人部分组织中neuritin表达检测及其过表达对细胞凋亡的影响

人部分组织中neuritin表达检测及其过表达对细胞凋亡的影响

论文摘要

目的:(1)检测部分肿瘤及相应正常组织中neuritin的表达情况;(2)观察neuritin过表达对细胞生物学特性的影响,探讨neuritin与肿瘤发生发展的相关性。方法:(1)运用免疫组织化学技术分别检测5例肺癌、食管癌、子宫内膜癌、宫颈癌及相应正常组织中neuritin蛋白的表达情况。初步筛选出neuritin蛋白表达有差异的组织后,扩大其样本量利用免疫组化技术核实neuritin在肿瘤组织与正常组织的表达差异,并通过RT-PCR在新鲜组织中进一步验证免疫组织化学检测的结果。(2)利用稳定表达neuritin的BMSCs细胞,通过β-半乳糖苷酶检测观察neuritin对细胞衰老的影响; Annexin V-PI染色后,经通过流式细胞仪观察neuritin对细胞凋亡的影响。结果:(1)在上述组织中,免疫组化初步筛选结果显示,与相应正常组织相比,neuritin蛋白在子宫内膜癌、宫颈癌、食管癌组织中高表达;尤以肺癌与正常肺组织neuritin蛋白表达差异明显;进一步扩大肺癌及正常肺组织样本量,免疫组织化学结果显示,肺癌组织中neuritin蛋白表达高于正常肺组织,差异有统计学意义(p<0.01)。RT-PCR结果显示,neuritin基因在肺癌组织有较高表达,而在正常肺组织中未检测到neuritin基因的表达。(2)β-半乳糖苷酶检测结果显示,neuritin稳定过表达的骨髓间充质干细胞(BMSc-neu)阳性染色率(19.33±1.53%)低于阴性对照组(BMSc-3.1)阳性染色率(47.67±3.05%),差异有统计学意义(t=12.14,p<0.05);(3)Annexin V-PI染色结果显示;neuritin稳定过表达的骨髓间充质干细胞(BMSc-neu)早期凋亡率(25.11±1.17%)低于阴性对照组(BMSc-3.1)早期凋亡率(38.10±1.28%),差异有统计学意义(t =9.22,p<0.05)。结论:(1)neuritin在部分肿瘤组织的表达高于其相应的正常组织;(2)neuritin过表达能够延缓BMSCs细胞的衰老;(3)neuritin过表达能抑制BMSCs细胞凋亡。以上研究结果提示:neuritin作为抑制细胞凋亡的蛋白因子,可能与肿瘤的发生发展相关。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略词表
  • 前言
  • 技术路线图
  • 材料与方法
  • 1 材料
  • 1.1 免疫组织化学和 RT-PCR 实验所用标本
  • 1.2 细胞
  • 1.3 主要试剂及溶液配制方案
  • 1.4 主要仪器设备
  • 2 方法
  • 2.1 免疫组织化学染色方法
  • 2.2 RT-PCR 方法
  • 2.3 细胞培养方法
  • 2.4 细胞中β-半乳糖苷酶检测
  • 2.5 细胞凋亡模型的制备
  • 2.6 细胞早期凋亡的检测
  • 2.7 数据处理
  • 结果
  • 1 人部分组织中 Neuritin 表达检测
  • 1.1 Neuritin 蛋白在部分肿瘤组织及相应正常组织中表达的初步筛选
  • 1.2 Neuritin 蛋白在肺癌及正常肺组织中的表达检测
  • 2 细胞中β-半乳糖苷酶活性检测
  • 3 利用 HU 诱导BMSCs 细胞凋亡的结果
  • 3.1 HU 诱导 BMSCs 细胞凋亡前、后的形态观察
  • 3.2 流式细胞仪检测结果
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 文献综述
  • 作者简介
  • 致谢
  • 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表
  • 相关论文文献

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