基于电化学技术对泰山灵芝抗氧化性能评价的研究

论文摘要

灵芝具有多种有效成分和广泛的生物学作用,对人类神经系统、呼吸系统、内分泌及代谢系统、心血管系统均有一定功效,还能提高机体免疫力,保肝解毒、降血糖、抗肿瘤、抗衰老,在医学临床、保健食品、化妆品等领域得到了广泛的应用。电化学传感器和电化学DNA生物传感器由于具有灵敏度高、响应快、操作方便、无污染、价格低廉等特点,已广泛应用于食品工业、疾病诊断、药物分析、环境监测等领域,但利用电化学技术对灵芝抗氧化活性评价的研究却很少。为了深入研究和开发泰山赤灵芝资源,本文采用电化学技术,对泰山赤灵芝抗氧化活性进行了研究,所得结果可为泰山赤灵芝高附加值产品的研究奠定相关理论和应用基础。现将主要研究结果归纳如下:(1)用电化学沉积法制备了稀土铁氰化钆薄膜修饰玻碳电极,考察了GaHCF/GCE电极对鸟嘌呤的电催化氧化作用。根据Fenton反应产生的羟基自由基对鸟嘌呤的氧化作用和修饰电极对鸟嘌呤的氧化作用的竞争反应,评价了抗坏血酸清除羟基自由基的能力,实验结果表明,在0 ~ 2.5 mmol/L浓度范围内,Vc对·OH都有很好的清除效果,此方法可以很好的评价抗氧化剂的抗氧化能力。(2)利用电化学沉积法制备了稀土铁氰化铽薄膜修饰玻碳电极,以此修饰电极对不同溶剂泰山赤灵芝提取物的抗氧化活性进行了评价。实验结果表明,无论是灵芝的水提取物、醇提取物还是氯仿提取物,对?OH都有很好的量效关系,比较可知,泰山赤灵芝95%醇提取物抗氧化能力最高,水提取物次之,氯仿提取物的清除能力最弱。经计算,95%乙醇提取物的IC50为0.396 mg/mL、水提取物为0.443 mg/mL、氯仿提取物为0.507 mg/mL。(3)利用CoHCF静电组装G4 PAMAM修饰电极固定dsDNA,制备了一种新型的DNA电化学生物传感器。并用循环伏安法和交流阻抗法对制备的DNA传感器进行表征,表明dsDNA能较好地固定在电极表面。以此DNA生物传感器评价了不同来源的灵芝醇提取物清除羟基自由基的能力。结果表明,泰山赤灵芝具有很好的抗氧化性能,与其它来源的灵芝提取物没有显著性差异。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 自由基与疾病
• 1.1.1 自由基的来源
• 1.1.2 自由基对机体的影响
• 1.1.3 自由基的生理活性
• 1.2 自由基的清除及天然抗氧化剂
• 1.2.1 自由基的清除及防御措施
• 1.2.2 抗氧化作用的生物学意义
• 1.2.3 天然抗氧化剂研究与开发
• 1.3 抗氧化剂抗氧化活性的评价及清除各类活性氧、自由基能力的检测方法
• 1.3.1 评价或表征抗氧化活性的方法与参数
• 1.3.2 测定抗氧化活性的方法
• 1.4 灵芝多糖及其抗氧化活性
• 1.5 本课题选题依据及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 铁氰化钆修饰电极对鸟嘌呤氧化性能的研究
• 2.2.2 铁氰化铽修饰电极的制备及对泰山赤灵芝不同提取物清除·OH 活性评价的研究
• 2.2.3 基于DNA 传感器对灵芝提取物抗氧化性能评价的研究
• 3 结果与分析
• 3.1 铁氰化钆修饰电极对鸟嘌呤氧化性能的研究
• 3.1.1 铁氰化钆修饰电极的制备及表征
• 3.1.2 GdHCF/GCE 修饰电极对鸟嘌呤的氧化
• 3.1.3 GdHCF/GCE 修饰电极对Vc 清除·OH 的评价
• 3.1.4 Fenton 反应条件的选择和Vc 清除·OH 的量效关系
• 3.2 铁氰化铽修饰电极的制备及对泰山赤灵芝不同提取物清除·OH 活性评价的研究
• 3.2.1 铁氰化铽修饰电极的制备及表征
• 3.2.2 铁氰化铽修饰电极对鸟嘌呤的氧化
• 3.2.3 TbHCF/GCE 电极对灵芝提取物清除·OH 的评价
• 3.2.4 Fenton 反应条件的选择和不同灵芝提取液清除·OH 的关系
• 3.3 基于 DNA 传感器对灵芝提取物抗氧化性能评价的研究
• 3.3.1 CoHCF 修饰玻碳电极的制备
• 3.3.2 DNA 在PAMAM /CoHCF/GCE 上固定的电化学表征
• 3.3.3 CoHCF/PAMAM/CME 对DNA 的电催化氧化性能
• 3.3.4 灵芝提取物对Fenton 反应的抑制作用
• 3.3.5 灵芝提取物清除羟基自由基的量效关系
• 3.3.6 不同来源灵芝提取物清除羟基自由基的比较
• 4 讨论
• 4.1 稀土鉄氰化物电沉积机理
• 4.2 稀土鉄氰化物修饰电极和 DNA 传感器对抗氧化剂清除·OH 的评价
• 4.3 灵芝不同溶剂提取物抗氧化活性的比较
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况