论文摘要
新疆黑槌虫草（Cordyceps gracilis）是我国一种传统珍稀药用真菌,属子囊菌门（Ascmycotina）、肉座菌目（Hypocreales）、麦角菌科（Clavicipticeae）。新疆黑槌虫草具有提高免疫力、治疗血崩等功效,由于野生环境不断遭到破坏,药源锐减,因此采用发酵技术对新疆黑槌虫草菌种进行大规模的人工培养很有必要。本研究以人工分离培养的新疆黑槌虫草无性型为菌种,采用正交试验,以菌丝量为检测指标,通过摇瓶实验优化了发酵培养基,其组成为:葡萄糖20g/l,玉米粉30g/l,蛋白胨10g/l,豆饼粉20g/l, MgSO4·7H2O 0.02g/l,无水KH2PO4 0.4g/l。在10L全自动发酵罐上进行发酵过程主要影响因素优化,优化的发酵条件为:接种量为15%,发酵温度为26℃,pH6.7,转速为100 rpm,种龄为96h,发酵周期为144h,在上述发酵工艺条件下,黑槌虫草菌丝体产量最高可达3.5%（干重）,比优化前提高了50%。对发酵所获得的新疆黑槌虫草菌丝体进行有效成分分析,结果表明在上述发酵工艺条件下,新疆黑槌虫草菌丝体内主要活性成分的含量分别为虫草多糖含量11.93%,腺苷0.062%,虫草酸5.52%,氨基酸总量25.93%,微量元素Zn 60 ppm,Se 0.3 ppm及多种微量元素,将天然新疆黑槌虫草和冬虫夏草中相应成分进行比较,两者的主要成分基本一致。对发酵得到的新疆黑槌虫草菌丝体的急慢性毒性及药效学进行了初步研究,其急性毒性试验未测出口服的半数致死量,最大耐受量试验未见不良反应。慢性毒性试验表明对小鼠生长、造血系统无明显影响,组织学检查未见引起组织学改变。药效学试验表明有镇静作用,可提高机体的适应能力,增强机体非特异性免疫功能和体液免疫功能。
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摘要Abstract第一章 文献综述1.1 概述1.2 虫草主要化学成份1.2.1 虫草多糖1.2.2 虫草酸1.2.3 虫草素1.2.4 氨基酸1.2.5 微量元素1.2.6 麦角固醇1.3 虫草的药效学研究概况1.3.1 免疫作用1.3.2 对肾衰的治疗1.3.3 抗肿瘤作用1.3.4 抗氧化活性1.3.5 对心血管系统的影响1.3.6 其它作用1.4 虫草真菌人工培养研究概述1.4.1 固体栽培1.4.2 液体深层发酵1.5 课题立项依据第二章 新疆黑槌虫草的菌种鉴定2.1 菌种来源2.2 菌种鉴定方法2.2.1 新疆黑槌虫草有性型形态特征2.2.2 新疆黑槌虫草无性型形态特征2.2.3 液体培养形态2.2.4 回接试验2.3 结果与讨论2.3.1 新疆黑槌虫草有性型形态特征2.3.2 新疆黑槌虫草无性型形态特征2.3.3 液体发酵培养形态特征2.3.4 回接试验第三章 新疆黑槌虫草菌发酵工艺3.1 材料与方法3.1.1 菌株来源3.1.2 培养基3.1.3 培养条件3.1.4 收集菌丝体3.1.5 种龄的确定3.1.6 发酵终点的判断3.1.7 碳、氮源筛选3.1.8 C/N 最佳比试验3.1.9 发酵工艺优化3.2 结果与讨论3.2.1 种龄的确定3.2.2 发酵终点的确定3.2.3 碳、氮源筛选结果3.2.4 C/N 最佳比试验结果3.2.5 发酵工艺影响因素的优化3.2.6 优化工艺验证试验第四章 新疆黑槌虫草菌药效成份分析4.1 仪器与试剂4.1.1 主要仪器4.1.2 供试材料4.1.3 主要试剂4.2 试验方法4.2.1 多糖含量分析4.2.2 腺苷含量的测定方法4.2.3 D-甘露醇含量测定4.2.4 微量元素测定4.2.5 氨基酸含量分析与对比试验4.2.6 新疆黑槌虫草发酵菌丝体与其他虫草化学成分的比较4.3 结果与讨论4.3.1 多糖标准曲线4.3.2 多糖含量测定结果4.3.3 腺苷含量测定结果4.3.4 D-甘露醇含量测定结果4.3.5 微量元素含量测定结果4.3.6 氨基酸含量测定与比较结果4.3.7 新疆黑槌虫草发酵菌丝体与其他虫草化学成分的比较结果第五章 新疆黑槌虫草菌的急慢性毒性与药效学试验5.1 供试材料5.1.1 供试菌粉5.1.2 试验动物5.2 实验方法5.2.1 急性毒性试验5.2.2 最大耐受量试验5.2.3 慢性毒性试验5.2.4 对小鼠缺氧耐力的影响5.2.5 对小鼠运动能力的影响5.2.6 对小鼠的自发活动的影响5.2.7 对免疫功能的影响5.2.8 对非特异性免疫功能的影响5.3 结果与讨论5.3.1 急性毒性试验结果5.3.2 最大耐受量试验结果5.3.3 慢性毒性试验结果5.3.4 药效学试验结果第六章结论与展望一、研究结论二、展望参考文献致谢
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