乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群体外实验研究

论文摘要

1．乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群初步研究目的检测不同乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群含量，并探讨使乳腺癌细胞系MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群富集的方法。方法利用流式细胞仪检测三种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-4 35s中SP细胞（side population cell）比例及CD44+CD24-／low细胞比例。用Percoll不连续密度梯度法分离MCF-7细胞亚群，通过流式细胞仪筛选出SP细胞富集的亚群；用添加生长因子的无血清培养液来培养MCF-7，不同时间点检测CD44+CD24-／low细胞比例。结果MCF-7、MDA-MB-435s中SP细胞比例分别为3.61％和2.72％，MDA-MB-231中未检测到SP细胞。三种乳腺癌细胞系中CD44+CD24-／low细胞比例分别为0.87％、0.59％和94.04％。MCF-7经Percoll分选得到五个亚群，各亚群在SP细胞含量、细胞周期、生长曲线及克隆形成率等方面均存在异质性，D亚群SP细胞富集，比例高达25.23％；MCF-7在无血清培养液中，肿瘤干细胞呈悬浮的干细胞球样生长，CD44+CD24-／low细胞比例随着无血清培养时间的增加而增加，三周时达29.35％。结论SP检测与CD44+CD24-／low细胞检测是目前乳腺癌干细胞检测的两种常用方法，但两者用于同一种乳腺癌细胞系中的检测结果并不一致，均有一定的局限性。乳腺癌细胞系MCF-7具有异质性特征，通过Percoll分选或无血清培养均能使MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群(SP细胞或CD44+CD24-／low细胞)富集。2．雌激素对MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群影响的实验研究目的探讨雌二醇（E2）及拮抗剂三苯氧胺（TAM）对ER阳性乳腺癌细胞系MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群(CD44+CD24-／low细胞)的影响。方法E2组设10-7、10-8及10-9mol／L三个浓度，E2+TAM组再加入10-6mol／L TAM，对照组加等量药物溶剂（乙醇），培养10天和20天时分别用流式细胞仪检测各组中CD44+CD24-／low细胞比例。结果培养10天时，三个不同浓度E2组中CD44+CD24-／low细胞比例分别为（2.28±0.38）％、（6.35±0.57）％和（2.86±0.29）％，与对照组中（0.83±0.03）％相比比例均增高（P＜0.05）。E2+TAM组中CD44+CD24-／low细胞比例分别为（1.85±0.19）％、（4.11±0.41）％和（1.73±0.33）％，与相同浓度E2组中相比比例均下降（P＜0.05）。培养20天时，E2组中CD44+CD24-／lwo细胞比例分别为（2.41±0.25）％、（6.18±0.41）％和（2.47±0.15）％，E2+TAM组中比例分别为（1.93±0.21）％、（4.26±0.39）％和（1.34±0.23）％，E2+TAM组中CD44+CD24-／low细胞比例与相同浓度E2组中相比均下降（P＜0.05）。结论不同浓度E2作用下，MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群含量增加，而在相同浓度的E2作用下，添加抗雌激素药物TAM能够使MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群含量降低。

论文目录

• 目录
• 中英文缩略语
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群初步研究
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 雌激素对MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群影响的实验研究
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 小结
• 附录
• 致谢
• 综述