红景天苷对缺血再灌注大鼠脑损伤和LPS致PC12细胞损伤的保护作用的研究

论文摘要

缺血再灌注后脑损伤的机制之一为过度的炎症反应,后者不仅影响局部的血液供应,而且可以直接破坏组织结构,因此近些年来备受关注。红景天为景天科（Crassulaceae）红景天属（Rhodiola L.）植物,抗缺氧、延缓机体衰老、防治老年疾病等功效,因而越来越受到人们的广泛重视。红景天苷是红景天的主要效成分,文献报道红景天苷对脑缺血损伤有明显的保护作用,具有抗自由基、抗凋亡、降低兴奋性氨基酸对脑组织的损伤等功效,但对脑缺血再灌注后炎症反应影响及其可能的机制的研究尚不多。本实验采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致PC12细胞损伤模型,研究红景天苷对缺血再灌注后大鼠脑组织白细胞浸润和炎症因子的影响及对LPS损伤的PC12细胞存活率的影响,从整体水平及细胞水平上探讨红景天苷对神经细胞的保护作用。第一部分目的研究红景天苷对缺血再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用,并探讨红景天苷对缺血再灌注后的炎症反应及炎症因子TNF-α表达的影响。方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注（MCAO-I/R）模型,在缺血和再灌注即刻给予红景天苷5mg·kg-1进行保护。脑缺血1.5h再灌注24h后用Zea-Longa标准进行神经功能评分;TTC染色法测定大鼠脑梗死面积;用南京建成生物工程研究所的试剂盒检测大鼠脑组织内髓过氧化物酶（MPO）的活性;用western blot法测大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。结果与假手术组相比,脑缺血1.5h再灌注24h后大鼠神经功能损伤明显（P＜0.01）;脑组织含水量较假手术组明显增加（P＜0.01）;脑内中性粒细胞浸润（以MPO活性表示）和TNF-α的表达量增加明显（P＜0.01）。与模型组相比,红景天苷给药组MCAO-I/R大鼠脑梗死面积明显减小（P＜0.05）、脑神经功能损伤减轻（P＜0.05）、MPO活性（P＜0.01）和TNF-α表达水平降低（P＜0.05）。结论红景天苷可以通过减少白细胞浸润、降低炎症因子的表达从而减轻缺血再灌注脑组织的损伤。第二部分目的观察红景天苷对脂多糖致PC12细胞损伤的保护作用。方法将PC12细胞随机分为六祖:空白组、对照组、模型组(0.005～5μg·mL-1)、红景天苷治疗组(终浓度分别为0.6,6mg·L-1)。空白组只给予培养基、而不含有细胞;模型组细胞用不同浓度的LPS处理18h;治疗组先加入LPS(5μg·mL-1)处理18h后予红景天苷(终浓度分别为0.6,6mg·L-1)作用24h,然后用MTT法检测各组细胞的存活率。结果加入浓度为0.005、0.05、0.5和5μg·mL-1的LPS后,细胞存活率较对照组（100%）明显减低（P＜0.01）,分别为71.81%±4%、63.41%±6%、49.28%±4%和4.84%±5%;而先予LPS 0.5μg·mL-1处理再分别加入两个浓度的红景天苷,发现小剂量组(0.6mg·L-1)细胞的存活率较模型组提高（P＜0.05）,大剂量组(6mg·L-1)细胞存活率较模型组显著提高（P＜0.01）,两个剂量组间差异明显（P＜0.01）结论红景天能抑制脂多糖导致的神经细胞死亡,且红景天苷浓度越高保护作用越明显。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 红景天苷对缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 附表
• 第二部分 红景天苷对脂多糖致PC12细胞损伤的保护作用
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 附表
• 全文结论
• 参考文献
• 硕士学位在读期间发表的论文及获奖情况
• 致谢
• 综述
• 参考文献