论文摘要
目的 本研究旨在利用PGE-1载体在细胞内产生短发夹状RNA（short hairpin RNA,shRNA）来诱导RNA干扰（RNA interference,RNAi）,为基因功能分析提供新的实验手段。重组构建抑制多药耐药MDR1基因表达的shRNA真核表达载体系统,转染肝癌耐药细胞株SMMC-7721/ADM,BEL-7402/AMD,研究其对肝癌耐药细胞MDR1基因的逆转作用,以及对P-糖蛋白（P-gp）表达和功能的抑制作用。 方法 1.根据MDR1基因序列,按照shRNA的设计原则,设计两段21个碱基的MDR1特异性靶序列作为shRNA目标序列（sh-MDR1-1,sh-MDR1-2）。合成两对62nt含有编码短发夹RNA序列的寡核苷酸,双链退火后,克隆到经过BamHI和Xbal双酶切后的线性PGE-1载体的U6启动子的下游,使其定向重组,构建psh21-MDR1重组质粒。 2.重组质粒经过PCR、测序鉴定;采用脂质体转染方法,转染到耐阿霉素（ADM）的肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM,BEL-7402/AMD内;用MTT法测定细胞对化疗药物阿霉素的敏感性,流式细胞仪检测细胞膜表面P-gp表达和细胞内Rhdaming123（Rh123）的储留（P-gp功能试验）,激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内Rh123的分布。 结果 1.重组构建的psh21-MDR1载体经过PCR扩增后电泳分析以及测序鉴定,
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- [4].多药耐药相关蛋白-3表达与肝癌耐药的相关性[J]. 中国老年学杂志 2010(11)
- [5].不同RNAi对肝癌耐药细胞MDR1基因表达抑制作用比较[J]. 现代预防医学 2009(24)
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- [7].导入MDR1建立肝癌耐药细胞系及其动物实验研究[J]. 中华保健医学杂志 2011(05)
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- [10].川芎嗪对人肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM中P-gp表达的影响[J]. 广东药学院学报 2010(06)
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- [13].shRNA沉默MRE11表达对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FUDNA损伤修复的影响[J]. 世界华人消化杂志 2013(29)
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