RNA编辑酶ADAR1对小鼠淋巴细胞周期和凋亡的影响

论文摘要

RNA编辑（RNA editing）是DNA转录成RNA后, RNA编辑酶（RNA editing enzyme）对前体mRNA中的核苷酸进行删除、添加或重新修饰的过程。它改变了基因的序列以及遗传信息,从而产生广泛的生理效应。RNA编辑酶以脱氨方式使得RNA特异位点的腺嘌呤脱氨转变为次黄嘌呤,或者是特异位点的胞嘧啶变为尿嘧啶,而次黄嘌呤在碱基配对时被识别为鸟嘌呤。这些替换使得原有遗传密码或者剪切位点发生转变,从而使其编码蛋白质的结构和功能发生改变。ADAR1 （RNA依赖性腺嘌呤脱氨酶,adenosine deaminase acting on RNA）是研究最为广泛的一种RNA编辑酶。研究显示淋巴细胞增殖时ADAR1表达显著升高,而降低ADAR1表达后淋巴细胞杀伤功能显著降低。提示ADAR1可能通过调控细胞功能进而影响排斥反应的发生。据此我们前期通过小鼠双向淋巴细胞的培养实验已经证实降低ADAR1的表达能够抑制淋巴细胞的增殖,本实验借助排斥反应模型即双向淋巴细胞混合培养,通过ADAR1特异siRNA作用,抑制ADAR1的表达,观察淋巴细胞的细胞周期各期的变化,以及细胞凋亡的差异。进一步揭示ADAR1影响淋巴细胞增殖的机制。目的:探讨RNA编辑酶ADAR1的表达受抑制后,小鼠淋巴细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化。方法:用电转法将ADAR1特异性siRNA转入到处于混合培养的小鼠淋巴细胞中,培养48h,用RT-PCR检测转染效率;而后用流式细胞仪检测,观察细胞的周期和凋亡变化;最后通过RT-PCR检验周期蛋白E（cyclin E）基因和周期蛋白A1（cyclin A1）基因表达量的变化。结果:转染ADAR1特异性siRNA 48h后,小鼠淋巴细胞G1期细胞量增加,S期细胞量减少,G2细胞量保持恒定。另外,cyclin E基因的表达量降低而cyclin A1基因表达保持恒定。结论:处于经典混合培养体系下的小鼠淋巴细胞,在其RNA编辑酶ADAR1受到特异siRNA抑制后,小鼠淋巴细胞的增殖受到明显抑制,发生G1期到S期细胞的转化受阻,细胞凋亡增加。

论文目录

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• 文献回顾
• 正文
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• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢