数。取大鼠胃及内脏脂肪,免疫组织化学方法观察ghrelin在胃部和visfatin在内脏脂肪中的表达,用灰度测量五组大鼠ghrelin、visfatin的表达并进行比较。结果:1糖尿病对照组大鼠血浆ghrelin水平及胃组织ghrelin表达均显著低于正常对照组（P均＜0.01）。胰岛素治疗后,血浆ghrelin水平及胃组织ghrelin表达较糖尿病对照组有升高趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;二甲双胍和吡格列酮治疗后,血浆ghrelin水平及胃组织ghrelin表达较糖尿病对照组升高均有统计学意义（P均＜0.01）,但仍低于正常对照组（P＜0.05或P＜0.01）。2糖尿病对照组大鼠血浆visfatin水平及内脏脂肪visfatin表达均明显高于正常对照组（P均＜0.01）。胰岛素治疗后,血浆visfatin水平及内脏脂肪visfatin表达与糖尿病对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;二甲双胍和吡格列酮治疗后,血浆visfatin水平及内脏脂肪visfatin表达较糖尿病对照组均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,但仍高于正常对照组（P＜0.01）。3 Pearson相关分析表明,糖尿病对照组大鼠血浆ghrelin与Lee index、内脏脂肪、空腹血糖及空腹胰岛素呈负相关（r=-0.673,P＜0.001;r=-0.415,P=0.004;r=-0.228,P=0.020;r=-0.427,P=0.004）,与ISI呈正相关（r=0.329,P=0.038）。胰岛素治疗组血浆ghrelin与各生化指标无相关性;二甲双胍治疗组血浆ghrelin与FINS呈负相关（r=-0.265,P=0.011）,与ISI呈正相关（r=0.563,P=0.034）;吡格列酮治疗组血浆ghrelin与FINS呈负相关（r=-0.625,P=0.042）,与ISI呈正相关（r=0.311,P=0.029）。4 Pearson相关分析表明,糖尿病对照组大鼠血浆visfatin与内脏脂肪含量和FBG呈正相关（r=0.722,P＜0.001;r=0.259,P=0.035）,与HDL-C呈负相关（r=-0.602,P=0.047）。胰岛素治疗后,血浆visfatin与内脏脂肪呈正相关（r=0.499,P=0.031）,与HDL-C呈负相关（r=-0.420,P=0.015）;二甲双胍治疗后,血浆visfatin与内脏脂肪和FBG呈正相关（r=0.417,P=0.017;r=0.329,P=0.022）,与HDL-C呈负相关（r=-0.113,P=0.039）;吡格列酮治疗后,血浆visfatin与内脏脂肪呈正相关（r=0.175,P=0.036）,与HDL-C呈负相关（r=-0.453,P=0.028）。5 Pearson相关分析表明,各组大鼠血浆ghrelin分别与其胃组织ghrelin呈正相关;各组大鼠血浆visfatin分别与其脂肪组织visfatin呈正相关。6 Pearson相关分析表明,各组大鼠血浆ghrelin与血浆visfatin之间均无统计学相关性。7多元回归分析发现,FINS和ISI是糖尿病对照组、二甲双胍和吡格列酮治疗组空腹血浆ghrelin的主要影响因素。内脏脂肪含量是各组大鼠空腹血浆visfatin水平的主要影响因素。结论:1 2型糖尿病大鼠血浆ghrelin水平和胃组织ghrelin表达较正常大鼠显著降低;血浆ghrelin水平与胰岛素敏感性呈正相关。胰岛素治疗不改变血浆ghrelin水平和胃组织ghrelin的表达;二甲双胍和吡格列酮干预治疗可使2型糖尿病大鼠血浆ghrelin水平和胃组织ghrelin表达升高,这种升高与血糖下降无关,考虑与二甲双胍和吡格列酮改善机体胰岛素抵抗有关。2 2型糖尿病大鼠血浆visfatin水平和内脏脂肪组织visfatin表达较正常大鼠显著升高;血浆visfatin水平与内脏脂肪含量呈正相关。胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠血浆visfatin水平和内脏脂肪组织visfatin表达无影响;二甲双胍和吡格列酮治疗能降低血浆visfatin水平和内脏脂肪组织visfatin的表达,考虑与二甲双胍和吡格列酮改善胰岛素抵抗,减少内脏脂肪含量有关。3 Ghrelin和visfatin均参与了机体的能量代谢,但两因子之间无相互调节作用,而是通过不同的作用途径实现对能量代谢的调节。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附录一 表格
• 附录二 作图
• 附录三 病理和免疫组化图片
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表