论文摘要
白细胞介素2（interleukin 2,IL-2）主要是由T淋巴细胞产生的一种细胞因子,能激活T细胞,促进B细胞分化及分泌抗体,在机体的免疫反应中具有十分重要的调节作用,是一种天然的免疫增强剂。同时具有抗感染、抗肿瘤等多种作用。为了选择能够高效表达,且有利于进行规模化生产的表达体系大规模生产IL-2,本实验研究采用既具有原核特性又具有真核特性的毕赤酵母作为表达体系,利用人工合成的方法获取目的基因,构建了IL-2的表达载体pPICZα2-rhIL-2。通过电转化转染到酵母菌X-33后,筛选出稳定高效分泌表达IL-2的工程菌株,标记为pIL-2。经SDS-PAGE检测表达上清,结果显示表达上清中存在相对分子量约为15kDa的IL-2蛋白。进而在80L发酵条件下,进行了rhIL-2表达条件的优化,建立了一套适合于大规模发酵生产和初步纯化rhIL-2的方法。本实验首次用酵母表达体系获得了重组人IL-2蛋白并建立了初步的大规模发酵及纯化体系,为解决IL-2工程化大规模生产及进一步研究其生物学功能和临床应用奠定了基础。