应用异种脱细胞真皮的眼睑原位重建术的实验研究

论文摘要

目的：眼部整形手术需要多种修复材料，保存的异体巩膜是最常应用的材料之一，但同种异体巩膜来源有限，费用相对较高，没有眼库的医院，人体巩膜组织无从获得。而且异体巩膜移植有传染疾病的危险，因此眼科整形手术需要寻找更易的、更厚韧、更经济的理想材料。异种（猪）脱细胞真皮基质（acellular xenogenic dermal matrix，Xeno-ADM）是异种猪皮经特殊处理，去除其细胞成分后得到的一种真皮替代品。在异种（猪）脱细胞真皮基质的制作工艺中，去除表皮和细胞，去除组织抗原性，在真皮乳头层表面，保留了完整、连续的基底膜和真皮中胶原束结构，使其排列正常，弹力纤维正常存在。异种（猪）脱细胞真皮基质是近年来整形领域的重点研究项目。本研究进行异种脱细胞真皮基质替代睑板在兔眼睑缺损模型中进行眼睑原位重建术的动物实验，从组织学和细胞学水平研究获得可行性依据以证明异种脱细胞真皮基质可以作为睑板替代物应用于临床，为异种脱细胞真皮基质在眼部整形和外伤修复的推广应用提供依据。方法：36只新西兰大白兔随机分为两组，制作兔眼睑缺损动物模型，随机分别给予异种脱细胞真皮、兔巩膜（异体巩膜）行眼睑原位重建术。活体观察动物术后情况和移植物情况，于术后1、2、4、6、8和12周，取带植片（异种脱细胞真皮和异体巩膜）的眼睑，光镜下观察替代材料和自体睑板交界处的组织病理学改变，包括炎症反应、纤维血管化情况和融合情况。并取4、8和12周标本做透射电镜观察上述组织的超微结构改变。结果：1．异种脱细胞真皮与异体巩膜作为睑板替代物进行眼睑原位重建术后，大体观察二者反应类似，Xeno-ADM较异体巩膜炎症反应小，术后炎症反应消退较快，术后未见植入物暴露、脱落和感染现象，肉眼见血运良好无坏死，受体结膜可在植入体（猪脱细胞真皮或兔异体巩膜）表面爬行生长。2．光镜下观察Xeno-ADM在2周时移植物与兔自身睑板胶原组织的分界已不十分明显，并开始出现成纤维细胞和少量毛细血管。8周时移植物内可见增生的小血管和神经纤维团，交界不清逐渐过渡，12周时不能区分移植物和原组织胶原成分，脱细胞真皮自身的胶原纤维排列失去方向性，其间可见增生的小血管和神经纤维小管。异体巩膜组4周时才见新生血管和成纤维细胞，6周时仍可见少量淋巴细胞和浆细胞浸润。两组比较，Xeno-ADM在1、2、4、6、8w较异体巩膜组炎症反应消退快，血管化快，新生胶原长入快。12周时镜下表现基本类似，无显著差异。3．电镜下两组变化类似，4周时自体睑板与植入体已无明显界限，胶原纤维结构清晰，周期性横纹明显，纤维间可见到新生的毛细血管、神经及正在吞噬成纤维细胞的巨噬细胞。8周时可见到大量功能活跃的成纤维细胞，细胞质内有丰富的粗面内质网及多聚核糖体，粗面内质网呈池样扩张，扩张的池内含有蛋白样物质，成纤维细胞周围有许多均质的蛋白样物质。12周时自体睑板与植入体无明显界限，胶原纤维排列不整，横纵交错，其间可见到凋亡细胞、凋亡小体和神经纤维。胶原原纤维周期性横纹整齐，结构清晰。结论：1．异种脱细胞真皮与异体巩膜作为睑板替代物，两者大体观察无显著差异，组织病理学变化和免疫反应相似。从形态学上大致分为三个阶段：炎症反应阶段（植入后1-2周）、细胞浸润及纤维血管长入阶段（植入后2周-2月）、瘢痕组织形成阶段（植入后2-3月）。2．Xeno-ADM在眼睑重建代替睑板手术中，较异体巩膜炎症反应小而且术后炎症反应消退快，未见植入物暴露、脱落和感染现象，血运良好无坏死，受体结膜可在脱细胞真皮表面爬行生长。3．Xeno-ADM作为睑板修补材料，具有一定的弹性、韧性，与自体睑板结构类似、功能类似、颜色接近。愈合后接近正常睑板，能和植床永久性粘连，愈合紧密，术后反应轻微，无明显的移植排斥反应。总之，Xeno-ADM作为支撑物，保留了胶原纤维和小血管的基质成分，可以引导受体细胞，新生血管和新生胶原的长入，从而使移植物和受体密切愈合成为一体。因而有望成为一种优良的生物支架应用于眼睑成形术。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 0.序言
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢
• 附图