论文摘要
目的：采用“免疫诱导加化学刺激复合法”建立大鼠溃疡性结肠炎模型；研究大鼠结肠粘膜上皮细胞、结肠组织淋巴细胞Fas、FasL、Bcl-2的异常表达和细胞因子网络失衡在溃疡性结肠炎发病中的作用；观察“溃结方”汤剂对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用，并通过观察其对细胞凋亡异常和细胞因子网络失衡的影响，探讨该药物可能的作用机制。方法：实验选用纯种wistar品系雄性大鼠36只，随机分为6组：空白组、模型组、阳性药对照组、低、中、高剂量“溃结方”汤剂组。采用“免疫诱导加化学刺激复合法”制造溃疡性结肠炎大鼠模型。造模后各组给予不同处理，阳性药对照组给予1.2％柳氮磺吡啶（SASP）混悬液灌胃，低、中、高剂量“溃结方”汤剂组分别给予12％，68％，124％的“溃结方”汤剂灌胃，共4d，灌胃量按2.5ml／100g体重，空白组与模型组给等量生理盐水。于造模后开始观察大鼠的粪便性状、体重变化、毛发状态、活动性等一般情况表现并评分。实验结束后取血浆、结肠组织标本，观察各组大鼠结肠组织病理学改变并评分，观察大鼠结肠组织粘膜上皮细胞、结肠组织淋巴细胞Fas、FasL、Bcl-2的表达情况并计算综合表达指数，检测大鼠血浆TNF-α水平、结肠组织Ⅰ1-10水平，比较各组间指标差异，并进行统计学分析。结果：与空白对照组比较，模型组大鼠造模后随即出现腹泻并持续存在，其中部分大鼠出现粘液、脓、血便，大鼠体重减轻，活动性降低，毛发杂乱无光泽，结肠组织出现典型的溃疡性结肠炎病理改变。“溃结方”汤剂组治疗后上述症状及病理改变可有不同程度的改善，以中、高剂量组的作用最明显，结果与阳性药（SASP）对照组相似并接近于空白组，低剂量组作用则不明显。模型组大鼠结肠粘膜上皮细胞Fas、FasL、Bel-2的表达均有升高，这种高表达不仅局限于粘膜表层，还出现在隐窝颈部甚至底部的上皮细胞；“溃结方”汤剂对模型大鼠结肠粘膜上皮细胞、淋巴细胞Fas、FasL、Bcl-2异常表达有明显的降低作用，以中、高剂量组的作用最明显，结果与阳性药（SASP）对照组相似并接近于空白组，低剂量组的作用则不明显。模型组大鼠结肠组织Ⅰ1-10水平降低，血浆TNF-α水平升高，“溃结方”汤剂可使UC大鼠结肠组织Ⅰ1-10的水平回升，血浆TNF-α水平回降，以中、高剂量组的作用最明显，结果与阳性药（SASP）对照组相似并接近于空白组，低剂量组的作用则不明显。结论：1．采用免疫诱导加化学刺激复合法成功建立了可以模拟人UC病理改变的大鼠UC模型，可以作为人UC的实验动物模型，用于UC的相关药理学研究。2．“溃结方”汤剂对溃疡性结肠炎模型大鼠有治疗作用，以中、高剂量效果最佳；3．“溃结方”汤剂治疗溃疡性结肠炎的作用机制与调整细胞进入正常的凋亡程序以及恢复细胞因子平衡有关。