基于抗氧化效果的银杏叶活性成分提取工艺优化及其抗氧化活性的评价

论文摘要

抗衰老生物学与自由基生物学成为现代生命科学的研究热点,评价和筛选具有强抗氧化活性的天然资源已成为生物学、医学和食品科学研究的新趋势。本论文采用微波、超声辅助提取方法,以清除DPPH自由基的IC50值为活性跟踪指标,优化了银杏叶抗氧化活性物质的提取工艺。对两种方法的银杏叶提取物进行了溶剂萃取和大孔吸附树脂分离,并对相应的分离产物进行了DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性评价。同时,对上述分离产物与叔丁基对苯二酚（TBHQ）、抗坏血酸（Vc）的协同抗氧化效果进行了研究。主要研究结果如下：1.创新性地以清除DPPH自由基的IC50值为跟踪指标,采用微波辅助法和超声辅助法进行了银杏叶抗氧化活性物质的提取。两种提取方法的优化工艺下,银杏叶提取物清除DPPH自由基的IC50值分别为1.29μg/mL和1.04μg/mL,均表现出了较强的抗氧化能力。2.用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对微波和超声法的银杏叶提取物进行溶剂梯度萃取分离。各萃取分离产物对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除效果如下：微波提取-溶剂萃取和超声提取-溶剂萃取各分离产物清除DPPH自由基的能力次序相同。超声提取物的乙酸乙酯萃余物清除DPPH自由基的效果最好,其IC50值达1.23μg/mL。微波提取-溶剂萃取和超声提取-溶剂萃取各分离产物清除羟基自由基的能力次序相同。两种方法提取物的乙酸乙酯萃余物清除自由基的能力最强且效果相当,IC50值分别为5.42μg/mL和5.47μg/mL。微波提取-溶剂萃取和超声提取-溶剂萃取各分离产物清除超氧阴离子自由基的效果整体较佳,其中微波法提取物的石油醚萃余物清除能力最强,IC50值达1.08μg/mL。3.采用AB-8树脂对银杏叶提取物进行分离,采用不同浓度的乙醇溶液梯度洗脱。微波提取-大孔树脂吸附和超声提取-大孔树脂吸附各分离产物对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除效果如下：微波提取-大孔树脂吸附和超声提取-大孔树脂吸附各分离产物清除DPPH自由基的能力次序相同：30%洗脱液>50%洗脱液>10%洗脱液>80%洗脱液。微波提取-大孔树脂吸附和超声提取-大孔树脂吸附各分离产物清除羟基自由基的能力次序相同：80%洗脱液>30%洗脱液>50%洗脱液>10%洗脱液。微波提取-大孔树脂吸附和超声提取-大孔树脂吸附各分离产物清除超氧阴离子自由基的能力次序相同：10%洗脱液>50%洗脱液>30%洗脱液>80%洗脱液。4.银杏叶提取物的各分离产物与TBHQ、BHT、Vc及VE的抗氧化活性比较研究结果。银杏叶微波和超声提取-溶剂萃取各分离产物中,两种方法提取物的乙酸乙酯萃余物清除DPPH自由基的能力最强,且均优于TBHQ,IC50值分别为1.44μg/mL和1.23μg/mL,。银杏叶微波和超声提取-大孔吸附树脂各分离产物中,超声法的30%洗脱液的清除DPPH自由基的能力最强,IC50值为1.47μg/mL,抗氧化能力强于TBHQ。5.银杏叶微波和超声提取-溶剂萃取各分离产物中,乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物与TBHQ、Vc的协同抗氧化效果较明显。银杏叶微波和超声提取-大孔树脂吸附各分离产物中,10%洗脱液、50%洗脱液、80%洗脱液与TBHQ、Vc的复配溶液对DPPH自由基的清除率均比单独使用时高,表现出了较好的协同抗氧化效果。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 银杏及其资源概述
• 1.2 银杏叶中化学成分
• 1.2.1 黄酮类化合物
• 1.2.2 萜内酯类化合物
• 1.2.3 银杏萜醇类化合物
• 1.2.4 酚酸、烷基酚及烷基酚酸类
• 1.2.5 银杏有机酸类化合物
• 1.2.6 银杏多糖
• 1.2.7 其他化学成分
• 1.3 银杏叶活性成分的功能
• 1.3.1 抗氧化,清除自由基
• 1.3.2 改善心脑血液循环
• 1.3.3 抗衰老,调节机体免疫力
• 1.3.4 抗菌消炎,抗病毒
• 1.3.5 抗肿瘤、抗过敏
• 1.3.6 对消化系统的作用
• 1.3.7 雌激素活性
• 1.3.8 其它作用
• 1.4 自由基
• 1.4.1 自由基的概念
• 1.4.2 自由基的产生
• 1.4.3 自由基对机体生命活动的影响
• 1.4.4 自由基的检测方法
• 1.5 抗氧化剂及其协同作用
• 1.5.1 内源性自由基清除剂
• 1.5.2 外源性自由基清除剂
• 1.5.3 抗氧化剂的协同作用
• 1.6 天然抗氧化剂的研究进展
• 1.6.1 天然抗氧化剂的提取分离
• 1.6.2 天然抗氧化剂的种类
• 1.6.3 天然抗氧化剂功能评价方法
• 1.6.4 天然抗氧化剂的应用
• 1.7 本课题的研究目的、意义及主要研究内容
• 1.7.1 本课题的研究目的与意义
• 1.7.2 本课题的研究内容
• 1.7.3 本课题研究的创新点
• 第二章 基于抗氧化效果的银杏叶提取工艺的优化研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 主要实验材料和仪器
• 2.1.2 银杏叶总黄酮的测定方法
• 2.1.3 DPPH自由基清除能力的测定方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 银杏叶微波提取物清除DPPH自由基的工艺研究
• 2.2.2 银杏叶超声提取物清除DPPH自由基的工艺研究
• 2.2.3 两种工艺结果的比较
• 2.3 小结
• 第三章 银杏叶提取物的溶剂萃取分离及其抗氧化活性研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 主要实验材料和仪器
• 3.1.2 实验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 银杏叶微波提取-溶剂萃取分离产物抗氧化活性
• 3.2.2 银杏叶超声提取-溶剂萃取分离产物抗氧化活性
• 3.3 小结
• 第四章 银杏叶提取物的树脂分离及其抗氧化活性研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 主要实验材料
• 4.1.2 实验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 银杏叶微波提取-树脂分离产物抗氧化活性
• 4.2.2 银杏叶超声提取-树脂分离产物抗氧化活性
• 4.3 小结
• 第五章 银杏叶提取物的分离产物协同抗氧化研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 实验材料及仪器
• 5.1.2 实验方法
• 5.2 结果与分析
• C及V_E的抗氧化活性比较'>5.2.1 银杏叶提取物的分离产物与TBHQ、BHT、V_C及V_E的抗氧化活性比较
• 5.2.2 银杏叶提取物的分离产物与TBHQ、VC的协同抗氧化活性
• 5.3 小结
• 第六章 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间的主要学术成果
• 致谢