论文摘要
第一部分EZH2和E-cadherin在肾细胞癌中的相关性及预后分析研究目的：检测肾细胞癌组织中EZH2和E-cadherin基因的表达,探讨其与肾癌临床病理特征间的关系和相关性,分析二者表达状况对肾癌预后的影响。方法：应用RT-PCR法和蛋白免疫印迹Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白在肾细胞癌组织中的表达情况,采用免疫组化法检测EZH2和E-cadherin蛋白在肾癌组织中的表达,分析EZH2和E-cadherin表达与肾癌临床病理特征间的关系及其二者表达间的相关性；同时应用Kaplan-Meier单因素和Cox比例风险模型多因素分析EZH2和E-cadherin表达状况与肾癌术后无瘤生存的关系。结果：EZH2 mRNA和蛋白在正常肾组织中均极低水平表达,其阳性表达率为16.67%,而在肾癌组织中表达水平明显升高,其阳性表达率为78.12%,同时EZH2蛋白阳性表达率随着肾细胞癌临床分期和病理分级的升高而明显增加,并且肾癌淋巴转移组EZH2蛋白阳性表达率明显高于肾癌无淋巴结转移组,其差异均具有统计学意义（P<0.05）。E-cadherin蛋白在正常肾组织中阳性表达率为75.0%,而在肾癌组织中阳性表达率为26.56%,同时E-cadherin蛋白阳性表达率随着肾细胞癌临床分期和病理分级的升高而呈明显降低趋势,并且肾癌淋巴转移组E-cadherin蛋白表达水平明显低于肾癌无淋巴结转移组,其表达差异均具有统计学意义（P<0.05）。肾癌组织中EZH2蛋白的表达与E-cadherin蛋白的表达呈负相关。生存分析结果显示,EZH2蛋白阳性表达的患者术后平均无瘤生存时间明显较短,且无瘤生存率较低；而E-cadherin蛋白阳性表达的患者术后平均无瘤生存时间明显较长,且无瘤生存率更高；单因素分析表明EZH2和E-cadherin表达为影响肾癌预后的相关因素,但多因素分析发现EZH2和E-cadherin并非肾癌预后的独立影响因素。结论：EZH2和E-cadherin异常表达与肾癌发生和临床进展关系密切；EZH2和E-cadherin是影响肾癌预后的相关因素,但并非肾癌预后的独立影响因素,因此,尚需进一步研究鉴定EZH2和E-cadherin作为肾癌预后风险因子的确切价值。第二部分RNA干扰沉默EZH2基因表达对肾癌细胞增殖和凋亡的影响目的：检测EZH2 mRNA和蛋白在肾癌细胞系786-0和ACHN中的表达,并研究RNA干扰靶向沉默EZH2基因表达对ACHN肾癌细胞株增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法：应用RT-PCR法和蛋白免疫印迹Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白在人正常近端肾小管上皮细胞株HK-2和肾癌细胞株786-0和ACHN中的表达情况。脂质体法介导化学合成的EZH2 siRNA瞬时转染ACHN细胞株,Western blot法检测转染后ACHN细胞EZH2基因表达的沉默效果,CCK-8法检测转染后ACHN细胞增殖率,流式细胞术检测转染后ACHN细胞周期和凋亡情况。结果：人正常近端肾小管上皮细胞HK-2中EZH2mRNA的表达量极低,而肾癌细胞株786-0和ACHN中EZH2mRNA的表达水平明显升高,与进一步的蛋白免疫印迹检测结果相一致。RNAi靶向干扰EZH2基因可成功地敲减ACHN细胞EZH2蛋白的表达。CCK-8法检测结果显示：siEZH2实验组ACHN细胞生长明显受抑制,在转染后48h和72h细胞增殖受抑制效应最显著（P<0.05）。流式细胞术检测结果显示：siEZH2转染组ACHN细胞周期中G1期细胞比例呈增加趋势,而S期和G2期细胞比例呈减少趋势,其中在转染后48h G1期ACHN细胞比例显著增加,而S期和G2期细胞比例明显下降;进一步的凋亡检测结果显示：siEZH2转染组ACHN细胞凋亡率随转染后时间的延长而呈增加趋势,在转染后48h和72h细胞凋亡率增加最显著（P<0.05）。结果表明沉默EZH2基因表达可靶向肾癌ACHN细胞周期中G1/S限制点而阻滞细胞周期进展,同时可有效抑制肾癌细胞增殖和促进细胞凋亡。结论：EZH2基因沉默能有效抑制肾癌ACHN细胞增殖,使细胞发生G1/S期阻滞,并可促进肾癌细胞的凋亡,因此靶向EZH2沉默其表达有望成为肾癌基因治疗的新策略。
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- [1].根皮素通过调节EZH2表达抑制肺癌细胞增殖并诱导凋亡的机制研究[J]. 中药材 2019(05)
- [2].EZH2与乳腺癌及其抑制剂研究[J]. 医学信息 2020(04)
- [3].宫颈鳞癌中EZH2的表达与自噬的关系及其预后价值[J]. 徐州医科大学学报 2020(01)
- [4].EZH2及其相关miRNA在乳腺癌中的研究进展[J]. 中国当代医药 2020(20)
- [5].EZH2对鼻咽癌血管生成拟态的影响及机制[J]. 西南国防医药 2020(06)
- [6].以生物信息学为基础的EZH2及Ki-67在肌层浸润性膀胱癌中的相关性病理分析[J]. 临床泌尿外科杂志 2020(10)
- [7].乳腺浸润性导管癌中PTEN、EZH2和VEGF的表达及意义[J]. 临床与实验病理学杂志 2020(09)
- [8].肿瘤相关巨噬细胞对肝癌EZH2表达的影响[J]. 解剖学研究 2016(05)
- [9].EZH2在泌尿系统肿瘤中的研究进展[J]. 华夏医学 2016(05)
- [10].EZH2基因与慢性髓细胞白血病的相关性分析[J]. 医药论坛杂志 2016(12)
- [11].肺腺癌EZH2蛋白的表达及其与表皮生长因子受体突变的关系[J]. 武警医学 2017(06)
- [12].EZH2和EGFR在乳腺癌中的表达及其相关性分析[J]. 湖北民族学院学报(医学版) 2017(03)
- [13].靶向Ezh2的肿瘤干细胞治疗策略[J]. 生命科学 2016(08)
- [14].宫颈鳞状细胞癌中EZH2和MMP-9的表达及其临床意义[J]. 中国妇幼保健 2014(34)
- [15].EZH2在前列腺癌发生发展中作用的研究进展[J]. 现代泌尿外科杂志 2013(06)
- [16].EZH2在非小细胞肺癌发生发展中的作用[J]. 现代肿瘤医学 2013(12)
- [17].EZH2在乳腺癌中的差异表达及临床意义[J]. 现代肿瘤医学 2020(23)
- [18].中国尤文肉瘤患者EZH2蛋白表达与临床病理学参数及预后的关系[J]. 山东大学学报(医学版) 2017(02)
- [19].乳腺癌中EZH2与miRNA调控关系的研究进展[J]. 安徽医学 2015(08)
- [20].EZH2与神经胶质瘤的现况研究[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2013(24)
- [21].急性髓细胞白血病患者EZH2表达及其与髓外浸润关系的研究[J]. 实用医学杂志 2014(10)
- [22].EZH2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 内蒙古医科大学学报 2013(01)
- [23].EZH2蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义[J]. 现代医院 2013(07)
- [24].胆管细胞癌中EZH2蛋白的表达及统计学分析[J]. 数理医药学杂志 2012(02)
- [25].EZH2和PTEN蛋白表达与卵巢浆液性囊腺癌的相关性研究[J]. 重庆医学 2012(27)
- [26].EZH2和CTGF在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义[J]. 山东大学学报(医学版) 2011(03)
- [27].EZH2和PTEN蛋白联合检测与肾透明细胞癌的相关性研究[J]. 山西医科大学学报 2009(03)
- [28].EZH2基因在肾透明细胞癌中的表达及其意义[J]. 西安交通大学学报(医学版) 2009(02)
- [29].EZH2在慢性髓细胞性白血病大鼠中调控机制分析[J]. 中国现代医生 2019(31)
- [30].EZH2小分子抑制药抗消化道肿瘤的研究进展[J]. 中国药师 2020(08)