冬小麦苗期的抗旱性鉴定及抗旱离体筛选体系建立的研究

冬小麦苗期的抗旱性鉴定及抗旱离体筛选体系建立的研究

论文摘要

本课题以抗旱性不同的7个冬小麦品种和全国抗旱对照品种的成熟种胚为材料进行抗旱性研究。主要分三个实验进行:PEG干旱胁迫环境中以胚芽鞘长度为主要指标的抗旱性初步鉴定;用PEG模拟干旱环境处理小麦,通过测定三叶期抗旱性指标确定材料抗旱性;建立离体种胚培养体系,用PEG做胁迫剂,比较抗旱性不同品种离体培养的差异,为以抗旱性材料诱变、筛选、培养的生物技术育种和小麦转基因研究奠定基础。结果表明: 1.首次对观测的数据进行统计分析,得知本实验中的材料用20%PEG处理到第5d观测胚芽鞘长度最合适;胚芽鞘长度、发芽率、发芽势随着干旱胁迫剂浓度的升高呈下降趋势; 2.测定时期、某些指标适应的作物不同等原因造成不同指标反应的抗旱性结果不同;可溶性糖含量、叶绿素荧光强度、过氧化氢(物)酶活性、束缚水含量与生理生化指标分析得到的抗旱性结果较一致; 3.“胚芽鞘法”抗旱性结果为:7≥4>1>5≥6>2≥3,苗期生理生化指标的结果为:7>5≥6>4≥1>2≥3;差异在4号和5、6号的抗旱性强弱关系。 4.N6培养基较适合愈伤组织诱导、成苗;种胚以腹沟向下放置最好,胚插入效果最差,平均出愈率分别为70.6%、6.8%;灭菌前用紫外灯照射

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 第一章 材料与方法
  • 1.1 供试材料
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 胚芽鞘培养的实验方法
  • 1.2.1.1 材料处理与培养方法
  • 1.2.1.2 培养条件
  • 1.2.1.3 观测与统计方法
  • 1.2.2 小麦苗期抗旱性生理生化指标测试方法
  • 1.2.2.1 材料处理、培养以及统计方法
  • 1.2.2.2 小麦抗旱性鉴定的生理生化指标及测试方法
  • 1.2.3 小麦离体种胚培养体系建立的方法
  • 1.2.3.1 材料的灭菌处理及接种方法
  • 1.2.3.2 培养基
  • 1.2.3.3 培养条件
  • 1.2.3.4 结果观测与统计方法
  • 1.3 实验设计
  • 1.3.1 胚芽鞘培养的实验设计
  • 1.3.1.1 不同处理发芽率和发芽势变化的实验设计
  • 1.3.1.2 不同PEG浓度处理各品种胚芽鞘及解除胁迫后根长、芽长变化实验设计
  • 1.3.1.3 20%PEG处理各个品种到第5d的实验设计
  • 1.3.1.4 7个品种用20%PEG处理到第5d的聚类分析实验设计
  • 1.3.2 小麦苗期抗旱性生理生化指标测试的实验设计
  • 1.3.3 小麦离体种胚培养体系建立的实验设计
  • 1.3.3.1 小麦离体种胚培养体系灭菌处理的实验设计
  • 1.3.3.2 种胚接种放置方式筛选的实验设计
  • 1.3.3.3 种胚愈伤组织诱导的实验设计
  • 1.3.3.4 愈龄实验设计
  • 1.3.3.5 分化培养基筛选的实验设计
  • 1.3.3.6 苗增殖培养基中BA、MET浓度筛选的实验设计
  • 1.3.3.7 生根培养基中NAA和IBA浓度筛选的实验设计
  • 1.3.3.8 附加PEG干旱胁迫剂对培养效果影响的实验设计
  • 第二章 结果与分析
  • 2.1 胚芽鞘培养的实验结果
  • 2.1.1 不同PEG处理浓度对发芽率和发芽势影响的结果与分析
  • 2.1.2 不同浓度PEG处理各品种胚芽鞘生长的实验结果
  • 2.1.2.1 各品种胚芽鞘长度统计的结果与分析
  • 2.1.2.2 各品种胚芽鞘生长曲线的结果与分析
  • 2.1.2.3 不同PEG浓度和不同处理时间处理胚芽鞘的多重比较结果
  • 2.1.3 解除胁迫后不同PEG浓度处理各品种根长、芽长的结果与分析
  • 2.1.4 20%PEG处理的各品种几个指标的相对比值
  • 2.1.5 7个品种20%PEG处理第5d的聚类分析实验结果
  • 2.1.5.1 7个品种20%PEG处理第5d的聚类分析数据
  • 2.1.5.2 7个品种第5d用20%PEG处理的聚类分析结果
  • 2.2 小麦苗期抗旱性生理生化指标测试的实验结果
  • 2.2.1 小麦苗期抗旱性生理生化指标测试的结果
  • 2.2.1.1 水分指标测定的结果与分析
  • 2.2.1.2 叶绿素荧光强度测定的结果与分析
  • 2.2.1.3 光合作用强度及叶绿素含量测定的结果与分析
  • 2.2.1.4 几种生化指标测定的结果与分析
  • 2.2.2 生理生化指标测定的聚类分析结果
  • 2.3 离体种胚培养体系建立的实验结果
  • 2.3.1 冬小麦离体种胚灭菌处理筛选的实验结果
  • 2.3.1.1 品种6初步灭菌处理的结果与分析
  • 2.3.1.2 二次灭菌处理的结果与分析
  • 2.3.1.3 多菌灵灭菌实验的结果与分析
  • 2.3.1.4 利福平灭菌实验的结果与分析
  • 2.3.2 种胚接种放置方式筛选的结果与分析
  • 2.3.3 种胚愈伤组织诱导的实验结果
  • 2.3.3.1 种胚愈伤组织诱导基本培养基筛选的结果与分析
  • 2.3.3.2 愈伤组织诱导时激素筛选的结果与分析
  • 2.3.3.3 诱导培养基添加氨基酸附加物的实验结果
  • 2.3.3.4 诱导培养基碳源实验的结果与分析
  • 2.3.4 愈龄实验的结果
  • 2.3.4.1 不同诱导时间的愈龄实验结果与分析
  • 2.3.4.2 愈伤组织不同继代次数的愈龄实验结果与分析
  • 2.3.5 愈伤组织分化培养基筛选的实验结果
  • 2.3.5.1 分化基本培养基筛选的结果与分析
  • 2.3.5.2 分化培养基激素筛选的结果与分析
  • 2.3.6 苗增殖培养基筛选的实验结果
  • 2.3.6.1 苗增殖培养基中BA浓度的筛选结果
  • 2.3.6.2 苗增殖培养基中MET浓度的筛选结果
  • 2.3.7 生根培养基中激素浓度筛选的实验结果
  • 2.3.7.1 生根培养基中NAA浓度筛选的结果与分析
  • 2.3.7.2 生根培养基中IBA浓度筛选的结果与分析
  • 2.3.8 附加PEG干旱胁迫剂对种胚培养效果影响的实验结果
  • 2.3.8.1 从愈伤组织诱导开始附加干旱胁迫剂的结果与分析
  • 2.3.8.2 从分化开始附加干旱胁迫剂的结果与分析
  • 第三章 讨论
  • 3.1 胚芽鞘培养的实验结果讨论
  • 3.2 小麦苗期生理生化指标测定结果的讨论
  • 3.3 种胚灭菌结果的讨论
  • 3.4 愈伤组织诱导培养的结果与讨论
  • 3.5 愈伤组织分化培养的影响因素
  • 3.6 培养基中添加干旱胁迫剂对培养效果的影响及原因
  • 3.7 苗增殖、生根实验的结果与讨论
  • 3.8 建立比较完善的小麦种胚培养体系的必要性
  • 3.9 课题的创新之处
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文
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